改变体毛生长和其色素形成的方法及用于该方法的组合物技术

本发明专利技术利用丝氨酸蛋白酶及其诱导毛囊乳头中程序性细胞死亡和细胞凋亡的能力来改变哺乳动物的体毛生长和体毛色素形成。本发明专利技术还介绍了含有下述药物的组合物，所述药物的一部分结构上与胰蛋白酶分子的一部分类似，使得所述药物以类似于胰蛋白酶的方式诱导程序性细胞死亡和细胞凋亡。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及在毛囊乳头中引起程序性细胞死亡和细胞凋亡的方法以及用于该方法的组合物。更具体而言，本专利技术涉及通过局部应用蛋白酶或影响受体介导的信号传导途径的分子来改变体毛生长和体毛色素形成速度的方法。
技术介绍
哺乳动物体毛的一个主要功能是提供环境保护。但是，在人类中该功能大部分已丧失，人类当中，体毛的去留基本上取决于美容目的。多种方法用于去除不想要的体毛，包括剃除、电针去除、拔除和注射治疗用抗雄激素。这些常规方法有其缺点。如剃除可能在皮肤表面产生切口，使人感到体毛重新生长的速度加快，还可能会留下不希望有的毛桩。而电针去除虽然可能会使某一区域在较长时间内不再出现不想要的体毛，但该方法通常费用昂贵，使人痛苦，还可能会引起疤痕。拔除不但使人疼痛不适，而且经常难以除去短毛。使用抗雄激素则经常伴有某些讨厌的副作用，如对肌肉的影响。而且，除电针去除之外，所有这些方法都必须反复进行，通常是每日进行，这使得使用者深感不便。由于以上原因，需要有延迟体毛生长的化学方法。Ahluwalia等的美国专利5,455,234中报导，哺乳动物的体毛生长可通过向皮肤使用半胱氨酸途径酶抑制剂而加以改变，该抑制剂会延缓或阻止影响与半胱氨酸相关的体毛生长速度和特性的代谢途径。但是，对半胱氨酸的这种抑制也会引起处理区域该氨基酸的缺乏。与此类似，Ahluwalia的美国专利5,095,007,Ahluwalia等的美国专利5,096,911和5,468,476以及Shander等的美国专利5,132,293和5,143,925中，使用酶抑制剂来改变体毛生长。在上述各例中，一个生化途径被改变以抑制一种终产物的产生。若能提供一种从化学上影响体毛生长和体毛色素形成，而又不致引起使用者中所需氨基酸的缺乏或不想要的副作用的方法，则是比较理想的。专利技术概述根据本专利技术，我们专利技术了一种改变哺乳动物体毛生长和体毛色素形成的方法，该方法包括以下步骤，基本上由以下步骤组成或由以下步骤组成在相对体毛生长终期的体毛生长诱导足够的时间内，向哺乳动物皮肤局部应用有效量的含蛋白酶的局部活性组合物。在本专利技术的另一个实施方案中，我们专利技术了一种诱导毛囊乳头中程序性细胞死亡和细胞凋亡的方法，该方法包括以下步骤，基本上由以下步骤组成或由以下步骤组成向哺乳动物皮肤局部应用局部活性药物，其具有的第一部分形状上与胰蛋白酶三维结构中的第二部分类似，因而该第一部分和第二部分均能影响受体介导的信号传导。在本专利技术的另一个实施方案中，我们专利技术了一种组合物，其包括以下成分，基本上由以下成分组成或由以下成分组成a)一种局部活性药物，其具有的第一部分形状上与胰蛋白酶三维结构中的第二部分类似，因而该第一部分和第二部分均能影响受体介导的信号传导；和b)一种可药用或美容用的载剂。在本专利技术的又一个实施方案中，我们专利技术了一种组合物，其包括以下成分，基本上由以下成分组成或由以下成分组成a)含有蛋白酶、能够在毛囊乳头中诱导细胞凋亡的局部活性药物；知b)一种可药用或美容用的载剂。本专利技术的组合物和方法，通过诱导毛囊乳头中的细胞凋亡，提供了延迟体毛生长和体毛色素形成的独特而又方便的手段。附图简述本专利的文件中包括至少一幅彩图。向美国专利与商标局提出请求并支付所需费用之后，专利与商标局可以提供带有彩图的该专利文件副本。参照以下详述和附图，可以更好地理解本专利技术，本专利技术的其它优点也是显而易见的附图说明图1(a)和1(c)为荧光胰蛋白酶标记的C57BI/6小鼠未处理皮肤的横切面图。图1(b)为荧光胰蛋白酶标记的C57BI/6小鼠用胰蛋白酶局部处理12天后皮肤的横切面图。图2为C57BI/6小鼠背部皮肤彩色视图，其中一些小鼠在诱导体毛生长后立即以载剂或胰蛋白酶处理，处理时间为(a)诱导体毛生长后8天；(b)诱导体毛生长后11天；(c)诱导体毛生长后14天。图2(a)中，左侧为处理小鼠，右侧为未处理小鼠。图2(b)和2(c)中，左侧为未处理小鼠，中间为载剂处理小鼠，右侧为胰蛋白酶处理小鼠。图3A为体毛诱导后(a)4天；(b)5天；(c)8天；和(d)12天，未处理小鼠皮肤的毛囊组织切片。图3B为体毛诱导后(a)4天；(b)5天；(c)6天；(d,e)8天；和(f)12天，胰蛋白酶处理小鼠皮肤毛囊组织切片。图4(A)为体毛诱导后(a)1天；(b)2天；(c)3天，未处理小鼠TUNEL染色皮肤组织的横切面图。图4(B)为体毛诱导后(a)1天；(b)2天；(c)3天；(d)4天；(e)5天；和(f)8天((a)-(e)为使用一次胰蛋白酶，(f)为每日使用胰蛋白酶)，胰蛋白酶处理小鼠TUNEL染色皮肤组织的横切面图。图5为在一延迟体毛周期中，反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定的胰蛋白酶处理小鼠和未处理小鼠皮肤的基因表达图。图5(A)示出该延迟体毛周期中1到11天的mRNA水平。图5(B)示出该延迟体毛生长周期中第8天的mRNA水平。图中示出25ng(A)和250ng(B)总RNA的RT-PCR产物。专利技术详述本文中，“哺乳动物”指包括哺乳纲的高等脊椎动物的任何成员，同Webster＇s Medical Desk Dictionary 407(1986)的定义，包括但不限于人类。“(％,w/v)”指每100ml组合物中给定成分的克数。“受体”包括细胞内和细胞外受体，指能接收和传导信号的分子。适合用于本专利技术组合物的局部活性药物包括蛋白酶，结构基本上与胰蛋白酶三维结构的一部分类似的化合物或其混合物。优选的蛋白酶为丝氨酸蛋白酶，包括但不限于胰蛋白酶，羧肽酶Y，蛋白酶Ⅳ，枯草溶菌素或混合物。选用的蛋白酶为胰蛋白酶。若不囿于理论，我们认为这些蛋白酶能够延迟体毛生长和体毛色素形成，原因在于它们通过诱导毛囊乳头中的程序性细胞死亡和细胞凋亡而改变了体毛生长周期，这种改变可能是由受体介导的信号传导诱导的。优选本专利技术组合物的总体积中，蛋白酶的量为约0％(w/v)到约5％(w/v)，更优选约0.01％(w/v)到约1％(w/v)。如本文实施例10所述，我们意外地发现，蛋白酶的蛋白水解活性不是影响诱导程序性细胞死亡的唯一因素。若不囿于理论，我们还认为，受体介导的信号传导事件可能也有助于诱导毛囊乳头中的程序性细胞死亡，这类药物可能与局部活性药物的结构成分有关。因此，第二种合适的局部活性药物包括下述化合物，其具有的一个部分形状上与影响该受体介导的信号传导的胰蛋白酶分子三维结构部分类似。本文中，“形状上基本类似”指所述化合物包括充足的表现类似于配体的结构，该结构可能占据一个受体，或取代受体的配体，或者通过蛋白水解激活或灭活受体，因而有助于诱导程序性细胞死亡。这类形状上基本与胰蛋白酶三维结构中的一部分类似的化合物包括但不限于蛋白水解灭活胰蛋白酶，其为不能消化胶原等蛋白的胰蛋白酶形式。优选在本专利技术组合物总体积中，这些化合物的量为约0％(w/v)到约5％(w/v)，最优选约0.01％(w/v)到约1％(w/v)。如果局部活性药用或美容用药物的释放参数要求的话，本专利技术的局部活性组合物可优选进一步包括可药用或美容用载剂，所述载剂能作为释放系统，使得局部活性药物能进入毛囊中。尽管可向皮肤附属结构(此处为毛囊)释放蛋白酶的任何商用载剂均可用作所述可药用或美容用载剂，但优选的是脂质体本文档来自技高网...

【技术保护点】
改变哺乳动物体毛生长和体毛色素形成的方法，包括：在相对体毛生长终期的体毛生长诱导足够的时间内，向动物的皮肤局部使用有效量的含有蛋白酶的局部活性组合物。

【技术特征摘要】
US 1996-7-12 60/021,6291．改变哺乳动物体毛生长和体毛色素形成的方法，包括在相对体毛生长终期的体毛生长诱导足够的时间内，向动物的皮肤局部使用有效量的含有蛋白酶的局部活性组合物。2．权利要求1的方法，其中蛋白酶是丝氨酸蛋白酶。3．权利要求2的方法，其中蛋白酶选自胰蛋白酶、羧肽酶-Y、蛋白酶Ⅳ、枯草溶菌素或其混合物。4．权利要求3的方法，其中蛋白酶是胰蛋白酶。5．权利要求4的方法，其中蛋白酶的量为局部活性组合物总体积的约0％(w/v)到5％(w/v)。6．权利要求5的方法，其中蛋白酶的量为局部活性组合物总体积的约0.01％(w/v)到1％(w/v)。7．权利要求1的方法，其中所述的改变之一是延迟体毛生长和体毛色素形成。8．权利要求1的方法，其中所述局部活性组合物还包括可药用或美容用载剂。9．权利要求8的方法，其中所述可药用或美容用载剂为脂质体或其混合物。10．权利要求9的方法，其中所述脂质体为非离子型。11．权利要求10的方法，其中所述脂质体由以下组分组成a)二月桂酸甘油酯、二硬脂酸甘油酯或其混合物；b)具有见于胆固醇中的类固醇骨架的化合物或其混合物；及c)具有约12到18个碳原子的脂肪酸醚或其混合物。12．权利要求10的方法，其中所述脂质体由以下组分组成a)二月桂酸甘油酯；b)胆固醇；及c)聚氧乙烯-10-硬脂基醚。13．权利要求11的方法，其中所述脂质体中各组分的比例约为53∶10∶22到63∶20∶32。14．权利要求8的方法，其中所述可药用或美容用载剂的量基于所述局部活性组合物的总体积约为0mg/mL到100mg/mL。15．权利要求1的方法，其中体毛生长终期体毛的生长诱导是通过剃除、电针去除、蜡脱毛、化学脱毛或所述方法的组合完成的。16．权利要求1的方法，其中所述时间为与体毛生长终期毛囊的体毛生长诱导同时或在其之前或之后即时。17．权利要求16的方法，其中所述时间为与体毛生长诱导同时或在其之后即时。18．权利要求1的方法，其中所述组合物还包括表面活性剂、保湿剂、湿润剂、调节剂、芳香剂、色剂或其混合物。19．权利要求18的方法，其中所述组合物的形式为剃毛乳膏、剃毛胶、剃毛粉、化学脱毛乳膏、其它目的在于促进体毛去除或实际去除体毛的产品或其组合。20．权利要求1的方法，还包括使所述组合物在皮肤上保留足够的时间从而实现所述改变。21．权利要求20的方法，其中所述时间为至少约15分钟。22．权利要求1的方法，还包括将所述蛋白酶与含N-2-羟乙基哌嗪-N＇-2-乙烷磺酸、(羟甲基)氨基甲烷或其混合物的缓冲液混合。23．在哺乳动物的毛囊乳头中诱导程序性细胞死亡和细胞凋亡的方法，包括向哺乳动物的皮肤局部使用局部活性药物，其具有的第一部分形状上与胰蛋白酶三维结构的第二部分类似，因而所述第一部分和第二部分均能影响受体介导的信号传导。24．权利要求23的方法，其中所述药物为胰蛋白酶、蛋白水解活性灭活的胰蛋白酶或其组合。25．含有以下成分的组合物a)一种局部活性药物，其具有的第一部分形状上与胰蛋白酶三维结构的第二部分类似，因而所述第一部分和第二部分均能影响受体介导的信号传导...

【专利技术属性】
技术研发人员：M塞贝尔格，SS沙皮罗，GFMJ考文伯，SJ维斯尼夫斯基，
申请(专利权)人：庄臣消费者有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]