一种用于ddPCR检测的引物探针组合制造技术

本发明专利技术提供一种用于ddPCR检测的引物探针组合，包括上游引物T2‑F、下游引物T2‑R和探针T2‑P；上游引物T2‑F：TGGAGTGTATGTATTTCTATTTG；下游引物T2‑R：TACCGTTGTAGCTAGGTA；探针T2‑P：ATGTCCGTTCACCGCTCTGA。本发明专利技术提供的引物探针组合可以用于制备试剂盒，该试剂盒可以用于检测晚枯病菌，具有特异性好、灵敏度好、结果稳定、重复性好、可以定量等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于检测，尤其涉及一种用于ddpcr检测的引物探针组合。

技术介绍

1、进口玉米携带病原真菌的方式主要有两种，一是存在于种皮内表面；二是存在于植物残体中夹杂在玉米种子间一起进境，同时玉米还可作为较大的杂质夹杂在其他种子里进境。

2、准确、快速检测进口玉米及其携带的土壤和病残体中的玉米病原真菌是防治玉米病害蔓延的关键。到目前为止，玉米晚枯病菌(cephalosporium maydis)的检测标准为《玉米晚枯病菌检疫鉴定方法》(sn/t 1900-2007)。该方法以形态学鉴定为主，由于病原菌的形态与近似种相似，不易分辨，且通过培养产生子实体的过程过于漫长，因此，传统方法不能快速准确鉴定该病原菌。该方法还存在实用性不足的缺陷，当病原菌在群体中丰度较低时，常常难以分离。

3、ddpcr(digital droplet pcr)是一种基于传统pcr技术发展而来的绝对定量核酸检测方法。它可以通过将反应体系分割成大量微小的液滴，在每个液滴中进行独立的pcr反应，最终通过计数阳性液滴的数量实现对初始核酸模板的绝对定量。但是，若引物或探本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于ddPCR检测的引物探针组合，其特征在于，包括上游引物T2-F、下游引物T2-R和探针T2-P；

2.根据权利要求1所述一种用于ddPCR检测的引物探针组合，其特征在于，探针T2-P的5′端连接有FAM报告基团。

3.根据权利要求1或2所述一种用于ddPCR检测的引物探针组合，其特征在于，探针T2-P的3′端连接有BHQ1基团。

4.一种试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-3任一项所述引物探针组合。

5.根据权利要求4所述试剂盒，其特征在于，还包括水、阴性对照、阳性对照、用于ddPCR反应的试剂中的一种或几种。

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【技术特征摘要】

1.一种用于ddpcr检测的引物探针组合，其特征在于，包括上游引物t2-f、下游引物t2-r和探针t2-p；

2.根据权利要求1所述一种用于ddpcr检测的引物探针组合，其特征在于，探针t2-p的5′端连接有fam报告基团。

3.根据权利要求1或2所述一种用于ddpcr检测的引物探针组合，其特征在于，探针t2-p的3′端连接有bhq1基团。

4.一种试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-3任一项所述引物探针组合。

5.根据权利要求4所述试剂盒，其特征在于，还包括水、阴性对照、阳性对照、用于ddpcr反应的试剂中的一种或几种。

6.权利要求1-3任一项所述引物探针组合在制备试剂盒中的应用...

【专利技术属性】
技术研发人员：李辉，李鑫，李献刚，李长征，李立梅，雷荣，
申请(专利权)人：东港海关综合技术服务中心，
类型：发明
国别省市：