一株NS2蛋白上融合表达TC标签的重组蓝舌病毒及构建方法技术

本发明专利技术属于基因工程领域，具体涉及一株在NS2蛋白上融合表达四半胱氨酸(Tetracysteine，TC)标签的重组蓝舌病毒及构建方法。本发明专利技术通过在野生型蓝舌病毒非结构蛋白NS2的C末端(第354位氨基酸后)插入TC标签，构建获得了重组蓝舌病毒BTV1‑NS2‑354TC；所述重组蓝舌病毒与野生型蓝舌病毒的生物学特性没有明显区别，重组蓝舌病毒表达的携带TC标签的NS2蛋白能被双砷染料(FlAsH‑EDT2)染色，在荧光显微镜下显示绿色荧光，可用于BTV感染的可视化定量检测以及NS2蛋白的定位和示踪研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程领域，具体涉及一株在ns2蛋白上融合表达tc标签的重组蓝舌病毒及构建方法。

技术介绍

1、蓝舌病是由蓝舌病毒(bluetongue virus，btv)引起的一种严重侵害羊、牛、鹿等反刍动物的烈性传染病，世界动物卫生组织(woah)将其列为法定通报的动物传染病，我国将其列为二类动物传染病。btv是呼肠孤病毒科(reoviridae)环状病毒属(orbivirus)的代表性成员，是一种由吸血库蠓(culicoides bitingmidges)传播的虫媒病毒，目前已发现29种不同的血清型，型与型之间不能交叉免疫。

2、btv粒子为二十面立体对称，无囊膜，其基因组由10个(s1～s10)分节段的线性双链rna(dsrna)组成。btv基因组编码7种结构蛋白(vp1～vp7)和4种非结构蛋白(ns1、ns2、ns3/ns3a、ns4)；btv粒子具有双层衣壳，vp2和vp5组成外层衣壳，内层衣壳由vp3和vp7组成。btv脱去外层衣壳后形成病毒核心粒子，3种酶蛋白vp1、vp4、vp6位于核心粒子内部；4种非结构蛋白ns1、ns本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一株在NS2蛋白上融合表达TC标签的重组蓝舌病毒，其特征在于，所述重组蓝舌病毒是在野生型蓝舌病毒非结构蛋白NS2第354位氨基酸后插入TC标签获得；所述TC标签为一个由四个半胱氨酸组成的发夹结构，其氨基酸序列为CCPGCC。

2.如权利要求1所述的重组蓝舌病毒，其特征在于，所述野生型蓝舌病毒为蓝舌病毒血清1型。

3.如权利要求2所述的重组蓝舌病毒，其特征在于，所述野生型蓝舌病毒为BTV-1分离株GS/11。

4.一种重组蓝舌病毒的构建方法，其特征在于，所述方法为：通过基因工程技术在野生型蓝舌病毒非结构蛋白NS2的第354位氨基酸后融合表达TC标签获...

【技术特征摘要】

1.一株在ns2蛋白上融合表达tc标签的重组蓝舌病毒，其特征在于，所述重组蓝舌病毒是在野生型蓝舌病毒非结构蛋白ns2第354位氨基酸后插入tc标签获得；所述tc标签为一个由四个半胱氨酸组成的发夹结构，其氨基酸序列为ccpgcc。

2.如权利要求1所述的重组蓝舌病毒，其特征在于，所述野生型蓝舌病毒为蓝舌病毒血清1型。

3.如权利要求2所述的重组蓝舌病毒，其特征在于，所述野生型蓝舌病毒为btv-1分离株gs/11。

4.一种重组蓝舌病毒的构建方法，其特征在于，所述方法为：通过基因工程技术在野生型蓝舌病毒非结构蛋白ns2的第354位氨基酸后融合表达t...

【专利技术属性】
技术研发人员：独军政，张格林，宋昱庆，孟凡华，田占成，关贵全，殷宏，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心，
类型：发明
国别省市：