一种可溶性鲍曼不动杆菌重组OmpA蛋白、其表达纯化方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种可溶性鲍曼不动杆菌重组OmpA蛋白、其表达纯化方法和应用，涉及基因工程技术领域。该重组OmpA蛋白通过将氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的OmpA基因导入表达载体中构建而得的重组载体在宿主菌中进行表达而获得。本发明专利技术通过表达载体(pET32a(+))和宿主菌(E.coli Rosetta(DE3))来构建重组OmpA蛋白，实现了OmpA蛋白的可溶性表达，并采用Ni‑NTA亲和层析结合阳离子交换层析的两步纯化策略，操作简便且重复性好，最终获得的OmpA蛋白纯度达95％以上，分子量为58kDa，符合疫苗抗原的纯度要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，具体为一种可溶性鲍曼不动杆菌重组ompa蛋白、其表达纯化方法和应用。

技术介绍

1、鲍曼不动杆菌(acinetobacter baumannii，简称ab)因其多重耐药性特征和医院获得性感染的高发率，已发展成为临床抗感染治疗面临的重大威胁。该病原体可引发多种感染，包括菌血症、脑膜炎、肺炎、心内膜炎、皮肤和软组织感染以及尿路感染。在过去的十年里，鲍曼不动杆菌已成为全球最具多重耐药性的病原体之一。在大多数情况下，感染是通过接触被鲍曼不动杆菌污染的医院设备或接触与感染患者接触过的医疗人员而获得的。多重耐药鲍曼不动杆菌引发的感染不仅会延长患者住院时间、增加治疗费用，还常导致较高的死亡率。更棘手的是，这种细菌对常用抗生素多粘菌素和替加环素的耐药性越来越强。为了治疗由多重耐药性鲍曼不动杆菌引起的传染病，迫切需要创新的治疗方法，如新药物和疫苗的开发。最有效和迅速的应对措施是治疗性疫苗。然而，目前缺乏对鲍曼不动杆菌保护性免疫的理解，导致了有效疫苗开发的进展缓慢。

2、外膜蛋白a(ompa)作为鲍曼不动杆菌(ab)关键致病因子，展现了显著本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种可溶性鲍曼不动杆菌重组OmpA蛋白，其特征在于，通过将氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示的OmpA基因导入表达载体中构建而得的重组载体在宿主菌中进行表达而获得；所述表达载体为质粒pET32a(+)，所述宿主菌为E.coli Rosetta(DE3)。

2.根据权利要求1所述的一种可溶性鲍曼不动杆菌重组OmpA蛋白，其特征在于，所述重组OmpA蛋白的分子量为58kDa。

3.如权利要求2所述的可溶性鲍曼不动杆菌重组OmpA蛋白的表达纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的可溶性鲍曼不动杆菌重组OmpA蛋白的表达纯化方法，其...

【技术特征摘要】

1.一种可溶性鲍曼不动杆菌重组ompa蛋白，其特征在于，通过将氨基酸序列如seq idno:1所示的ompa基因导入表达载体中构建而得的重组载体在宿主菌中进行表达而获得；所述表达载体为质粒pet32a(+)，所述宿主菌为e.coli rosetta(de3)。

2.根据权利要求1所述的一种可溶性鲍曼不动杆菌重组ompa蛋白，其特征在于，所述重组ompa蛋白的分子量为58kda。

3.如权利要求2所述的可溶性鲍曼不动杆菌重组ompa蛋白的表达纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的可溶性鲍曼不动杆菌重组ompa蛋白的表达纯化方法，其特征在于，所述步骤s1中，目的基因通过bamhi和xhoi的酶切位点连接到表达载体pet32a(+)上。

5.根据权利要求4所述的可溶性鲍曼不动杆菌重组ompa蛋白的表达纯化方法，其特征在于，步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾亚茹，杨红梅，代欢，陈立，贺春，
申请(专利权)人：利希生物制品重庆有限公司，
类型：发明
国别省市：