一种HPV18重组蛋白及其表达与纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种HPV18重组蛋白，更具体地，公开了针对HPV疫苗组分的HPV18重组蛋白的表达及纯化方法。HPV18蛋白为人乳头瘤病毒18抗原分子的活性功能片段重组融合，利用His‑pet30a质粒为载体，在大肠杆菌BL21中扩增质粒，并进行重组蛋白的可溶性分析。然后对重组蛋白的最佳表达条件进行筛选，从而实现了目的蛋白的可溶性表达，并对重组蛋白的最佳纯化条件进行筛选。本发明专利技术的技术方案实现了目的蛋白的可溶性表达，且通过高压破菌、Ni‑NTA粗纯、洗脱离心、超滤浓缩技术获得了高纯度的可溶性人乳头瘤病毒重组HPV18蛋白。该发明专利技术纯化工艺简捷、重复性好，所获目标蛋白纯度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物基因工程领域，具体涉及一种针对可溶性人乳头瘤病毒重组hpv18 蛋白，及其表达及纯化方法。

技术介绍

1、宫颈癌是全球女性中第四大常见癌症，对于全球来说都是重要的公共卫生问题，尤其在发展中国家。统计表明，宫颈癌在欠发达国家的发病率不成比例的高，可能是因为获得筛查的机会少和hpv疫苗的成本高。宫颈癌通常在宫颈的上皮组织中发展而来，是一种高度可预防疾病，有效的筛查和疫苗接种可以预防最致癌的hpv菌株，降低发病率，所以hpv疫苗的研究意义深远。同时，当下hpv检测存在许多问题，假阳性、无法确定感染程度、多型性问题、缺乏标准化、不适用于男性等等，因此hpv检测在预防宫颈癌等疾病方面仍然存在一些局限性。

2、hpv18（人乳头瘤病毒18型）是两种常见的人乳头瘤病毒，它们已被确认与宫颈癌等恶性肿瘤的发生密切相关。这些病毒通过感染人体的生殖道上皮细胞，引发异常细胞增殖，可能最终导致癌变。在防范、检测和治疗宫颈癌的过程中，研发hpv18重组蛋白具有重要意义。

技术实现思路

1、基于上述，本专利技本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种HPV18重组蛋白，其特征在于，通过将核苷酸序列分别如 SEQ ID NO:1所示的HPV18基因导入表达载体中构建而得的重组载体在宿主菌中进行表达而获得。

2.如权利要求1所述的HPV18重组蛋白，其特征在于，所述的表达载体为His-pet30a。

3.如权利要求1或2所述的HPV18重组蛋白，其特征在于，所述的宿主细胞为大肠杆菌BL21菌株。

4. 一种表达及纯化上述任一权利要求所述的HPV18重组蛋白的方法，其特征在于，包含如下步骤：

5.如权利要求 4 所述的方法，其特征在于：步骤 1）中的重组表达载体带 His 标签。<...

【技术特征摘要】

1. 一种hpv18重组蛋白，其特征在于，通过将核苷酸序列分别如 seq id no:1所示的hpv18基因导入表达载体中构建而得的重组载体在宿主菌中进行表达而获得。

2.如权利要求1所述的hpv18重组蛋白，其特征在于，所述的表达载体为his-pet30a。

3.如权利要求1或2所述的hpv18重组蛋白，其特征在于，所述的宿主细胞为大肠杆菌bl21菌株。

4. 一种表达及纯化上述任一权利要求所述的hpv18重组蛋白的方法，其特征在于，包含如下步骤：

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【专利技术属性】
技术研发人员：周金锐，刘碧霞，胡俊雅，陈立，贺春，
申请(专利权)人：利希生物制品重庆有限公司，
类型：发明
国别省市：