一种基于多引物设计的整合位点分析方法技术

技术编号:46561976 阅读:2 留言:0更新日期:2025-10-10 21:14
本发明专利技术属于生物信息技术领域,公开了一种基于多引物设计的整合位点分析方法,包括以下步骤:在AAV载体序列的多个位置插入引物,形成多引物载体;将所述多引物载体整合至宿主基因组中,通过引物扩增捕获整合位点所在序列;针对整合位点所在序列进行测序,获得测序数据;测序数据去冗余处理:通过多引物测序数据去冗余生信算法,消除因多引物扩增引起的测序结果冗余,得到精确的整合位点检测结果。本发明专利技术通过设计多个位置上的引物,可以解决在实验过程中AAV载体以非完整序列整合至宿主基因组的情况下,无法有效捕获整合位点所在序列的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物信息,具体地说,本专利技术属于生物信息学领域中二代测序数据分析的应用方向,公开了一种基于多引物设计的整合位点分析方法,旨在针对重组腺相关病毒(raav)载体开展整合位点的精准检测与分析。


技术介绍

1、重组腺相关病毒(raav)是整合分析常用的载体之一。腺相关病毒(aav)是一种非包膜病毒,经过设计编辑后的重组腺相关病毒(raav)可以作为载体向靶细胞递送序列,且有着结构简单、安全性高以及免疫原性低的特点,由此,raav成为了基因治疗领域最为广泛运用的载体之一。

2、整合位点分析(isa)是指在载体整合进入宿主基因组后,针对整合位点的位置检出与功能注释的分析,包括临床前和临床基因治疗。isa可以预测载体整合到靶细胞基因组中后是否会引发不良反应,是评估基因治疗载体生物安全性的关键。

3、相较于其他类型的载体如慢病毒载体等,aav载体在整合进入宿主基因组时,并不会将病毒序列完整插入,而是仅有部分序列会整合入宿主基因组,通常会丢失载体两端itr(inverse tandem repeats)的部分,在此情况下,常规的基于本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于多引物设计的整合位点分析方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.如权利要求1所述的基于多引物设计的整合位点分析方法,其特征在于,所述多引物测序数据去冗余生信算法包括以下步骤:

3.如权利要求1所述的整合位点分析方法,其特征在于,所述引物设计包括以下步骤:

4.如权利要求3所述的整合位点分析方法,其特征在于,所述引物的核苷酸序列如SEQID No.1、SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。

5.如权利要求1-3任一项所述的整合位点分析方法,其特征在于,所述测序数据去冗余处理包括以下步骤:

>6.一种用于权利要...

【技术特征摘要】

1.一种基于多引物设计的整合位点分析方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.如权利要求1所述的基于多引物设计的整合位点分析方法,其特征在于,所述多引物测序数据去冗余生信算法包括以下步骤:

3.如权利要求1所述的整合位点分析方法,其特征在于,所述引物设计包括以下步骤:

4.如权利要求3所述的整合位点分析方法,其特征在于,所述引物的核苷酸序列如seqid no.1、seq id no.2和seq id no.3所示。

5.如权利要求1-3任一项所述的整合位点分析方法,其特征在于,所述测序数据去冗余处理包括以下步骤:

6.一种用于权利要求1-5任一项所述分析方法的引物,其特征在于,核苷酸序列如seqid no.1、seq id no.2和seq id no.3所示。

...

【专利技术属性】
技术研发人员:王玉珏倪帅何峰阚科佳侯宇宸朱凤娇王威吴宁
申请(专利权)人:上海唯可生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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