一种利用自组装性能检测活性胶原蛋白含量的方法技术

本发明专利技术属于天然活性胶原蛋白技术领域，具体涉及一种利用自组装性能检测活性胶原蛋白含量的方法。本发明专利技术利用具有完整三螺旋结构的活性胶原蛋白特有的自组装性能，通过PBS缓冲液诱导活性胶原蛋白发生自组装形成胶原纤维，同时使用胰蛋白酶将已变性的胶原蛋白进一步酶解成小分子，然后通过超滤离心将沉淀的胶原纤维和变性的多肽溶液分离，通过检测沉淀中胶原蛋白的含量即可简单快速地对胶原中活性胶原的含量进行定量分析；且本发明专利技术所述检测方法可用于检测胶原蛋白溶液、敷料、海绵、粉剂、凝胶制剂等多种剂型胶原蛋白产品中活性胶原的含量，使用范围广。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然活性胶原蛋白，具体涉及一种利用自组装性能检测活性胶原蛋白含量的方法。

技术介绍

1、专利cn108659117a公开了一种定量检测胶原蛋白三螺旋结构含量的方法，利用具有完整三螺旋结构的胶原蛋白不能被胰蛋白酶酶解，而三螺旋结构破坏/部份破坏的胶原蛋白能被胰蛋白酶酶解的原理，通过测定胰蛋白酶酶解前后胶原蛋白溶液体系中羟脯氨酸的含量变化，计算得到胶原蛋白完整三螺旋结构的含量，但该方法存在的缺点是需要使用胰蛋白酶对样品进行长时间的酶解，只能用于胶原溶液的检测，且三氯乙酸浓度、温度和离子强度等因素均会影响检测结果，无法实现快速、准确的检测。

2、专利cn109884153a公开了通过利用完整三螺旋结构的胶原蛋白对蛋白酶具有耐受性，而三螺旋结构丧失或部份丧失的胶原蛋白易于被蛋白酶分解成小分子肽，采sds-page电泳对分解的肽段进行可视化分析，进而对胶原蛋白样品的三螺旋结构进行定量检测的方法，但该方法存在的缺点是检测过程复杂，且只能检测溶液中三螺旋结构保留率，无法检测其它形式的胶原产品，且检测结果易受电泳条带灵敏度和凝胶分辨率的影响。...

【技术保护点】

1.一种检测活性胶原蛋白含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的检测活性胶原蛋白含量的方法，其特征在于，所述步骤S1中，所述酸性溶液包括盐酸溶液或醋酸溶液，所述盐酸溶液的浓度为0.001-0.01mol/L，所述醋酸溶液的质量浓度为0.1-0.5%。

3.如权利要求1所述的检测活性胶原蛋白含量的方法，其特征在于，所述步骤S1中，所述待测样品溶液的胶原蛋白浓度为1-10mg/mL。

4.如权利要求1所述的检测活性胶原蛋白含量的方法，其特征在于，所述步骤S2中，调节pH为6.5-7.5，所述自组装的具体条件为：在28-32℃下自组装1...

【技术特征摘要】

1.一种检测活性胶原蛋白含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的检测活性胶原蛋白含量的方法，其特征在于，所述步骤s1中，所述酸性溶液包括盐酸溶液或醋酸溶液，所述盐酸溶液的浓度为0.001-0.01mol/l，所述醋酸溶液的质量浓度为0.1-0.5%。

3.如权利要求1所述的检测活性胶原蛋白含量的方法，其特征在于，所述步骤s1中，所述待测样品溶液的胶原蛋白浓度为1-10mg/ml。

4.如权利要求1所述的检测活性胶原蛋白含量的方法，其特征在于，所述步骤s2中，调节ph为6.5-7.5，所述自组装的具体条件为：在28-32℃下自组装1-48h。

5.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈微，周颖，李思祥，彭琪惠，叶春婷，
申请(专利权)人：广州创尔生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：