一种细胞群及其制备方法和应用技术

本发明专利技术的一种细胞群及其制备方法和应用，属于生物技术领域。该细胞群包含工程化免疫细胞，所述工程化免疫细胞包含外源核酸，所述外源核酸插入至B2M基因片段区使B2M基因被破坏，所述外源核酸包含编码嵌合抗原受体的核酸。该细胞群通过将编码嵌合抗原受体（CAR）的核酸敲入B2M基因座，对B2M进行了破坏，可用于制备通用型细胞治疗产品，克服了自体T细胞治疗受患者T细胞数量和质量的限制、且制备周期长的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，特别是涉及一种细胞群及其制备方法和应用。

技术介绍

1、在细胞治疗领域，特别是肿瘤治疗方面，细胞免疫疗法已经显示出了巨大的潜力。其中，car-t（嵌合抗原受体t细胞）疗法作为一种重要的细胞免疫疗法，在治疗多种恶性肿瘤中取得了显著的突破。

2、car-t疗法的关键是通过敲入携带特定抗原受体的基因来构建car-t细胞，使其具备识别和攻击肿瘤细胞的能力。然而，目前通过car-t编辑技术中获得的car-t产品的car阳性率相对较低，这使得直接应用低car阳性率的car-t产品会降低治疗效果。因此，如何提高car-t产品的car阳性率成为本领域技术人员亟待解决的技术问题。

3、并且，采用自体t细胞治疗又受到患者t细胞数量和质量的限制、且具有制备周期长的问题。

技术实现思路

1、针对上述car-t产品的car阳性率低的问题，本专利技术提供一种工程化免疫细胞，其通过将编码嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor ，car）的核酸敲入b2m基因座，对b2m进本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种细胞群，其特征在于，所述细胞群包含工程化免疫细胞；

2.根据权利要求1所述的细胞群，其特征在于，所述外源核酸还包含编码细胞因子的核酸，优选的，所述细胞因子选自：IL15、IL-21、IL-9、IL-7、IL-2、IL-12和IL-18中的至少一种；更优选的，所述细胞因子选自：IL15和/或IL-21。

3.根据权利要求1所述的细胞群，其特征在于，所述外源核酸由所述B2M基因内源启动子或外源MND启动子表达，优选由B2M基因内源启动子表达。

4.根据权利要求1所述的细胞群，其特征在于，所述外源核酸插入至Chr15: 44711358-447188...

【技术特征摘要】

1.一种细胞群，其特征在于，所述细胞群包含工程化免疫细胞；

2.根据权利要求1所述的细胞群，其特征在于，所述外源核酸还包含编码细胞因子的核酸，优选的，所述细胞因子选自：il15、il-21、il-9、il-7、il-2、il-12和il-18中的至少一种；更优选的，所述细胞因子选自：il15和/或il-21。

3.根据权利要求1所述的细胞群，其特征在于，所述外源核酸由所述b2m基因内源启动子或外源mnd启动子表达，优选由b2m基因内源启动子表达。

4.根据权利要求1所述的细胞群，其特征在于，所述外源核酸插入至chr15: 44711358-44718851区域；

5.根据权利要求1所述的细胞群，其特征在于，所述嵌合抗原受体包含依次连接的胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域；

6.根据权利要求5所述的细胞群，其特征在于，所述嵌合抗原受体还包含铰链区，所述铰链区连接所述胞外结构域和所述跨膜结构域；较佳地，所述铰链区包含cd8α或cd28的铰链区，例如为cd8α的铰链区；

7.根据权利要求6所述的细胞群，其特征在于，所述活化结构域为cd3ζ的功能性信号传导结构域，优选的，所述活化结构域包含如seq id no: 9所示的核苷酸序列；

8.根据权利要求1所述的细胞群，其特征在于，所述工程化免疫细胞的源细胞选自：t细胞、nk细胞、nkt细胞、单核细胞、肥大细胞、巨噬细胞、树突细胞、cik细胞和干细胞衍生的免疫效应细胞中的一种或多种；

9.权利要求1-8任一项所述的细胞群的制...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁峻彬，徐辉，曾晓敏，潘宇彬，
申请(专利权)人：广州瑞风生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：