用于检测次氯酸的试剂制造技术

本发明专利技术提供了能作为直接或间接测量、检测和／或筛选次氯酸或次氯酸盐的试剂的化合物或次氯酸探针。本发明专利技术还提供了能够用于直接或间接测量化学样品和生物学样品如活有机体的细胞和组织中的次氯酸或次氯酸盐的量的方法。具体而言，所述方法包括如下步骤：将本发明专利技术公开的次氯酸探针与样品接触，形成一种或多种荧光化合物，并且测量所述荧光化合物的荧光性质。本发明专利技术还提供了一种高通量筛选荧光方法，其用于检测或筛选化学和生物学样品中的次氯酸或能够直接或间接提高或降低次氯酸或次氯酸盐水平的化合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术提供了能够用作直接或间接测量、检测或筛选次氯酸或次氯酸盐的试剂的 次氯酸探针。本专利技术还提供了制备所述次氯酸探针的方法和使用所述次氯酸探针作为细胞 测定剂的方法。
技术介绍
自从1787年被首次发现以来，次氯酸盐(OCr)及其质子化形式次氯酸(HOCl)是 公知的并且已经很成功地投入了商业使用(例如漂白剂和氧化剂)。在1825年，报道了次 氯酸钙用于下水道、个人、停尸房、医院病房、船只和监狱的常规消毒的用途。另外，由于在 十九世纪末期发现次氯酸钠能有效对抗致病菌，次氯酸盐已经被广泛用作常规消毒剂超过 150多年。在活有机体内，可以在体内从被酶髓过氧化物酶(MPO)催化的化学反应中由过氧 化氢和氯离子合成次氯酸盐，所述酶可以是由炎症区域的活化噬菌细胞分泌的。作为亲 核非自由基氧化剂，次氯酸盐可以被用作微生物杀灭剂(Thomas，Ε. L.，Infect. Immun.， 1979，23，522-531)。另外，无论细菌还是正常健康细胞都不能中和其毒性效果，因为它们 缺少其催化解毒所需的酶(Lapenna，D.和 Cuccurullo，F.，Gen. Pharmacol. , 1996,27, 1145-1147)。通常，次氯酸盐可以与在杀灭细菌细胞和/或人类疾病中可能具有重要作用的一 些蛋白质反应(Thomas, E. L. ,Infect. Immun.，1979，23，522—531 ；McKenna，S. Μ.禾口 Davies， K. J. Α. ，Biochem. J. ，1988，254，685—692 ；Hazell, L. J.禾口 Stacker，R. ，Biochem. J. ，1993， 290，165-172 ；Hazell, L. J.，van den Berg, J. J.禾口 Stacker，R.，Biochem. J.，1994,302, 297-304)。当与蛋白质接触时，次氯酸盐可能引起蛋白质损害。例如，次氯酸盐可能改变 蛋白质结构，和/或引起蛋白质分裂和二聚化。作为强氧化剂，次氯酸盐还可以迅速氧化 低密度脂蛋白(LDL)。另外，次氯酸盐与DNA的反应还会导致DNA的化学修饰和结构变化 (Hawkins, C. L.禾口 Davies，Μ· J. , Chem. Res. Toxicol. ，2002，15，83—92 ；Prutz, W. Α. , Arch. Biochem. Biophys. ，1996,332,110-120 ；Arch.Biochem.Biophys. ，1998,349,183-191 ； Arch. Biochem. Biophys.，1999，371，107-114)。因为次氯酸盐及其共轭酸，即次氯酸的上述用途和作用，需要直接或间接检测和 测量，包括体内检测和测量次氯酸和次氯酸盐的方法。专利技术概述本专利技术提供了能够用作直接或间接测量、检测或筛选次氯酸或次氯酸盐，即次氯 酸的共轭碱的次氯酸探针的化合物。在一些实施方案中，本专利技术公开的次氯酸探针可以选 择性和特异性地检测、测量或筛选次氯酸。在其它实施方案中，本专利技术公开的次氯酸探针能 够在其它反应性氧类物质和/或氮类物质如102、而‘、02卜、‘0!1、0而0-和烷基过氧根(R00·) 的存在下与次氯酸选择性反应。在某些实施方案中，所述化合物或次氯酸探针由式(I)表 示 其中X为卤代；R1、R2、R3、R4、R5和R6各自独立地为氢、卤代、烷基、卤化的烷基、杂烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、烷芳基、杂环基、环烷基、环烯基、环炔基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烧 基氨基、烷芳基氨基、二芳基氨基、羟基、硫代、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、氰基、硝基、磺 酰基、磷酰基、磺酸酯、磷酸酯、-c( = 0)-Y或-c( = 0)-Q-Y，其中Y为氢、卤代、烷氧基、轻 基、硫代、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、烷芳基、芳烷基、氨基甲酰基、氨 基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、烷芳基氨基、二芳基氨基、烷硫基、杂烷基或具有3至 7个环原子的杂环基；并且Q为亚烷基、亚烯基、亚炔基、亚芳基、亚芳烷基或亚烷芳基，或者 R1和R2或R2和R3或R4和R5或R5和R6 —起形成5_、6_或7-元环烷基环、环烯基环、芳基 环、杂烷基环或杂芳基环；Z为键或二价连接基团；R 具有式(IIIA)、(IVA)和(VA)之一的结构 (HIA)s1 (IVA),和其中R7、R8和R9各自独立地为氢、卤代、烷基、卤化的烷基、烯基、炔基、芳基、芳烧 基、烷芳基、杂环基、环烷基、环烯基、环炔基、羟基、硫代、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、氰 基、硝基、羧基、酰基、氨基甲酰基、酰胺基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、烷芳基 氨基、二芳基氨基或杂烷基，或者式(ΙΙΙΑ)、(IVA)或(VA)的R7和R8，或者式(IVA)的R8和 R9 一起形成5-、6_或7-元环烷基环、环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环；并且Q1和Q2各自独立地为氨基或-0-Q3，其中Q3为氢、烷基、烯基、烷氧基烷基、环烷基、 环烯基、环炔基、芳基、烷芳基、芳烷基、烷基酰胺基、烷氧基酰胺基、烷氧基羰基、卤化的烧 基或杂烷基，条件是Q1和Q2不同时为氨基。在一些实施方案中，R是具有式(IIIB)、(IVB)和(VB)之一结构的单价二氧化芳 基 其中R7、R8和R9各自如上面所定义；Rw和R11各自独立地为氢、烷基、烯基、烷氧基烷基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、烷芳基、芳烷基、烷基酰胺基、烷氧基酰胺基、烷氧基羰 基、卤化的烷基或杂烷基。在一些实施方案中，X为F。在其它实施方案中，Z为键。在另外的实施方案中，Z 为亚烷基、亚烯基、亚炔基、亚杂烷基、亚杂烯基、亚杂炔基、亚芳基或亚杂芳基。在某些实施方案中，R1和R2 —起形成5-、6_或7-元环烷基环、环烯基环、芳基环、 杂烷基环或杂芳基环。在其它实施方案中，R4和R5 —起形成5-、6_或7-元环烷基环、环烯 基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环。在另外的实施方案中，R2和R3 —起形成5-、6_或7-元 环烷基环、环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环。在其它实施方案，R5和R6 —起形成5-、 6-或7-元环烷基环、环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环。在其它实施方案，R7和R8 — 起形成5-、6_或7-元环烷基环、环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环。在某些实施方案中，R3和R6各自独立地为氢或-C ( = 0) NR12R13,其中R12和R13各自 独立地为氢、烷基或芳基。在另外的实施方案中，式⑴的R3和R6各自为-C( = 0)NR12R13, 其中R12和R13各自为烧基。在另外的实施方案中，R3和R6各自为_C( = 0)N(CH2CH3)2。在一些实施方案中，式(IIIB)-(VB)中任何一个的Rltl和R11各自独立地为氢、烷 基、烯基、烷氧基烷基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、烷芳基、芳烷基、烷基酰胺基、烷氧基 酰胺基、烷氧基羰基、卤化的烷基或杂烷基。在另外的实施方案中，Rltl为甲基，R11为氢。在某些实施方案中，所述化合物或次氯酸探针由式(VI)表示 其中X为卤代；R本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种式（Ⅰ）的化合物：　　＊＊＊　（Ⅰ）　　其中Ｘ为卤代；　　Ｒ↑［１］、Ｒ↑［２］、Ｒ↑［３］、Ｒ↑［４］、Ｒ↑［５］和Ｒ↑［６］各自独立地为氢、卤代、烷基、卤化的烷基、杂烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、烷芳基、杂环基、环烷基、环烯基、环炔基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、烷芳基氨基、二芳基氨基、羟基、硫代、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、氰基、硝基、磺酰基、磷酰基、磺酸酯、磷酸酯，－Ｃ（＝Ｏ）－Ｙ或－Ｃ（＝Ｏ）－Ｑ－Ｙ，其中Ｙ为氢、卤代、烷氧基、羟基、硫代、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、烷芳基、芳烷基、氨基甲酰基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、烷芳基氨基、二芳基氨基、烷硫基、杂烷基或具有３至７个环原子的杂环基；Ｑ为亚烷基、亚烯基、亚炔基、亚芳基、亚芳烷基或亚烷芳基，或者Ｒ↑［１］和Ｒ↑［２］或Ｒ↑［２］和Ｒ↑［３］或Ｒ↑［４］和Ｒ↑［５］或Ｒ↑［５］和Ｒ↑［６］一起形成５－、６－或７－元环烷基环、环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环；　　Ｚ为键或二价连接基团；　　Ｒ具有式（ⅢＡ）、（ⅣＡ）和（ⅤＡ）之一的结构：＊＊＊　　其中Ｒ↑［７］、Ｒ↑［８］和Ｒ↑［９］各自独立地为氢、卤代、烷基、卤化的烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、烷芳基、杂环基、环烷基、环烯基、环炔基、羟基、硫代、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、氰基、硝基、羧基、酰基、氨基甲酰基、酰胺基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、烷芳基氨基、二芳基氨基或杂烷基，或者式（ⅢＡ）、（ⅣＡ）或（ⅤＡ）的Ｒ↑［７］和Ｒ↑［８］或者式（ⅣＡ）的Ｒ↑［８］和Ｒ↑［９］一起形成５－、６－或７－元环烷基环、环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环；并且　　Ｑ↑［１］和Ｑ↑［２］各自独立地为氨基或－Ｏ－Ｑ↑［３］，其中Ｑ↑［３］是氢、烷基、烯基、烷氧基烷基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、烷芳基、芳烷基、烷基酰胺基、烷氧基酰胺基、烷氧基羰基、卤化的烷基或杂烷基，条件是Ｑ↑［１］和Ｑ↑［２］不同时为氨基。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-3-12 60/906,788一种式(I)的化合物其中X为卤代；R1、R2、R3、R4、R5和R6各自独立地为氢、卤代、烷基、卤化的烷基、杂烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、烷芳基、杂环基、环烷基、环烯基、环炔基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、烷芳基氨基、二芳基氨基、羟基、硫代、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、氰基、硝基、磺酰基、磷酰基、磺酸酯、磷酸酯，-C(＝O)-Y或-C(＝O)-Q-Y，其中Y为氢、卤代、烷氧基、羟基、硫代、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、烷芳基、芳烷基、氨基甲酰基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、烷芳基氨基、二芳基氨基、烷硫基、杂烷基或具有3至7个环原子的杂环基；Q为亚烷基、亚烯基、亚炔基、亚芳基、亚芳烷基或亚烷芳基，或者R1和R2或R2和R3或R4和R5或R5和R6一起形成5-、6-或7-元环烷基环、环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环；Z为键或二价连接基团；R具有式(IIIA)、(IVA)和(VA)之一的结构其中R7、R8和R9各自独立地为氢、卤代、烷基、卤化的烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、烷芳基、杂环基、环烷基、环烯基、环炔基、羟基、硫代、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、氰基、硝基、羧基、酰基、氨基甲酰基、酰胺基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、烷芳基氨基、二芳基氨基或杂烷基，或者式(IIIA)、(IVA)或(VA)的R7和R8或者式(IVA)的R8和R9一起形成5-、6-或7-元环烷基环、环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环；并且Q1和Q2各自独立地为氨基或-O-Q3，其中Q3是氢、烷基、烯基、烷氧基烷基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、烷芳基、芳烷基、烷基酰胺基、烷氧基酰胺基、烷氧基羰基、卤化的烷基或杂烷基，条件是Q1和Q2不同时为氨基。F2008800148622C00011.tif,F2008800148622C00012.tif2.权利要求1的化合物，其中R是具有式(IIIB)、(IVB)和(VB)之一结构的单价二氧 化芳基其中R7、R8和R9各自独立地为氢、卤代、烷基、卤化的烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、 烷芳基、杂环基、环烷基、环烯基、环炔基、羟基、硫代、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、氰基、硝 基、幾基、 酰基、氨基甲酰基、酰胺基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、烷芳基氨基、 二芳基氨基或杂烷基，或者式(IIIB)-(VB)的R7和R8或者式(IVB)的R8和R9 —起形成5_、 6-或7-元环烷基环、环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环；并且R10和R11各自独立地为氢、烷基、烯基、烷氧基烷基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、烷芳 基、芳烷基、烷基酰胺基、烷氧基酰胺基、烷氧基羰基、商化的烷基或杂烷基。3.权利要求1-2中任一项的化合物，其中X为F。4.权利要求1-2中任一项的化合物，其中Z为键。5.权利要求1-2中任一项的化合物，其中Z为亚烷基、亚烯基、亚炔基、亚杂烷基、亚杂 烯基、亚杂炔基、亚芳基或亚杂芳基。6.权利要求1-5中任一项的化合物，其中R1和R2—起形成5-、6_或7-元环烷基环、 环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环。7.权利要求1-5中任一项的化合物，其中R4和R5—起形成5-、6_或7-元环烷基环、 环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环。8.权利要求1-5中任一项的化合物，其中R2和R3—起形成5-、6_或7-元环烷基环、 环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环。9.权利要求1-5中任一项的化合物，其中R5和R6—起形成5-、6_或7-元环烷基环、 环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环。10.权利要求1-5中任一项的化合物，其中R3和R6各自独立地为氢或-C(= 0)NR12R13, 其中R12和R13各自独立地为氢、烷基或芳基。11.权利要求10的化合物，其中式(I)的R3和R6各自为-(C= O)NR12R13,其中R12和 R13各自为烷基。12.权利要求11的化合物，其中R3和R6各自为-C( = 0) N(CH2CH3) 2。13.权利要求1-12中任一项的化合物，其中R7和R8—起形成5-、6_或7-元环烷基环、 环烯基环、芳基环、杂烷基环或杂芳基环。14.权利要求2-13中任一项的化合物，其中Rki和R11各自独立地为氢、烷基、烯基、烷 氧基烷基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、烷芳基、芳烷基、烷基酰胺基、烷氧基酰胺基、烷氧 基羰基、商化的烷基或杂烷基。15.权利要求14的化合物，其中Rltl为甲基，并且R11为氢。16.权利要求1的化合物，其中所述化合物具有式(VI)结构 其中X为卤代；R1 > R2> R3> R4> R5和R6各自独立地为氢、卤代、烷基、卤化的烷基、杂烷基、烯基、炔基、芳 基、芳烷基、烷芳基、杂环基、环烷基、环烯基、环炔基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨 基、烷芳基氨基、二芳基氨基、羟基、硫代、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、氰基、硝基、磺酰基、 磷酰基、磺酸酯、磷酸酯、_C( = 0)-Y或-C( = 0)-Q-Y，其中Y为氢、卤代、烷氧基、羟基、硫 代、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨丹，孙振宁，陈妍，刘凤琴，
申请(专利权)人：弗西蒂技术有限公司，晨兴创投有限公司，
类型：发明
国别省市：HK[中国|香港]