基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针及其制备方法，涉及一种荧光探针。提供一类高灵敏、高选择性的基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针及其制备方法。基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针为含有部花菁荧光团结构的、以二甲胺基硫代甲酰基为酚羟基保护基的二甲胺基硫代甲脂基部花菁化合物。先合成中间体A，再合成中间体B，最后合成目标产物基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针。所述基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针可应用于中性条件下水溶液中HClO的荧光检测。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种荧光探针，尤其是涉及一种以二甲胺基硫代甲酰基为酚羟基保护基团、以部花菁为荧光团的荧光探针及其制备和在中性条件下水溶液中次氯酸荧光法检测中的应用。
技术介绍
次氯酸(HClO)是生物体髓过氧化物酶(myeloperoxidase，ΜΡ0)介导产生的一种重要的活性氧物种，在多种生理、病理过程中扮演重要角色。设计合成具有高灵敏性、专一性强的Hao荧光探针，建立应用于细胞内Hao的荧光显微成像方法，实现目标分子实时、 原位的示踪，为研究生物体内与Hao相关的分子和细胞事件，以及与之相关的疾病的药物筛选与评价提供可靠信息，具有重要的科学意义及应用前景。该领域已成为人们研究的热；ο近几年来，已报道了数种针对ΗαΟ的荧光探针，如DCFH、DHR (参见文献: A. Bizyukin, et al，Bull. Exp. Biol. Med. 1995，119，347. )、APF (参见文献T. Nagano， et al, J. Biol. Chem. 2003，278，3170. )、MitoAR(参见文献:T. Nagano, et al, J. Am. Chem. Soc. 2007，129，10324.)等，但以上探针除了能够检测Η(Π0，对其他的活性氧物种亦有不同程度的荧光响应。由于每种活性氧都有其各自独特的生理活性，因此对专一性强的HClO 荧光探针的需求显得尤为迫切。已报道的另外一些Hao探针中，有的需在强碱性(如ρΗ 12)的苛刻条件下使用(参见文献H.M.Ma，et al，Chem. Eur. J. 2008，14，4719.)，或水溶性差(参见文献:W. Tan et al, Chem. Eur. J. 2009，15,2305.)，无法真正应用于生物体系中。 目前，能够实际应用于中性条件下水溶液中Hao检测的荧光探针极少，且需在繁琐苛刻的条件下高成本制备而得(参见文献T.Nagano，et al, J. Am. Chem. Soc. 2007,129, 7313.； 文献J.Tae，et al, Org. Lett. 2009,11, (4)，859.；文献R. Weissleder，P. Libby，et al, Chem. Biol. 2007，14，1221.)。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对已报道的各种ΗαΟ荧光探针所存在的不足与缺陷，提供一类高灵敏、高选择性的。所述基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针(以下记为探针丄)的分子结构式如下权利要求1.基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针，其特征在于其分子结构式如下 所述基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针为含有部花菁荧光团结构的、以二甲胺基硫代甲酰基为酚羟基保护基的二甲胺基硫代甲脂基部花菁化合物。2.如权利要求1所述的基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针的合成方法，其特征在于其步骤为1)中间体A的合成在容器中按摩尔比加入1.O份的氢化钠，队气氛下加入DMF，冰浴下搅拌后将溶有1. O份对羟基苯甲醛的干燥DMF溶液滴入其中，维持队气氛，搅拌后撤去冰浴，在队气氛下将混合物加入另一事先溶解有1. O份二甲胺基硫代甲酰氯的干燥DMF溶液，反应混合物以二氯甲烷稀释1. O 2. O倍，所得有机相依次以饱和氯化钠和水洗涤，旋转蒸发抽干二氯甲烷，以柱色谱分离，得白色的中间体A ；2)中间体B的合成在容器中按摩尔比加入1.O份2，3，3-trimethyl-3H-indole,及 3. O份l，4-butane sultone于邻二氯苯溶剂中，溶解，于氮气氛下油浴中加热回流搅拌，反应混合物冷却后倒入冰冻的丙酮中，有黑红色固体析出，以冰冻丙酮洗涤，得呈粉红色粉末的中间体B ；3)目标产物基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针的合成在容器中等摩尔比加入中间体A和中间体B，以乙醇溶解，再加入1. O 3. O份哌啶；混合物在氮气气氛下反应，再旋转蒸发抽干溶剂，固体残余物以柱色谱分离，得橙黄色的目标产物基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针。3.如权利要求2所述的基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针的合成方法，其特征在于在步骤1)中，所述氢化钠的质量分数为55% 65%。4.如权利要求2所述的基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针的合成方法，其特征在于在步骤1)中，所述在K气氛下将混合物加入另一事先溶解有1. O份二甲胺基硫代甲酰氯的干燥DMF溶液，是待温度自然升至室温后，在队气氛下将混合物加入另一事先溶解有1. O 份二甲胺基硫代甲酰氯的干燥DMF溶液。5.如权利要求2所述的基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针的合成方法，其特征在于在步骤1)中，所述依次以饱和氯化钠和水洗涤，是先以饱和氯化钠洗3次、再以水洗1次。6.如权利要求2所述的基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针的合成方法，其特征在于在步骤1)中，所述柱色谱采用二氯甲烷/石油醚=1 3。7.如权利要求2所述的基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针的合成方法，其特征在于在步骤2)中，所述油浴的温度为120°C。8.如权利要求2所述的基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针的合成方法，其特征在于在步骤3)中，所述乙醇的加入量为lO.OmL。9.如权利要求2所述的基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针的合成方法，其特征在于在步骤幻中，所述柱色谱采用二氯甲烷/乙醇=20 3。10.如权利要求1所述的基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针应用于中性条件下水溶液中Hao的荧光检测。全文摘要，涉及一种荧光探针。提供一类高灵敏、高选择性的。基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针为含有部花菁荧光团结构的、以二甲胺基硫代甲酰基为酚羟基保护基的二甲胺基硫代甲脂基部花菁化合物。先合成中间体A，再合成中间体B，最后合成目标产物基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针。所述基于部花菁的检测次氯酸的荧光探针可应用于中性条件下水溶液中HClO的荧光检测。文档编号C09K11/06GK102391855SQ201110284700公开日2012年3月28日 申请日期2011年9月22日 优先权日2011年9月22日专利技术者王淑萍, 詹心琪, 郑洪 申请人:厦门大学本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：郑洪，王淑萍，詹心琪，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：
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