【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及气体输注治疗，尤其是涉及一种纳米/气体工程化红细胞药物制剂及其制备方法和应用。
技术介绍
1、近年来，气体疗法凭借o2、no、co和h2s等生理气体分子的独特治疗作用，在治疗各种主要疾病方面受到了广泛关注。
2、在关节炎治疗中，低浓度co通过激活nrf2/ho-1途径抑制促炎因子(如tnf-α、il-1β)，减轻关节炎症，还可能减少软骨细胞凋亡。
3、在肿瘤治疗中，高浓度co通过干扰细胞色素c氧化酶对癌细胞的线粒体产生直接的不良影响，导致过量的强氧化剂过氧化氢(h2o2)产生、atp耗竭和促凋亡效应。高浓度no可以与超氧化物阴离子(o2-)反应形成过亚硝酸盐(onoo-)，这是一种有效的氧化和硝化活性氮物质(rns)，不仅诱导直接的dna损伤，还通过半胱氨酸残基的s-亚硝基化介导蛋白质的翻译后修饰，从而破坏癌细胞的代谢稳态。
4、然而，气体疗法在临床应用中面临着气体非特异性释放和生物安全性问题的挑战。红细胞(rbc)作为天然的气体载体，具有稳定性高、与气体分子亲和力强等优点，但其微米级的尺寸限制了其到达病变区域和进入目标细胞的能力。因此，开发一种工程化红细胞，使其能够进行气体输注治疗的新方法具有重要的临床意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种纳米/气体工程化红细胞药物制剂及其制备方法和应用，该系统能够实现co和no的安全高效递送，并在关节炎病变部位或肿瘤内特异性释放，利用co和no对细胞的调控作用，重塑关节炎病变部位或
2、为实现上述目的，本专利技术提供了一种纳米/气体工程化红细胞药物制剂的制备方法，包括如下步骤：
3、s1、利用脂质体挤出器将洗涤干净的红细胞通过聚碳酸酯多孔膜挤出，得到纳米工程化红细胞nrbc；
4、s2、使步骤s1制备的纳米工程化红细胞担载co或no气体，纳米/气体工程化红细胞制剂nrbcs。
5、优选的，步骤s1中，聚碳酸酯多孔膜孔径为5-0.2μm。
6、优选的，步骤s2中，担载co或no气体包括：将步骤s1得到的nrbc在搅拌状态下暴露于co或no气体中，实时验证气体的担载情况，得到气体饱和的nrbcs。
7、第二方面，本专利技术提供了一种上述的制备方法制备的纳米/气体工程化红细胞药物制剂，纳米/气体工程化红细胞制剂nrbcs粒径为150nm。
8、第三方面，本专利技术提供了上述的纳米/气体工程化红细胞药物制剂在非医疗目的的气体输注治疗中的应用。
9、第四方面，本专利技术提供了一种上述的制备方法在制备气体输注治疗药物制剂中的应用，气体输注治疗药物制剂包括：关节炎气体输注治疗药物制剂、肿瘤气体输注治疗药物制剂；
10、制备方法包括：将目的细胞膜与洗涤干净的红细胞共挤出，构建细胞膜/纳米/气体工程化红细胞，细胞膜/纳米/气体工程化红细胞可靶向同源目的细胞。
11、优选的，关节炎气体输注治疗药物制剂的制备方法包括：
12、s71、将洗涤干净的红细胞与巨噬细胞(macrophage)膜混合后通过聚碳酸酯多孔膜共挤出，得到巨噬细胞膜/纳米/气体工程化红细胞m-nrbc；
13、s72、将巨噬细胞膜/纳米/气体工程化红细胞m-nrbc暴露于co气体中，得到m-nrbcco。
14、优选的，肿瘤气体输注治疗药物制剂的制备方法包括：
15、s81、将洗涤干净的红细胞与肿瘤细胞(tumor)膜混合后通过聚碳酸酯多孔膜共挤出，得到肿瘤细胞膜/纳米/气体工程化红细胞t-nrbc；
16、s82、将肿瘤细胞膜/纳米/气体工程化红细胞t-nrbc暴露于co或no气体中，得到t-nrbcco和t-nrbcno。
17、优选的，肿瘤气体输注治疗药物制剂中，t-nrbcco:t-nrbcno的摩尔比为1～4:4～1。
18、优选的，肿瘤气体输注治疗药物制剂中，t-nrbcco:t-nrbcno的摩尔比为1:3。
19、因此，本专利技术一种纳米/气体工程化红细胞药物制剂及其制备方法和应用，具有以下有益效果：
20、(1)纳米工程化红细胞nrbc通过聚碳酸酯多孔膜挤出器制备，co和no气体会与血红蛋白分子上原本与氧气结合的位点结合形成nrbcco和nrbcno；
21、(2)纳米红细胞内的血红蛋白含有血卟啉，在h2o2条件下，可以响应性释放co和no；
22、(3)提取巨噬细胞细胞膜与nrbc共挤出，构建巨噬细胞细胞膜/纳米/co气体工程化红细胞(m-nrbcco)，实现对同源巨噬细胞的靶向治疗；m-nrbcco在关节腔内巨噬细胞内的高过氧化氢(h2o2)微环境中特异性释放co，co可以诱导ho-1的表达，通过nrf2/ho-1途径协调巨噬细胞的极化稳态，促进抗炎型巨噬细胞(m2型)的形成，抑制促炎型巨噬细胞(m1型)的活性，从而发挥抗炎作用；
23、(4)提取肿瘤细胞膜与nrbc共挤出，构建肿瘤细胞膜/纳米/气体工程化红细胞(t-nrbcco和t-nrbcno)，实现对同源肿瘤细胞的靶向治疗；t-nrbcco和t-nrbcno在肿瘤细胞内的高过氧化氢(h2o2)微环境中特异性释放co和no，在过氧化物酶催化作用下，产生大量的ros和rns，破坏肿瘤细胞的代谢稳态，同时调节肿瘤免疫抑制微环境，将“冷”肿瘤转变为“热”肿瘤，增强免疫介导的肿瘤杀伤；经过验证，在co和no摩尔比为1:3的条件下，抗肿瘤治疗效果最佳；
24、(5)t-nrbcco和t-nrbcno在肿瘤细胞内的高过氧化氢(h2o2)微环境中特异性释放co和no，co促进·oh和o2·-的产生，而no与升高的o2·-反应产生更多的onoo-，co和no的双气体共递送和协同作用显著增强了双气体在肿瘤治疗中的治疗效果；
25、(6)本专利技术纳米/气体工程化红细胞药物制剂具有优异的生物安全性，不引起急性或长期毒性，具有良好的生物相容性。
26、下面通过附图和实施例，对本专利技术的技术方案做进一步的详细描述。
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1.一种纳米/气体工程化红细胞药物制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种纳米/气体工程化红细胞药物制剂的制备方法，其特征在于：S1中，聚碳酸酯多孔膜孔径为5～0.2μm。
3.根据权利要求1所述的一种纳米/气体工程化红细胞药物制剂的制备方法，其特征在于，S2中，担载CO或NO气体包括：
4.一种如权利要求1～3任一项所述的制备方法制备的纳米/气体工程化红细胞药物制剂，其特征在于：纳米/气体工程化红细胞制剂nRBCs粒径为150nm。
5.一种如权利要求4所述的纳米/气体工程化红细胞药物制剂在非医疗目的的气体输注治疗中的应用。
6.一种如权利要求1～3任一项所述的制备方法在制备气体输注治疗药物制剂中的应用，其特征在于，气体输注治疗药物制剂包括关节炎气体输注治疗药物制剂、肿瘤气体输注治疗药物制剂；
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，关节炎气体输注治疗药物制剂的制备方法包括：
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，肿瘤气体输注治疗药物制剂的制备方法包括：p>
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：肿瘤气体输注治疗药物制剂中，T-nRBCCO:T-nRBCNO的摩尔比为1～4:4～1。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：肿瘤气体输注治疗药物制剂中，T-nRBCCO:T-nRBCNO的摩尔比为1:3。
...【技术特征摘要】
1.一种纳米/气体工程化红细胞药物制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种纳米/气体工程化红细胞药物制剂的制备方法，其特征在于：s1中，聚碳酸酯多孔膜孔径为5～0.2μm。
3.根据权利要求1所述的一种纳米/气体工程化红细胞药物制剂的制备方法，其特征在于，s2中，担载co或no气体包括：
4.一种如权利要求1～3任一项所述的制备方法制备的纳米/气体工程化红细胞药物制剂，其特征在于：纳米/气体工程化红细胞制剂nrbcs粒径为150nm。
5.一种如权利要求4所述的纳米/气体工程化红细胞药物制剂在非医疗目的的气体输注治疗中的应用。
6.一种如...
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