【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及发酵，尤其涉及一种从柠檬马鞭草发酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制备方法。
技术介绍
1、在化妆品和保健品行业中，寻找具有美白和抗衰老活性的天然成分一直是研究的热点。毛蕊花糖苷作为一种具有显著美白和抗衰老效果的天然活性成分，因其独特的药理活性和安全性，受到了广泛的关注，通常采用毛蕊花糖苷的制备方法提取毛蕊花糖苷。
2、但现有的制备方法存在价格昂贵，含量低，分离纯化工序复杂，回收率低，单体纯度低的问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种从柠檬马鞭草发酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制备方法，旨在解决现有技术中的制备方法存在价格昂贵，含量低，分离纯化工序复杂，回收率低，单体纯度低的问题的技术问题。
2、为实现上述目的，本专利技术采用的一种从柠檬马鞭草发酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制备方法，包括以下步骤：
3、步骤一、首先按比例取柠檬马鞭草枝叶进行破碎和切段，制得柠檬马鞭草短枝备用；
4、步骤二、随后将柠檬马鞭草短枝碎用柠檬酸水浸没，并发酵36-72小时，高速离心并过滤，弃去离心液，得到发酵药渣；
5、步骤三、之后用浓度为85%的乙醇提取两次，收集两次提取液，减压真空回收乙醇，加水稀释至乙醇浓度为10%以下，得到浓缩液备用；
6、步骤四、将上述浓缩液上d101大孔树脂，采用湿法上柱，待上完后，饱和吸附45分钟，用纯净水洗脱杂质，洗脱至无色无味至10个柱体积，流速
7、步骤五、再用浓度为60%的乙醇水溶液洗脱4-8个柱体积，流速v=0.5vb/h，并收集洗脱液，将洗脱液减压真空浓缩，并回收乙醇，得到浓缩浸膏；
8、步骤六、将浓缩浸膏200目硅胶拌匀，常温干燥后，干法上加压硅胶柱层析，用真空抽干硅胶中空气，用丙酮乙酸乙酯洗脱剂，洗脱6-10个柱体积，流速v=1.0vb/h，压强p=0.008kpa，收集洗脱液，减压真空浓缩、干燥，得到类白色粉末；
9、步骤七、将类白色粉末用浓度为10%的乙醇溶解，过滤后，上葡聚糖凝胶树脂sephadexlh-20，饱和吸附30分钟，然后用浓度为75%的乙醇洗脱4-6个柱体积，流速v=0.5vb/h，收集洗脱液，减压真空回收一半乙醇，冷却静置结晶24h后，过滤得到晶体即为毛蕊花糖苷。
10、其中，在步骤一中，对柠檬马鞭草枝叶进行破碎和切段，制得柠檬马鞭草短枝备用时，破碎和切段长度为0.3-0.5cm。
11、其中，在步骤二中，将柠檬马鞭草短枝碎用柠檬酸水浸没，并发酵36-72小时，高速离心并过滤，弃去离心液，得到发酵药渣的过程中：
12、所采用的柠檬酸ph值为3~4，高速离心的转速为3500r/min，时间为15min，过滤目数为800-1000目。
13、其中，在步骤三中，两次提取时，第一次提取料液比例为1:8，提取温度为90℃，索氏回流提取2小时；第二次提取料液比例1:6，提取温度为90℃，提取时间为1小时。
14、其中，在步骤三中，加水稀释至乙醇浓度为10%以下，得到浓缩液备用时，温度t≤70℃，压强≥0.1kpa。
15、其中，在步骤五中，回收乙醇时，温度t≤70℃，压强≥0.1kpa。
16、其中，在步骤六中，干法上加压硅胶柱层析时，目数为100目硅胶，径高比≥10:1，用丙酮乙酸乙酯洗脱剂所采用的丙酮：乙酸乙酯=3:1。
17、本专利技术的一种从柠檬马鞭草发酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制备方法，本专利技术所述的原料为发酵后的柠檬马鞭草发酵底物药渣，不同于其他的原料；本专利技术采用的提取溶剂为弱酸醇提取（ph=4~5），不同于其他的水和乙醇；
18、本专利技术所述的分离方法为三次分离纯化，先上大孔树脂d101，其次上硅胶柱层析树脂，在上葡聚糖凝胶树脂，最后重结晶获得单体化合物；
19、本专利技术提高了初始原料中毛蕊花糖苷的含量，由初始的柠檬马鞭草茎叶1.57-4.11%，提高到了2.83-7.75%，让起始原料中柠檬马鞭草原料中的含量提高了2-5倍；
20、本专利技术使用三步分离纯化，可以得到单体纯度为90.42-99.17%的单体化合物毛蕊花糖苷；
21、本专利技术使最终得率提高了2-3倍，由现有的3-5%提高到了7.28—11.33%。
22、以此方式解决了现有技术中的制备方法存在价格昂贵，含量低，分离纯化工序复杂，回收率低，单体纯度低的问题的技术问题。
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1.一种从柠檬马鞭草发酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制备方法，其特征在于，
2.如权利要求1所述的从柠檬马鞭草发酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制备方法，其特征在于，
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【技术特征摘要】
1.一种从柠檬马鞭草发酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制备方法，其特征在于，
2.如权利要求1所述的从柠檬马鞭草发酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制备方法，其特征在于，
3.如权利要求2所述的从柠檬马鞭草发酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制备方法，其特征在于，
4.如权利要求3所述的从柠檬马鞭草发酵底物中提取美白抗衰...
【专利技术属性】
技术研发人员：钟新星，蔡明花，刘韩珍，吴俊，
申请(专利权)人：星和花杭州生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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