【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及间充质干细胞药物,具体为一种间充质干细胞外泌体组合物制备方法及应用。
技术介绍
1、间充质干细胞是一种具有自我更新能力和多种分化潜能的前体细胞,广泛存在于多种组织和器官中。近年来,借助再生医学技术,间充质干细胞在组织修复和再生方面展现出巨大的潜力。其中,外泌体作为间充质干细胞旁分泌活动的重要方式,也受到了广泛关注。
2、外泌体是细胞分泌的微小囊泡,直径为40-100纳米,包被细胞的双层脂膜结构,包含生物活性的脂质、蛋白、受体、mrna、microrna(mirna)、长链非编码rna以及完整的细胞器,如线粒体等。四跨膜蛋白cd9、cd63、cd81和cd82是外泌体常用的分子标志物。外泌体能够被大多数类型的细胞释放和胞吞,是细胞间相互交流的一种重要方式。
3、目前,外泌体的分离方法主要包括超高速离心法、密度梯度离心法、体积排阻色谱法、过滤法、聚合物沉淀法、免疫分离以及隔离筛选法等。其中,超高速离心法因其分离效果稳定、操作简便而被广泛应用。
4、间充质干细胞外泌体因其包含多种蛋白和rna,
...【技术保护点】
1.一种间充质干细胞外泌体组合物制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞外泌体组合物制备方法,其特征在于:所述S1中脐带间充质干细胞代数越低、分泌能力越好,所述S1中培养过程中需要使用完全培养基培养细胞至覆盖率达到70%-80%。
3.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞外泌体组合物制备方法,其特征在于:所述S1中充质干细胞培养设备为生物反应器和振荡培养箱,生物反应器可实时控制CO2、O2、pH值的培养参数,振荡培养箱用于细胞的振荡培养,有助于细胞的生长和分裂。
4.根据权利要求1所述的一种间充
...【技术特征摘要】
1.一种间充质干细胞外泌体组合物制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞外泌体组合物制备方法,其特征在于:所述s1中脐带间充质干细胞代数越低、分泌能力越好,所述s1中培养过程中需要使用完全培养基培养细胞至覆盖率达到70%-80%。
3.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞外泌体组合物制备方法,其特征在于:所述s1中充质干细胞培养设备为生物反应器和振荡培养箱,生物反应器可实时控制co2、o2、ph值的培养参数,振荡培养箱用于细胞的振荡培养,有助于细胞的生长和分裂。
4.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞外泌体组合物制备方法,其特征在于:所述s1中无血清培养基可以选择商品化的间充质干细胞专用的无血清培养基或者采用dmem/f12基础培养基。
5.根据权利要求1所述的一种间...
【专利技术属性】
技术研发人员:孙越峰,洪涛,孙迪,曾庆超,
申请(专利权)人:浙江颜惜生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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