一种抑制水稻黑条矮缩病毒的dsRNA-S9及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种抑制水稻黑条矮缩病毒致病性的dsRNA及其应用。本发明专利技术公开的dsRNA靶向水稻黑条矮缩病毒编码RBSDV P9蛋白的基因S9，从而抑制水稻黑条矮缩病毒在植物体内的复制及表达水平，进而有效减轻水稻黑条矮缩病的发生。本发明专利技术公开的dsRNA从病毒侵染前实施抑制，大大降低了水稻黑条矮缩病毒的致病力；本发明专利技术的dsRNA用于制备的生物抗病毒剂提升植株抗病效果明显，安全环保且制备工艺简单，适用性更强。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种抑制水稻黑条矮缩病毒(rice black-streaked dwarf virus，rbsdv)的dsrna及其制备方法和应用。

技术介绍

1、水稻黑条矮缩病是由介体灰飞虱以持久性方式传播rbsdv引起的水稻病毒病害。水稻植株受到水稻黑条矮缩病毒侵染后的典型症状是发病水稻明显矮缩，叶片短小僵直、深绿，新抽出的叶片变得扭曲皱缩，发病初期叶片背面的叶脉和茎秆上有蜡泪状白色凸起，后来变成黑褐色的短条瘤状凸起，水稻不抽穗或穗小，最终可导致严重减产。我国自本世纪初由于主推的水稻品种不抗黑条矮缩病，致使该病在浙江、上海、江苏、安徽等地广泛流行，使其上升为水稻的主要病害，一般发病田的产量损失为10％～40％，严重田块发病率达80％-90％，产量损失7-8成，有的甚至颗粒无收，对农业生产构成了严重威胁。rbsdv除侵染水稻外，还能够侵染玉米、小麦、大麦、高粱、粟等禾本科粮食作物，以及稗草、看麦娘和狗尾草等禾本科杂草。

2、rna干扰(rnai)是dsrna(double-stranded rna)识别具有同源互补序列的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种抑制水稻黑条矮缩病毒致病性的dsRNA，其特征在于，所述dsRNA的序列如SEQID NO.3所示。

2.权利要求1所述的dsRNA的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：以RBSDV的cDNA为模板，用核苷酸序列如SEQ ID NO.1～2所示的引物进行PCR扩增，获得核苷酸序列如SEQ IDNO.4所示的dsRNA片段，将dsRNA片段连接到表达载体上，构建重组载体；将含有dsRNA片段的重组表达载体导入到大肠杆菌HT115中培养；通过IPTG诱导dsRNA产生，培养收集菌液。

3.根据权利要求2所述的dsRNA的制备方法，其特征在于，所述表达载体为pe...

【技术特征摘要】

1.一种抑制水稻黑条矮缩病毒致病性的dsrna，其特征在于，所述dsrna的序列如seqid no.3所示。

2.权利要求1所述的dsrna的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：以rbsdv的cdna为模板，用核苷酸序列如seq id no.1～2所示的引物进行pcr扩增，获得核苷酸序列如seq idno.4所示的dsrna片段，将dsrna片段连接到表达载体上，构建重组载体；将含有dsrna片段的重组表达载体导入到大肠杆菌ht115中培养；通过iptg诱导dsrna产生，培养收集菌液。

3.根据权利要求2所述的dsrna的制备方法，其特征在于，所述表达载体为pet28载体。

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【专利技术属性】
技术研发人员：兰莹，周彤，赵弘巍，陈盼，李晨羊，杜琳琳，林峰，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：