使用RNA阻断分子检测靶核酸的方法技术

本公开的实施方案包括用于进行原位杂交反应的组合物和方法。具体地说，本公开提供了RNA阻断分子，其通过减少靶探针与样本中非靶RNA分子的结合来增强对靶RNA分子(例如，mRNA分子、微RNA(miRNA)分子、小非编码RNA(sncRNA)分子、PIWI相互作用RNA(piRNA)分子和/或小干扰RNA(siRNA)分子)的检测。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本公开的实施方案包括用于进行原位杂交反应的组合物和方法。具体地说，本公开提供了rna阻断分子，其通过减少靶探针与样本中非靶rna分子的结合来增强对靶rna分子(例如，mrna分子、微rna(mirna)分子、小非编码rna(sncrna)分子、piwi相互作用rna(pirna)分子和/或小干扰rna(sirna)分子)的检测。

技术介绍

1、原位杂交(ish)是允许精确检测组织学切片内的核酸的特定区段的技术。ish的根本基础是，如果核酸在组织学标本中得到适当保存，则可以通过施加与报告分子附接的互补核酸链来检测。靶核酸可以是脱氧核糖核酸(dna)或核糖核酸(rna)。细胞中存在不同类型的rna，包括信使rna(mrna)，其编码多肽的氨基酸序列；转移rna(trna)，其在翻译过程中将氨基酸带入核糖体；核糖体rna(rrna)，其构成核糖体，即翻译mrna的细胞器；和sncrna，其参与各种rna加工。具体来说，sncrna、mirna、sirna、pirna在研究、诊断和药物开发中具有重要意义；然而，对细胞或组织样本中的rna(尤其是小rna)的检测灵敏本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种RNA阻断分子，其包含至少一个包含非探针靶向区域和探针靶向区域的RNA阻断结构域，其中所述区域是连续的。

2.如权利要求1所述的RNA阻断分子，其中所述RNA阻断结构域的所述非探针靶向区域是与靶RNA分子的非探针靶向区域互补的。

3.如权利要求1所述的RNA阻断分子，其中所述RNA阻断结构域的所述探针靶向区域是与靶RNA分子的探针靶向区域的一部分互补的。

4.如权利要求2或权利要求3所述的RNA阻断分子，其中所述靶RNA分子是mRNA分子、微RNA(miRNA)分子、小非编码RNA(sncRNA)分子、PIWI相互作用RNA(piRNA)分子、...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种rna阻断分子，其包含至少一个包含非探针靶向区域和探针靶向区域的rna阻断结构域，其中所述区域是连续的。

2.如权利要求1所述的rna阻断分子，其中所述rna阻断结构域的所述非探针靶向区域是与靶rna分子的非探针靶向区域互补的。

3.如权利要求1所述的rna阻断分子，其中所述rna阻断结构域的所述探针靶向区域是与靶rna分子的探针靶向区域的一部分互补的。

4.如权利要求2或权利要求3所述的rna阻断分子，其中所述靶rna分子是mrna分子、微rna(mirna)分子、小非编码rna(sncrna)分子、piwi相互作用rna(pirna)分子、小干扰rna(sirna)分子和/或反义寡核苷酸(aso)。

5.如权利要求1至4中任一项所述的rna阻断分子，其中靶mrna的所述非探针靶向区域包含非编码区，并且其中所述靶mrna的所述探针靶向区域包含编码区。

6.如权利要求1至4中任一项所述的rna阻断分子，其中靶mirna的所述非探针靶向区域包含相应的成熟mirna分子中不存在的区域，并且其中所述靶mirna的所述探针靶向区域包含相应的成熟mirna分子中存在的区域。

7.如权利要求1至6中任一项所述的rna阻断分子，其中所述rna阻断结构域的所述非探针靶向区域的长度为从2个至50个核苷酸。

8.如权利要求1至7中任一项所述的rna阻断分子，其中所述rna阻断结构域的所述探针靶向区域的长度为从2个至20个核苷酸。

9.如权利要求1至8中任一项所述的rna阻断分子，其还包含第二rna阻断结构域，所述第二rna阻断结构域包含第二非探针靶向区域和第二探针靶向区域，其中所述第二区域是连续的。

10.如权利要求1至9中任一项所述的rna阻断分子，其中所述第一rna阻断结构域和所述第二rna阻断结构域是通过接头区域连接的。

11.如权利要求1至10中任一项所述的rna阻断分子，其中所述第一rna阻断结构域和所述第二rna阻断结构域包含相同数量的核苷酸。

12.如权利要求1至11中任一项所述的rna阻断分子，其中所述第一rna阻断结构域和所述第二rna阻断结构域的所述非探针靶向区域包含相同数量的核苷酸。

13.如权利要求1至12中任一项所述的rna阻断分子，其中所述第一rna阻断结构域和所述第二rna阻断结构域的所述探针靶向区域包含相同数量的核苷酸。

14.如权利要求10至13中任一项所述的rna阻断分子，其中所述接头区域的长度为从1个至10个核苷酸。

15.如权利要求10至14中任一项所述的rna阻断分子，其中所述接头区域的长度为从2个至8个核苷酸。

16.如权利要求10至15中任一项所述的rna阻断分子，其中所述接头区域的长度为从2个至5个核苷酸。

17.如权利要求10至16中任一项所述的rna阻断分子，其中所述接头区域包含至少两种类型的核苷酸。

18.如权利要求10至17中任一项所述的rna阻断分子，其中所述接头区域包含一种类型的核苷酸。

19.如权利要求18所述的rna阻断分子，其中所述接头区域由胸腺嘧啶核苷酸组成。

20.如权利要求21所述的rna阻断分子，其中所述接头区域由1至10个胸腺嘧啶核苷酸组成。

21.如权利要求10至20中任一项所述的rna阻断分子，其中所述接头区域包含至少一个与靶rna分子的探针靶向区域的一部分不互补的核苷酸。

22.如权利要求10至21中任一项所述的rna阻断分子，其中所述接头区域包含从1个至10个与靶rna分子的探针靶向区域的一部分不互补的核苷酸。

23.如权利要求10至21中任一项所述的rna阻断分子，其中包含所述接头区域的所述核苷酸的从约20％至约...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·A·德什潘德，H·卢，A·萨哈扬，M·桑比，W·魏，XJ·马，B·张，
申请(专利权)人：领先细胞医疗诊断有限公司，
类型：发明
国别省市：