糖胺聚糖合成酶突变体及其制备方法和应用技术

本申请涉及糖胺聚糖合成酶突变体及其制备方法和应用，糖胺聚糖合成酶突变体与SEQ ID NO：1所示的糖胺聚糖合成酶相比，具有发生在第108位点的氨基酸突变。与野生型糖胺聚糖合成酶相比，利用该突变菌株进行HA合成时，HA的产量显著提高。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及蛋白质工程和基因工程领域，具体涉及糖胺聚糖合成酶突变体及其制备方法及应用。

技术介绍

1、糖胺聚糖是一类酸性粘多糖，在人体内发挥着重要的生理作用。以透明质酸为例，它（hyaluronic acid，ha）是由d-葡萄糖醛酸和n-乙酰氨基葡糖胺两种单糖单位交替构成的酸性粘多糖，具有生物相容性强和保湿效果显著等特性，已被广泛应用于医药和化妆品行业。早期ha的生产方法以动物组织提取为主，但这一方法的存在组织原材料来源有限、收率很低、纯化成本高及残留过敏原的安全问题。随着合成生物技术、基因工程改造技术和发酵技术的不断发展，透明质酸的合成已经可以实现无动物源的全生物法合成。微生物发酵法制备的ha已成为生产ha的主要方法。而利用微生物细胞合成ha目前主要集中在兽疫链球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、谷氨酸棒杆菌和乳酸乳球菌，而不同菌株发酵生产的ha，其产量和分子量差异较大。为了进一步提升ha的产量，研究者尝试了在细胞层面上进行调控，包括关键代谢途径强化、优化前体浓度、发酵过程调控以及额外添加降解酶等(马艳琴等，生物技术通报, 2022, 38(2): 252-2本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.糖胺聚糖合成酶突变体，其特征在于，所述糖胺聚糖合成酶突变体与SEQ ID NO：1所示的糖胺聚糖合成酶相比，具有发生在第108位点中的氨基酸突变。

2.根据权利要求1所述的糖胺聚糖合成酶突变体，其特征在于，第108位的氨基酸突变为谷氨酸或精氨酸。

3.根据权利要求1或2所述的糖胺聚糖合成酶突变体，其特征在于，所述糖胺聚糖合成酶突变体与SEQ ID NO：1所示的糖胺聚糖合成酶相比，还具有发生在如下位点中的一个或多个的氨基酸突变：第113位、第147位、第199位和第287位；

4.根据权利要求1或2所述的糖胺聚糖合成酶突变体，其特征在于，所述糖胺聚...

【技术特征摘要】

1.糖胺聚糖合成酶突变体，其特征在于，所述糖胺聚糖合成酶突变体与seq id no：1所示的糖胺聚糖合成酶相比，具有发生在第108位点中的氨基酸突变。

2.根据权利要求1所述的糖胺聚糖合成酶突变体，其特征在于，第108位的氨基酸突变为谷氨酸或精氨酸。

3.根据权利要求1或2所述的糖胺聚糖合成酶突变体，其特征在于，所述糖胺聚糖合成酶突变体与seq id no：1所示的糖胺聚糖合成酶相比，还具有发生在如下位点中的一个或多个的氨基酸突变：第113位、第147位、第199位和第287位；

4.根据权利要求1或2所述的糖胺聚糖合成酶突变体，其特征在于，所述糖胺聚糖合成酶突变体具有如下任意一组氨基酸突变：k108r；k108e；k108r和m113e；k108e和m113e；k108r和s147r；k108e和s147r；k108r和i199e；k108e和i199e；k108r和n287e；k108e和n287e；k108e和m113r；k108e和s147e；k108e和i199r；k108e和n287r；k108r、m113r和s147r；k108r、i199r和n287e；k108r、s147r和i199r；k108r、n287r和m113e；k108r、m113e和s147r；k108e、i199e和n287r；k108e、s147e和i199e；k108r、n287e和m113e；k108r和m113r；k108r和s147e；k108r和i199r；k108r和n287r；k108e、m113r和s147e；k108e、s147e和i199r；k108e、i199r和n287r；k108e、n287r和i199e；k108r、m113r和s14...

【专利技术属性】
技术研发人员：于慧敏，李付龙，杜岩，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：