【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开总体上涉及从细胞获得细胞器复合体的方法、通过此类方法获得的细胞器复合体以及通过此类方法获得的细胞器复合体的用途。相关技术的描述线粒体是负责许多代谢转化和调节功能的细胞内细胞器。它们产生真核细胞使用的大部分atp。对于线粒体功能,折叠的内膜和周围的外膜以及位于内膜的电子传递体系起着至关重要的作用。内膜形成高度折叠的结构(称为嵴),它被认为将电子传递体系的超复合体保持在嵴膜中,并且通过将泵送的质子捕获在嵴空间中来保持高质子浓度。由电子传递体系形成的电化学质子梯度能够实现阴离子的传输以及atp合成和阳离子传输。线粒体也是高度动态的细胞器,其在整个细胞中移动并且经历结构转变,改变长度、形态、形状和尺寸。此外,线粒体在称为线粒体生物发生的过程中不断消除和再生。虽然大多数线粒体基因已转移到核基因组,但是线粒体基因组仍然编码rrna、trna和电子传递链(etc)的13个亚基。因此,核基因组与线粒体基因组之间的功能性通讯对于线粒体生物发生、有效的氧化磷酸化和正常健康是至关重要的。线粒体也是引起氧化应激的自由基和活性氧类(ros)的主要来源。此外,线粒体在细胞内信号传导 ...
【技术保护点】
1.一种细胞器复合体群体,
2.一种细胞器复合体群体,
3.根据权利要求1至2中任一项所述的细胞器复合体群体,其中结构完整性包括线粒体的内膜结构完整性和/或外膜结构完整性。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的细胞器复合体群体,其中所述细胞器复合体的与所述细胞外环境中的均质化线粒体群体相比至少2倍的所述线粒体在所述细胞外环境中保持结构完整性。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的细胞器复合体群体,其中结构完整性是通过柠檬酸合酶(CS)活性和/或细胞色素c氧化酶(COX)活性来测量的。
6.根据权利要求1至5中
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种细胞器复合体群体,
2.一种细胞器复合体群体,
3.根据权利要求1至2中任一项所述的细胞器复合体群体,其中结构完整性包括线粒体的内膜结构完整性和/或外膜结构完整性。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的细胞器复合体群体,其中所述细胞器复合体的与所述细胞外环境中的均质化线粒体群体相比至少2倍的所述线粒体在所述细胞外环境中保持结构完整性。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的细胞器复合体群体,其中结构完整性是通过柠檬酸合酶(cs)活性和/或细胞色素c氧化酶(cox)活性来测量的。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的细胞器复合体群体,其中所述细胞外环境包含约1至约20mg/dl的总钙浓度和/或约1至约6mg/dl的游离/活性钙浓度。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的细胞器复合体群体,其中所述细胞器复合体的至少约80%的所述线粒体保持功能性能力。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的细胞器复合体群体,其中所述细胞器复合体的所述线粒体能够实现atp产生。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的细胞器复合体群体,其中所述细胞器复合体群体包含与均质化线粒体群体相比至少2倍至6倍的线粒体dna(mtdna)拷贝数。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的细胞器复合体群体,其中所述胞质大分子包含胞质蛋白,其中与自其衍生所述细胞器复合体群体的所述细胞相比,一种或多种胞质蛋白的丰度被耗竭至少约90%,任选地,所述胞质蛋白为p70s6k和/或甘油醛3-磷酸脱氢酶(gapdh)。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的细胞器复合体群体,其中所述细胞器复合体包含:
12.根据权利要求1至11中任一项所述的细胞器复合体群体,其中所述细胞器复合体群体包括第一细胞器复合体,或第一细胞器复合体与第二细胞器复合体的组合,
13.根据权利要求1至12中任一项所述的细胞器复合体群体,其中:
14.根据权利要求1至13中任一项所述的细胞器复合体群体,其中在所述细胞器复合体与细胞群体接触时,所述细胞器复合体能够掺入所述细胞中,任选地,与均质化线粒体群体相比,至少约2倍的细胞器复合体能够掺入所述细胞中。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的细胞器复合体群体,其中在所述细胞器复合体与宿主细胞群体接触时,与均质化线粒体群体相比,所述细胞器复合体具有优异的掺入宿主细胞的能力。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的细胞器复合体群体,其中在第一细胞器复合体与宿主细胞群体接触时,与第二细胞器复合体相比,所述第一细胞器复合体具有优异的掺入宿主细胞的能力。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的细胞器复合体群体,其中在所述细胞器复合体与宿主细胞群体接触时,所述细胞器复合体具有优异的掺入宿主细胞的能力,任选地,与均质化线粒体群体相比,至少2倍的细胞器复合体能够掺入宿主细胞中。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的细胞器复合体群体,其中在所述群体经历一个或多个冻融循环后所述细胞器复合体的所述线粒体能够掺入细胞中,任选地与均质化线粒体群体相比,所述细胞器复合体的至少2倍的线粒体能够在所述群体经历一个或多个冻融循环后掺入细胞中。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的细胞器复合体群体,其中所述群体中的至少约80%的所述细胞器复合体的尺寸在约500nm与约3500nm之间,任选地尺寸在约200nm至约1000nm之间。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的细胞器复合体群体,其中所述细胞器复合体群体衍生自用线粒体活化剂、任选地白藜芦醇进行处理的细胞。
21.一种组合物,其包含根据权利要求1至20中任一项所述的细胞器复合体群体。
22.一种制剂,其包含根据权利要求21所述的组合物和药学上可接受的载体。
23.一种用于产生第一细胞器复合体群体的方法,所述方法包括:
24.根据权利要求23所述的方法,其中所述方法包括在第二温度孵育所述第二溶液。
25.根据权利要求23至24中任一项所述的方法,其中所述第一细胞器复合体包含线粒体以及内质网、过氧化物酶体、溶酶体和高尔基体中的两者、三者或四者。
26.根据权利要求23至25中任一项所述的方法,其中使所述第一溶液中的所述细胞与所述表面活性剂以比所述表面活性剂的临界胶束浓度(cmc)高至少约5%的浓度接触。
27.根据权利要求23至26中任一项所述的方法,其中所述表面活性剂为皂苷,任选地所述表面活性剂以约50ug/ml的浓度存在。
28.根据权利要求23至27中任一项所述的方法,其中所述表面活性剂为非离子表面活性剂。
29.根据权利要求23至28中任一项所述的方法,其中所述表面活性剂选自由以下项组成的组:triton-x 100、triton-x 114、nonidet p-40、正十二烷基-d-麦芽糖苷、tween-20、tween-80、皂苷和洋地黄皂苷。
30.根据权利要求23至29中任一项所述的方法,其中所述第一溶液进一步包含缓冲液,其任选地包含张力剂、渗透调节剂和螯合剂中的一者或多者。
31.根据权利要求23至30中任一项所述的方法,其中所述第一溶液包含tris缓冲液、蔗糖和/或螯合剂。
32.根据权利要求23至31中任一项所述的方法,其中在所述第一溶液中孵育细胞包括将所述细胞在所述第一溶液中孵育约1分钟至约120分钟,任选地约30分钟。
33.根据权利要求23至32中任一项所述的方法,其中所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:柴田贵弘,太田尚,榊原圭一,Y·埃尔达拉维什,张家荣,佐藤祐哉,井上智元,泷川悌二,
申请(专利权)人:卢卡科学株式会社,
类型:发明
国别省市:
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