一种漆酶突变体及其在氧化转化大豆苷元制备聚黄酮中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种漆酶突变体及其在氧化转化大豆苷元制备聚黄酮中的应用。本发明专利技术以灰盖鬼伞（Coprinopsis cinerea）的漆酶Lcc5为出发酶，通过分子对接，分析位置结构，设计突变。合成突变基因，构建突变基因的重组表达工程菌。含有突变基因的工程菌诱导表达后，经分离纯化获得Lcc5突变体Lcc5‑T485E，该突变体的比酶活及乙醇耐受性有所提升，在使用同等酶活下对大豆苷元的转化率约提高至1.26倍；所获得的转化产物的抗氧化活性、抑酶活性及抑菌活性也显著提升。该突变酶在氧化转化大豆苷元提高其生物价值中具有潜在应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种漆酶突变体及其在氧化转化大豆苷元制备聚黄酮中的应用。

技术介绍

1、漆酶（laccase），作为一种含铜多酚氧化酶，又被称为酚酶，是蓝色多铜氧化酶家族（mco）中的成员之一。漆酶能够借助铜离子的强氧化还原能力，有效氧化酚类及芳香类化合物，同时将分子氧还原为水。漆酶能够催化的底物非常宽泛，并且能够直接作用于多种酚类有毒物质及一些芳香类有害物质进行氧化降解。此外，漆酶还可以通过抽取底物中的电子产生自由基进而使小分子物质发生偶联。因此，漆酶在工业生产中，例如在食品加工、污水处理、生物传感器和生物转化等方面均有较多应用。

2、大豆苷元（daidzein），主要源自豆科植物，其结构骨架由两个苯环（a和b环）通过一个杂环吡喃环（c环）连接形成母核。作为天然多酚化合物，大豆苷元具有包括抗氧化活性、抗菌活性、抗ab聚集活性等多种生物活性。目前药物的开发大多基于天然小分子化合物，因此通过对现有小分子化合物进行加工修饰及生物转化以提升其活性具有较高的意义。

3、一般来说，寡聚体的活性相较于其单体会有一定程度的提高。目前为本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种漆酶突变体，简记为Lcc5-T485E，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.权利要求1所述漆酶突变体的编码基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

3.一种突变质粒，含有如权利要求2所述的编码基因。

4.权利要求1所述漆酶突变体的表达菌株，含有权利要求3所述的突变质粒。

5.权利要求1所述漆酶突变体的表达菌株，其特征在于：

6.权利要求1所述漆酶突变体在大豆苷元氧化转化制备寡聚体化合物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：

8.根据权利要求6或7制备获得的寡聚体...

【技术特征摘要】

1.一种漆酶突变体，简记为lcc5-t485e，其氨基酸序列如seq id no:1所示。

2.权利要求1所述漆酶突变体的编码基因，其核苷酸序列如seq id no:2所示。

3.一种突变质粒，含有如权利要求2所述的编码基因。

4.权利要求1所述漆酶突变体的表达菌株，含有权利要求3所述的突变质粒。

5.权利要求1所述漆酶突变体的表达菌株，其特征在于：<...

【专利技术属性】
技术研发人员：张学成，李曙光，曾旭诺，房伟，肖亚中，
申请(专利权)人：安徽大学，
类型：发明
国别省市：