一种氨肽酶突变体及其制备方法和其用于制备L-肌肽的用途技术

本发明专利技术涉及酶工程技术领域，特别是涉及一种氨肽酶突变体及其制备方法和其用于制备L‑肌肽的用途。所述氨肽酶突变体由野生型氨肽酶突变所得，能够以β‑丙氨酸甲酯和L‑组氨酸逆水解制备L‑肌肽。使用本发明专利技术氨肽酶突变体生产L‑肌肽具有以下优点：1.转化率≥95%，转化时间短，可以使用相对廉价的丙氨酸甲酯作为原料催化制备L‑肌肽；2.生产工艺简单，反应条件温和，符合绿色化学理念。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及酶工程，特别是涉及一种氨肽酶突变体及其制备方法和其用于制备l-肌肽的用途。

技术介绍

1、l-肌肽又名β-丙氨酰-l-组氨酸，是由β-丙氨酸和l-组氨酸两种氨基酸缩合得到的二肽，是一种白色的结晶状固体，是生物体内存在的一种天然抗氧化剂。左旋肌肽作为一种天然二肽，在动物的肌肉、脑组织、眼部晶状体组织中大量存在，浓度可高达20 mm。在生物体内，肌肽具有ph缓冲，抗氧化、抗自由基以及抗衰老等作用。在临床上，应用于减轻视觉疲劳、治疗白内障；含锌肌肽可用于治疗胃溃疡。此外肌肽及其衍生产品在食品添加剂、化妆品、保健品等领域也具有广阔的应用前景。

2、l-肌肽的生产有多种方法。由于肌肽在动物肌肉中含量较高，早期直接从动物组织中进行肌肽的提取，这种方式产量低，纯度差，早已被淘汰。目前通常采用的方法是化学合成法，使用邻苯二甲酸酐对丙氨酸进行氨基保护，使用二氯亚砜进行羧基活化，然后与三甲基硅烷保护的l-组氨酸反应，得到基团保护的肌肽衍生物，随后脱保护获得游离的l-肌肽。这种方法收率较高，但是反应步骤较多，反应条件比较苛刻，反应过程中需要计量消耗和生本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种氨肽酶突变体，其特征在于，所述氨肽酶突变体为在氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的野生型氨肽酶上进行突变后得到的蛋白质，所述氨肽酶突变体包括W90H和N105Y突变。

2.根据权利要求1所述的氨肽酶突变体，其特征在于，所述氨肽酶突变体包括以下任一种突变：W90H/N105Y/I325Q、W90H/N105Y/D132N/I325Q或W90H/N105Y/D132N/E278D/I325Q。

3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码权利要求1~2任一所述的氨肽酶突变体。

4.根据权利要求3所述的分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核...

【技术特征摘要】

1.一种氨肽酶突变体，其特征在于，所述氨肽酶突变体为在氨基酸序列如seq id no.2所示的野生型氨肽酶上进行突变后得到的蛋白质，所述氨肽酶突变体包括w90h和n105y突变。

2.根据权利要求1所述的氨肽酶突变体，其特征在于，所述氨肽酶突变体包括以下任一种突变：w90h/n105y/i325q、w90h/n105y/d132n/i325q或w90h/n105y/d132n/e278d/i325q。

3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码权利要求1~2任一所述的氨肽酶突变体。

4.根据权利要求3所述的分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸包括如seq idno.13所示的核苷酸序列。

5.一种核酸构建体，其特征在于，所述核酸构建体包括权利要求3或4所述的分离的多核苷酸。

6.根据权利要求5所述的核酸构建体，其特征在于，所述核酸构建体为真核表达载体或原核表达载体。

7.根据权利要求6所述的核酸构建体，其特征在于，所述原核...

【专利技术属性】
技术研发人员：李佳成，卞雨花，杨建花，彭玲玲，吴锋，喻红忠，
申请(专利权)人：上海昱菘生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：