一种DNA与RNA共提取反应试剂、试剂盒和提取方法技术

本发明专利技术涉及核酸提取纯化技术领域，具体涉及DNA与RNA共提取反应试剂和提取方法，反应试剂包括核酸保护剂RP、样本裂解结合液LB、蛋白洗涤液WB1、核酸漂洗液WB2、核酸洗脱液EB；核酸保护剂RP包括DTT、巯基乙醇、TCEP、氢氧化钠；样本裂解结合液LB包括Tris‑HCl、苯磺酸、柠檬酸钠、盐酸胍、异硫氰酸胍、硫氰酸胍、尿素、曲拉通100、SDS、氯化钾、氯化钠、溴己新、N‑乙酰半胱氨酸、盐酸氨溴索、异丙醇、无水乙醇；蛋白洗涤液WB1包括Tris‑HCl、苯磺酸、柠檬酸钠、盐酸胍、异硫氰酸胍、硫氰酸胍、尿素、曲拉通100、氯化钠、异丙醇、无水乙醇；核酸漂洗液WB2包括Tris‑HCl、氯化钠、异丙醇、无水乙醇；核酸洗脱液EB为无核酸酶水，该应试剂能快速地且充分地同时富集与纯化样本的DNA和RNA。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及核酸提取纯化，具体涉及一种dna与rna共提取反应试剂、试剂盒和提取方法。

技术介绍

1、病原微生物检测中，核酸提取是一个关键步骤，它直接影响到后续检测的准确性和灵敏度。核酸提取试剂盒的选择和使用对实验结果至关重要。病原微生物检测涉及的检测技术主要有荧光定量pcr、等温扩增lamp、高通量宏基因组测序mngs以及高通量靶向测序等，这些分子检测技术都依赖于有质量较好的样本核酸。因此在病原微生物检测中，高效率且无偏差地将样本核酸富集纯化尤其重要。

2、病原微生物检测涉及的样本类型多样，包含了血液、血浆、痰液、口腔拭子、粪便、组织、肺泡灌洗液、脑脊液、关节液、胸腹水等；而病原微生物类型广泛，包括真菌、dna病毒、rna病毒、寄生虫、革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、支原体/衣原体等。尤其是未知病原检测如mngs，要求无论何种类型的样本，均需要将所有的微生物核酸无偏差地富集纯化，保证检测的准确性和灵敏度。

3、市面上有众多核酸提取试剂盒，虽然目前部分核酸提取试剂盒能同时将样本中的dna核酸和rna核酸富集纯化并提取，但仍存在不足之处本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种DNA与RNA共提取反应试剂，其特征在于：包括核酸保护剂RP、样本裂解结合液LB、蛋白洗涤液WB1、核酸漂洗液WB2、核酸洗脱液EB；

2.根据权利要求1所述的DNA与RNA共提取反应试剂，其特征在于：所述核酸保护剂RP中，DTT浓度为0.1mM～20mM、巯基乙醇浓度为0.1％～10％、TCEP浓度为0.1mM～30mM、氢氧化钠浓度为10mM～200mM，溶液pH浓度为4.5～8.0。

3.根据权利要求1所述的DNA与RNA共提取反应试剂，其特征在于：所述样本裂解结合液LB中，Tris-HCl浓度为10mM～500mM、苯磺酸浓度为5mM～100mM、...

【技术特征摘要】

1.一种dna与rna共提取反应试剂，其特征在于：包括核酸保护剂rp、样本裂解结合液lb、蛋白洗涤液wb1、核酸漂洗液wb2、核酸洗脱液eb；

2.根据权利要求1所述的dna与rna共提取反应试剂，其特征在于：所述核酸保护剂rp中，dtt浓度为0.1mm～20mm、巯基乙醇浓度为0.1％～10％、tcep浓度为0.1mm～30mm、氢氧化钠浓度为10mm～200mm，溶液ph浓度为4.5～8.0。

3.根据权利要求1所述的dna与rna共提取反应试剂，其特征在于：所述样本裂解结合液lb中，tris-hcl浓度为10mm～500mm、苯磺酸浓度为5mm～100mm、柠檬酸钠浓度为10mm～100mm、盐酸胍浓度为0.5m～5.5m、异硫氰酸胍浓度为0.5m～5.5m、硫氰酸胍浓度为0.5～4m、尿素浓度为10mm～1000mm、曲拉通100浓度为1％～20％、sds浓度为0.5％～2％、氯化钾浓度为10mm～200mm、氯化钠浓度为50mm～500mm、溴己新浓度为5mm～50mm、n-乙酰半胱氨酸浓度为5mm～50mm、盐酸氨溴索浓度为5mm～50mm、异丙醇浓度为10％～40％、无水乙醇浓度为10％～40％，溶液ph为5.0～8.0。

4.根据权利要求1所述的dna与rna共提取反应试剂，其特征在于：所述蛋白洗涤液wb1中，tris-hcl浓度为10mm～50...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨小冰，
申请(专利权)人：广州升瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：