一种诱导中性粒细胞产生NETs的方法技术

技术编号:43898330 阅读:92 留言:0更新日期:2025-01-03 13:11
本发明专利技术提供了一种诱导中性粒细胞产生NETs的方法,涉及免疫学、分子生物学等技术领域。所述增加中性粒细胞产生NETs的方法包括:1)中性粒细胞的分离纯化;2)中性粒细胞的诱导方式;3)NETs的鉴别与定量。本发明专利技术得到了高纯度的中性粒细胞,而且成功增加了NETs的含量,对中性粒细胞的生物学研究及其临床应用等方面都具有重要的临床意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫学、细胞生物学、分子生物学等多项领域。具体包括中性粒细胞的分离纯化、利用细胞因子il-1β、ifn-γ和gm-csf联合诱导中性粒细胞产生中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,nets)。


技术介绍

1、中性粒细胞是人体免疫系统中最丰富的先天免疫效应细胞,它们通常是第一个被招募到炎症部位的白细胞,能够通过多种机制消除病原体,促进损伤修复。传统上将中性粒细胞认为是炎性应答和急性免疫的效应细胞,其通过胞内吞噬作用发挥功能,并且使用裂解蛋白酶、活性氧(reactive oxygen radicals,ros)等杀灭病原微生物。近年研究还表明,除了吞噬作用之外,中性粒细胞还能通过释放nets的方式黏附并清除病原微生物,并能有效限制病原体向其他组织部位播散。nets是一种细胞外结构,是由去浓缩的染色质和中性粒细胞来源的核蛋白、胞浆蛋白和颗粒蛋白组成的网状结构,这些蛋白镶嵌在dna骨架上大大增加了其局部浓度。

2、目前nets的诱导物则种类较多,除微生物之外,脂多糖(lipopolysacch本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种诱导中性粒细胞产生NETs的方法,包括步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,中性粒细胞的分离纯化具体步骤:在室温条件下,使用Ficoll密度梯度离心法对人外周血样本进行离心、裂解红细胞等操作,得到纯化的CD45+CD66b+CD16+中性粒细胞,纯度达95%以上。

3.根据权利要求1所述的方法,NETs的诱导方式具体步骤:联合使用10ng/mL IFN-γ+1ng/mL GM-CSF+30ng/mL IL-1β处理中性粒细胞12h,诱导中性粒细胞产生NETs。

4.根据权利要求1所述的方法,NETs定量分析与鉴定的具体方法:通过免疫荧光法检测N...

【技术特征摘要】

1.一种诱导中性粒细胞产生nets的方法,包括步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,中性粒细胞的分离纯化具体步骤:在室温条件下,使用ficoll密度梯度离心法对人外周血样本进行离心、裂解红细胞等操作,得到纯化的cd45+cd66b+cd16+中性粒细胞,纯度达95%以上。

3.根据权利要求1所述的方法,nets的诱导方式具体步骤:联合使用10n...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘思益王婷婷于超
申请(专利权)人:重庆医科大学
类型:发明
国别省市:

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