【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及免疫学、细胞生物学、分子生物学等多项领域。具体包括中性粒细胞的分离纯化、利用细胞因子il-1β、ifn-γ和gm-csf联合诱导中性粒细胞产生中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,nets)。
技术介绍
1、中性粒细胞是人体免疫系统中最丰富的先天免疫效应细胞,它们通常是第一个被招募到炎症部位的白细胞,能够通过多种机制消除病原体,促进损伤修复。传统上将中性粒细胞认为是炎性应答和急性免疫的效应细胞,其通过胞内吞噬作用发挥功能,并且使用裂解蛋白酶、活性氧(reactive oxygen radicals,ros)等杀灭病原微生物。近年研究还表明,除了吞噬作用之外,中性粒细胞还能通过释放nets的方式黏附并清除病原微生物,并能有效限制病原体向其他组织部位播散。nets是一种细胞外结构,是由去浓缩的染色质和中性粒细胞来源的核蛋白、胞浆蛋白和颗粒蛋白组成的网状结构,这些蛋白镶嵌在dna骨架上大大增加了其局部浓度。
2、目前nets的诱导物则种类较多,除微生物之外,脂多糖(lip
...【技术保护点】
1.一种诱导中性粒细胞产生NETs的方法,包括步骤:
2.根据权利要求1所述的方法,中性粒细胞的分离纯化具体步骤:在室温条件下,使用Ficoll密度梯度离心法对人外周血样本进行离心、裂解红细胞等操作,得到纯化的CD45+CD66b+CD16+中性粒细胞,纯度达95%以上。
3.根据权利要求1所述的方法,NETs的诱导方式具体步骤:联合使用10ng/mL IFN-γ+1ng/mL GM-CSF+30ng/mL IL-1β处理中性粒细胞12h,诱导中性粒细胞产生NETs。
4.根据权利要求1所述的方法,NETs定量分析与鉴定的具体方法:
...【技术特征摘要】
1.一种诱导中性粒细胞产生nets的方法,包括步骤:
2.根据权利要求1所述的方法,中性粒细胞的分离纯化具体步骤:在室温条件下,使用ficoll密度梯度离心法对人外周血样本进行离心、裂解红细胞等操作,得到纯化的cd45+cd66b+cd16+中性粒细胞,纯度达95%以上。
3.根据权利要求1所述的方法,nets的诱导方式具体步骤:联合使用10n...
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