一种快速鉴别新生裸鼠的引物对、方法及应用技术

本发明专利技术公开一种快速鉴别新生裸鼠的引物对、方法及应用，基于裸鼠Foxn1基因的编码区的第337位的碱基G发生缺失突变，根据序列特征设计引入酶切位点的引物对，以待测小鼠的基因组为模板，按照PCR‑RFLP法扩增Foxn1基因，然后将PCR产物用SmaI限制性内切酶进行酶切，酶切产物通过琼脂糖凝胶电泳分型。同时筛选出了一套能够与侧向流技术结合的反应体系，从而实现新生裸鼠的即时检测。本发明专利技术公开的方法具有操作简单，用时短，成本低及即时检测等特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及到分子遗传学领域，具体涉及到一种快速鉴别新生裸鼠的引物对、方法及应用。

技术介绍

1、裸鼠是上个世纪60年代偶然发现的，在1966年由科学家flanagan首次提出裸小鼠的概念。1968年，生物学家pantelouris在解剖裸鼠的过程中发现裸鼠的胸腺发育不全。胸腺是t淋巴细胞发育和成熟的关键场所，这样造成了一定的免疫缺陷，其淋巴细胞的数量大大降低，对胸腺依赖的抗原免疫反应非常差，包括不能排斥异体的肿瘤移植物和对感染敏感等。由于裸鼠具有独特的免疫缺陷性，其已经成为生物学和生物医药领域不可缺少的实验动物模型，例如，免疫学、肿瘤学和药品的药效及安全性评价等方面。

2、裸鼠是生物制品质量控制常用的动物模型之一，特别是在生物制品的毒性、成瘤性和致瘤性等方面，新生裸鼠以其独特的优势在生物制品的生物安全性方面是不可或缺的，例如生物制品致瘤性安全评估，动物体内成瘤法是生物制品生产用细胞基质致瘤性检查的标准方法。该方法是按照规定选择动物的种类，以一定量的细胞基质裂解物或者细胞基质dna接种实验动物，培养一段时间后，通过剖检和病理学检查是否有肿瘤细本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种快速鉴别新生裸鼠的引物对，其特征在于，包括2条引物：正向引物和反向引物，所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述反向引物的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示；正向引物的核苷酸序列中，3’端第二个碱基c为引入错配碱基。

2.权利要求1所述的引物对在快速鉴别新生裸鼠中的应用。

3.权利要求1所述的引物对在制备快速鉴别新生裸鼠的试剂盒中的应用。

4.利用权利要求1所述引物对快速鉴别新生裸鼠的方法，其特征在于，包括琼脂糖凝胶电泳法和/或侧向流法。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，侧向流法中，所述2条引物的5’端...

【技术特征摘要】

1.一种快速鉴别新生裸鼠的引物对，其特征在于，包括2条引物：正向引物和反向引物，所述正向引物的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述反向引物的核苷酸序列如seq idno.2所示；正向引物的核苷酸序列中，3’端第二个碱基c为引入错配碱基。

2.权利要求1所述的引物对在快速鉴别新生裸鼠中的应用。

3.权利要求1所述的引物对在制备快速鉴别新生裸鼠的试剂盒中的应用。

4.利用权利要求1所述引物对快速鉴别新生裸鼠的方法，其特征在于，包括琼脂糖凝胶电泳法和/或侧向流法。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，侧向流法中，所述2条引物的5’端有标记，1条引物的5’端的标记为biotin，另1条引物的5’端的标记选自fitc或6-fam中的任意一种。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：以新生小鼠基因组dna为模板，利用所述2条引物进行pcr扩增，得到pcr产物，然后利用限制性内切酶smai对pcr产物进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：臧照星，刘愈杰，赵青，刘丽，幸晓莹，徐国东，
申请(专利权)人：武汉珈创生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：