一种具有竞争活性的抗牛白血病病毒gp51蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种具有竞争活性的抗牛白血病病毒gp51蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用，包括，所述抗牛白血病病毒gp51真核重组蛋白的核酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，本发明专利技术采用杆状病毒表达系统制备了真核重组gp51蛋白，该系统表达的重组gp51蛋白能够正确折叠和翻译后修饰，并具有生物活性。利用真核重组gp51蛋白作为免疫原免疫小鼠，采用细胞融合技术制备抗gp51蛋白的单克隆抗体。制备的单抗能够用于建立检测gp51抗体的阻断ELISA，为BLV的诊断提供一种简单、可靠的验证方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于牛生物制品和诊断试剂领域，具体涉及到一种具有竞争活性的抗牛白血病病毒gp51蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用。

技术介绍

1、牛白血病病毒(bovine leukemia virus，blv)作为牛地方流行性白血病(enzootic bovine leukosis，ebl)的病原，感染后可以导致b细胞淋巴肉瘤，在世界绝大部分地区均有不同程度的流行。ebl的潜伏期较长，一般为3-8年，因而blv的感染容易被低估和忽视。大量数据显示，感染blv在一定程度上会引起免疫失调，导致其他传染病的发病率升高，以及产奶量和生殖效率降低，带来较大的经济损失。感染blv后出现的临床症状包括产奶量减少、浅表淋巴结肿大、消化障碍、食欲减退、跛行、瘫痪等，同时引起的恶心淋巴瘤，能入侵子宫、脾脏、肺、肾等多种器官，从而导致泌尿、呼吸和消化系统疾病。针对blv感染引起的经济损失不只是产奶量减少导致的，还因为一些国家和地区对感染blv的动物实行了严格的进出口管控，这会间接产生经济损失。对于blv的感染，目前尚无有效的治疗药物或预防疫苗，主要防控措施是扑杀或隔离感染牛，所以对本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种牛白血病病毒gp51真核重组蛋白，其特征在于：所述牛白血病病毒gp51真核重组蛋白的核酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.一种抗牛白血病病毒gp51真核重组蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述抗牛白血病病毒gp51真核重组蛋白的单克隆抗体通过牛白血病病毒gp51真核重组蛋白作为抗原免疫获得。

3.一种重组质粒，其特征在于：所述重组质粒转染细胞后，表达包含权利要求1所述的牛白血病病毒gp51真核重组蛋白，其核酸序列如SEQ ID NO.3所示。

4.一种受体细胞，其特征在于：所述受体细胞为权利要求3所述...

【技术特征摘要】

1.一种牛白血病病毒gp51真核重组蛋白，其特征在于：所述牛白血病病毒gp51真核重组蛋白的核酸序列如seq id no.1所示，氨基酸序列如seq id no.2所示。

2.一种抗牛白血病病毒gp51真核重组蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述抗牛白血病病毒gp51真核重组蛋白的单克隆抗体通过牛白血病病毒gp51真核重组蛋白作为抗原免疫获得。

3.一种重组质粒，其特征在于：所述重组质粒转染细胞后，表达包含权利要求1所述的牛白血病病毒gp51真核重组蛋白，其核酸序列如seq id no.3所示。

4.一种受体细胞，其特征在于：所述受体细胞为权利要求3所述的重组质粒的转染细胞。

5.如权利要求2所述的抗牛白血病病毒gp51真核重组蛋白的单克隆抗体的制备方法，其特征在于：包括：

6.一株稳定分泌抗牛白血病病毒gp51真核重组蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞3e3，其特征在于：所述杂交瘤细胞3e3保藏编号为cctcc no:c2024192，其与真核表达的重组gp51蛋白和天然构象/变性的gp51蛋白反应，抗体的亚型为igm。

7.如权利要求6所述的杂交瘤细胞3e3在竞争elisa试验检测牛白...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨奕，孟烨，孟伊宁，叶建强，杨章平，商绍彬，陈玉，郝小利，孙洁，张倩雯，周舟，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：