同时检测CAP和KANA的荧光响应传感体系、制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了同时检测CAP和KANA的荧光响应传感体系、制备方法和应用，所述传感体系包括经KANA‑Aptamer及其互补序列cDNA1、CAP‑Aptamer及其互补序列cDNA2修饰的Fe<subgt;3</subgt;O<subgt;4</subgt;@Au纳米粒；其中，cDNA1序列为SEQ ID NO.1，KANA‑Aptamer序列为SEQ ID NO.2，cDNA2序列为SEQ ID NO.3，CAP‑Aptamer序列为SEQ ID NO.4。优势在于：(1)本发明专利技术借助磁分离特性实现分析物富集，有效实现分析物从复杂基质中分离富集，简化前处理步骤；(2)通过适配体的选择可以实现多种抗生素特异性检测，同时借助核酸放大技术能够大幅提高检测方法准确度和灵敏度，适用于超微量多种抗生素的检测；(3)将抗生素含量转化为荧光仪器的荧光强度值，检测方法操作简单便捷，检测迅速。使用荧光光谱仪进行荧光信号检测，卡那霉素和氯霉素检出限低至32.03aM和28.03aM，线性范围为0.1fM‑1nM。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于食品安全检测分析，涉及利用核酸适配体与磁性固相萃取技术、催化发卡组装核酸扩增及dnazyme循环剪切触发荧光信号等检测食品中抗生素的方法，具体为同时检测cap和kana的荧光响应传感体系、制备方法和应用。

技术介绍

1、在养殖、种植、食品生产等过程中，动物和植物可能会使用多种抗生素，因此食品中往往出现多种抗生素同时存在的情况。多种抗生素共存时，不同种类的抗生素之间可能存在相互作用或协同效应，而影响对其的检测。现有技术中，常规的检测方法也无法实现多种抗生素同时检测的目的，尤其是在食品领域，根本无法准确反应样品中存在哪种抗生素及其含量。

2、氯霉素(cap)是一种酰胺醇类抗生素，可作用于细菌核糖核蛋白体，阻挠蛋白质的合成，属于广谱抗生素，主要成分由委内瑞拉链霉菌的代谢物产生。过量氯霉素的积累可能引起人类再生障碍性贫血和白血病的发生，长期使用会引起神经炎症，菌落失调等问题。我国农业部2007年宣布，兽医学中禁止检出cap，我国对水产中氯霉素的检测底限为0.3μg/kg。

3、卡那霉素(kana)是一种氨基糖苷类抗生素，可以阻本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.同时检测CAP和KANA的荧光响应传感体系，其特征在于，所述传感体系包括经KANA-Aptamer及其互补序列cDNA1、CAP-Aptamer及其互补序列cDNA2修饰的Fe3O4@Au纳米粒；其中，cDNA1序列为SEQ ID NO.1，KANA-Aptamer序列为SEQ ID NO.2，cDNA2序列为SEQ IDNO.3，CAP-Aptamer序列为SEQ ID NO.4。

2.根据权利要求1所述的同时检测CAP和KANA的荧光响应传感体系，其特征在于，所述传感体系包括两端分别修饰荧光基团Cy5和猝灭基团BHQ3的发卡结构H1，发卡结构H2，及两端分别修饰荧光基...

【技术特征摘要】

1.同时检测cap和kana的荧光响应传感体系，其特征在于，所述传感体系包括经kana-aptamer及其互补序列cdna1、cap-aptamer及其互补序列cdna2修饰的fe3o4@au纳米粒；其中，cdna1序列为seq id no.1，kana-aptamer序列为seq id no.2，cdna2序列为seq idno.3，cap-aptamer序列为seq id no.4。

2.根据权利要求1所述的同时检测cap和kana的荧光响应传感体系，其特征在于，所述传感体系包括两端分别修饰荧光基团cy5和猝灭基团bhq3的发卡结构h1，发卡结构h2，及两端分别修饰荧光基团fam和猝灭基团bhq1的发卡结构h3；其中，h1序列为seq id no.5，h2序列为seq id no.6，h3序列为seq id no.7。

3.权利要求1或2所述同时检测cap和kana的荧光响应传感体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的同时检测cap和kana的荧光响应传感体系的制备方法，其特征在于，s1中fecl3·6h2o、ch3coona和组氨酸的物质的量比为1:18-24:4-8，fecl3·6h2o与乙二醇的配比为每1mmol的fecl3·6h2o...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔德昭，沈卓越，陈一桐，唐盛，沈薇，刘畅，史巧巧，李雅琪，张琪，李诗洁，
申请(专利权)人：江苏科技大学，
类型：发明
国别省市：