一种重组巯基链霉亲和素冻干粉、溶液及其制备方法与应用技术

技术编号:43413190 阅读:20 留言:0更新日期:2024-11-22 17:49
本发明专利技术涉及生物药物制剂领域,具体涉及一种可用于生物分子的分离、检测和标记的重组巯基链霉亲和素冻干粉及制备方法。该重组巯基链霉亲和素冻干粉中包含TCEP、HEPES和海藻糖,其复溶性佳,极少有高聚体形成,且后续应用无需清除保护剂,可以直接进行下游偶联反应,简化了使用步骤,加工成本低,适合规模化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白冻干粉制备领域,具体涉及一种重组巯基链霉亲和素冻干粉、溶液制备方法及其制备方法与其在生物分子的分离、检测和标记中的应用。


技术介绍

1、链霉亲和素(streptavidin)是一种与生物素具有高度亲和力的蛋白质,通常用于生物分子的分离、检测和标记。重组巯基链霉亲和素是一种经过基因工程改造的链霉亲和素,在蛋白c端添加了半胱氨酸,不仅保留了与生物素之间极高的亲和力,而且巯基功能团可以特异性地与载体上的反应性基团(如马来酰亚胺基团)形成共价键。这种定向偶联确保了链霉亲和素的活性位点暴露在外,能够与生物素高效结合,从而提高了偶联反应的结合效率和稳定性,避免了随机偶联带来的副反应和产物异质性问题。

2、链霉亲和素本身是一种四聚体结构蛋白。由于巯基是高度反应性的基团,容易与其他巯基发生氧化还原反应形成二硫键,因此在实际生产与使用过程中,重组巯基链霉亲和素容易形成八聚体甚至更高的聚体,从而导致生物素结合位点的空间位置被遮蔽、蛋白质表面非特异性结合位点增加、长期保存的稳定性下降以及偶联效率下降等一系列问题。在使用重组巯基链霉亲和素之前,一般需本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组巯基链霉亲和素冻干粉的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中pH值为7.0。

3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,用20~60分钟从室温调整到预冻阶段的目标温度,然后用20~60分钟调整到升华干燥阶段的目标温度,最后用30至300分钟调整到解析干燥阶段的目标温度。

4.如权利要求1-3任一项所述方法制备得到的重组巯基链霉亲和素冻干粉。

5.一种基于重组巯基链霉亲和素冻干粉的溶液,其包括权利要求4所述的重组巯基链霉亲和素冻干粉和溶剂。

<p>6.根据权利要求...

【技术特征摘要】

1.一种重组巯基链霉亲和素冻干粉的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中ph值为7.0。

3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,用20~60分钟从室温调整到预冻阶段的目标温度,然后用20~60分钟调整到升华干燥阶段的目标温度,最后用30至300分钟调整到解析干燥阶段的目标温度。

4.如权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员:高振飞钱永常邵冯金来灿钢
申请(专利权)人:杭州纽龙生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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