【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物药物制剂领域，具体而言，涉及一种核心链霉亲和素冻干粉的制备方法和检测方法。
技术介绍
1、链霉亲和素是一种具有高度亲和力的蛋白质，通常用于生物分子的分离、检测和标记。它在生命科学研究和分子生物学领域有广泛的应用背景，包括酶联免疫吸附实验、免疫组织化学、时间分辨免疫荧光技术、定量pcr、单链dna制备、生物分子纯化、单克隆抗体制备等。核心链霉亲和素是链霉亲和素的一种改良形式，与天然的链霉亲和素相比，去除了与活性无关的氨基酸序列，仅保留核心序列，其结合生物素标记的分子的亲和力更强，因此可以更牢固地捕获目标分子，同时非特异性结合也大大降低。
2、真空冷冻干燥技术常用于解决蛋白制剂的储藏和运输问题。真空冷冻干燥技术又称为冻干，此法将需要干燥的制品置于低温下使其所含的水分冻结，然后放在真空环境下干燥，让水分由固体状态直接升华为水蒸气并从制品中排出而使制品干燥。该方法可有效防止制品理化及生物特性的改变，保护了蛋白制剂的稳定性。然而，由于工程改造，核心链霉亲和素的蛋白质疏水性也更高，更倾向于在溶液中形成聚集、凝聚或聚合体，导致其在冻干后的复溶性(冻干粉在重新溶解时的难易程度)较差。
3、因此核心链霉亲和素在冻干过程后存在形态萎缩、塌陷或碎块等现象，复溶性较差，且自身理化性质不够稳定，在夏天运输过程后与生物素的结合能力有所下降。目前并未有关于有效储藏和运输该蛋白的稳定剂型。
技术实现思路
1、本申请的内容部分用于以简要的形式介绍构思，这些构思将在后面的具体实施
2、为了解决以上
技术介绍
部分提到的技术问题，本申请的一些实施例提供了一种核心链霉亲和素冻干粉的制备方法，包括以下步骤：调节核心链霉亲和素原液的ph值至预设值；将ph值调节至预设值的核心链霉亲和素原液与海藻糖母液混合；将混合在一起的核心链霉亲和素原液与海藻糖母进行冷冻干燥。
3、进一步地，与所述核心链霉亲和素原液混合的所述海藻糖母的浓度为0.25-5％。
4、进一步地，所述将混合在一起的核心链霉亲和素原液与海藻糖母进行冷冻干燥的步骤包括：
5、将混合在一起的核心链霉亲和素原液与海藻糖母依次进行预冻、升华干燥和解析干燥。
6、进一步地，
7、所述预冻的温度为-50～-20℃，升温时间为30～75min，保持时间为60～300min；
8、所述升华干燥的温度为-40～25℃，升温时间为20～60min，保持时间为300～1500min，真空度为0～0.5mbar；
9、所述解析干燥的温度为-20～25℃，升温时间为10～100min，保持时间为120～600min，真空度为0～0.01mbar。
10、进一步地，
11、所述预冻的温度为-50～-25℃，升温时间为40～70min，保持时间为160～270min；
12、所述升华干燥的温度为-15～8℃，升温时间为25～50min，保持时间为1000～1500min，真空度为0～0.5mbar；
13、所述解析干燥的温度为-10～20℃，升温时间为20～50min，保持时间为240～480min，真空度为0～0.01mbar。
14、本申请的另一目的在于提供一种核心链霉亲和素冻干粉的检测方法，该方法用于对权利要求1-5中任意一项制备的核心链霉亲和素冻干粉进行检测，包括以下步骤：
15、对核心链霉亲和素冻干粉进行外观形状检测；
16、对核心链霉亲和素冻干粉进行复溶时间检测；
17、对核心链霉亲和素冻干粉进行溶液澄清度检测；
18、对核心链霉亲和素冻干粉进行蛋白纯度检测；
19、对核心链霉亲和素冻干粉进行蛋白活性检测；
20、对核心链霉亲和素冻干粉进行模拟夏天运输检测。
21、进一步地，所述对核心链霉亲和素冻干粉进行模拟夏天运输检测的步骤包括：
22、将核心链霉亲和素冻干粉置于80℃放置9小时，随后置于40℃放置15小时，如此往复，共放置72小时。于第72小时进行检测。
23、进一步地，所述对核心链霉亲和素冻干粉进行蛋白活性检测的步骤包括：
24、用纯水将供试品稀释成1mg/ml，用green改良法检测核心链霉亲和素的活性。
25、本申请的有益效果在于：
26、通过海藻糖母液，提高冻干制剂的性状，保证冻干制剂的稳定性，以满足相关储存和运输要求；
27、利用真空冷冻干燥技术，经过对技术参数的实验摸索，成功将核心链霉亲和素制备成冻干粉剂型，提高了该蛋白的复溶性和稳定性。同时本专利技术提供的冻干工艺和制备方法简单可行，条件温和，重现性好，可控性强，适合大规模生产。此外，本专利技术利用核心链霉亲和素复溶后制备的溶液进行活性检测，结果表明该核心链霉亲和素溶液与生物素结合的能力十分稳定，在模拟夏天运输过程后，其活力与初始状态相比无明显差异。
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1.一种核心链霉亲和素冻干粉的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的核心链霉亲和素冻干粉的制备方法，其特征在于：
3.根据权利要求1所述的核心链霉亲和素冻干粉的制备方法，其特征在于：
4.根据权利要求1所述的核心链霉亲和素冻干粉的制备方法，其特征在于：
5.根据权利要求1所述的核心链霉亲和素冻干粉的制备方法，其特征在于：
6.一种核心链霉亲和素冻干粉的检测方法，该方法用于对权利要求1-5中任意一项制备的核心链霉亲和素冻干粉进行检测，其特征在于，包括以下步骤：
7.根据权利要求6所述的核心链霉亲和素冻干粉的检测方法，其特征在于：
8.根据权利要求6所述的核心链霉亲和素冻干粉的检测方法，其特征在于：
【技术特征摘要】
1.一种核心链霉亲和素冻干粉的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的核心链霉亲和素冻干粉的制备方法，其特征在于：
3.根据权利要求1所述的核心链霉亲和素冻干粉的制备方法，其特征在于：
4.根据权利要求1所述的核心链霉亲和素冻干粉的制备方法，其特征在于：
5.根据权利要求1所述的核心链...
【专利技术属性】
技术研发人员：高振飞，钱永常，邵冯金，来灿钢，
申请(专利权)人：杭州纽龙生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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