一种基于CRISPR/dCas12a的表观遗传基因编辑系统及其应用技术方案

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，公开一种基于CRISPR/dCas12a的表观遗传基因编辑系统及其应用。其中，所述表观遗传基因编辑系统包括：superCRISPRon融合蛋白和引导所述superCRISPRon融合蛋白靶向目的基因的crRNA；所述superCRISPRon融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1~6中任一种所示。与TET1‑dCas12a和TET1‑dCas12a‑VPR相比，本发明专利技术的表观遗传基因编辑系统具有效率高、作用效果持久等特点。此外，本发明专利技术的表观遗传基因编辑系统能够在肌肉卫星细胞中激活卵泡抑素（FSTN）的表达，提高肌肉卫星细胞的分化能力，从而促进肌肉生长。该表观遗传基因编辑系统对现有工具进行了升级，提高了编辑效率与持续时间，对推动基因编辑应用于临床治疗具有重要的作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，特别涉及一种基于crispr/dcas12a的表观遗传基因编辑系统及其应用。

技术介绍

1、表观遗传基因编辑是指在不改变dna序列的情况下，通过改变dna甲基化沉积或染色质构象，从而改变基因的表达水平。将dcas蛋白与表观遗传因子相结合，可以通过将表观遗传蛋白招募到目的基因进行特异的基因激活或抑制。转录因子vp64或p65与dcas9蛋白融合，这些转录激活因子能够在启动子区域招募转录起始复合物，从而在转录水平上实现基因的激活，且多个sgrna存在协同效应。将vp64、p65和rta三个转录激活结构域串联起来融合到dcas9蛋白上，形成dcas9-vpr系统，其内源目的基因激活效应更优，且具备稳定的多基因座激活效应。dna去甲基化酶tet1（ten-eleven translocation methylcytosinedioxygenase）能够催化5-甲基胞嘧啶（5-mc）转化为5-羟甲基胞嘧啶（5-hmc）、5-甲酰胞嘧啶（5fc）和5-羧基胞嘧啶（5cac）中间体，通过氧化与碱基切除修复（base excisionrepair，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于CRISPR/dCas12a的表观遗传基因编辑系统，其特征在于，所述表观遗传基因编辑系统包括：superCRISPRon融合蛋白和引导所述superCRISPRon融合蛋白靶向目的基因的crRNA；所述superCRISPRon融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1~6中任一种所示。

2.根据权利要求1所述的表观遗传基因编辑系统，其特征在于，所述crRNA如SEQ IDNO.7~13中任一种所示。

3.根据权利要求1所述的表观遗传基因编辑系统，其特征在于，所述目的基因为snrpn、RANKL、MMP2、MAGEB2或 FSTN。

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【技术特征摘要】

1.一种基于crispr/dcas12a的表观遗传基因编辑系统，其特征在于，所述表观遗传基因编辑系统包括：supercrispron融合蛋白和引导所述supercrispron融合蛋白靶向目的基因的crrna；所述supercrispron融合蛋白的氨基酸序列如seq id no.1~6中任一种所示。

2.根据权利要求1所述的表观遗传基因编辑系统，其特征在于，所述crrna如seq idno.7~13中任一种所示。

3.根据权利要求1所述的表观遗传基因编辑系统，其特征在于，所述目的基因为snrpn、rankl、mm...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨磊，王淞，李光鹏，苏广华，白春玲，宋丽爽，刘雪霏，
申请(专利权)人：内蒙古大学，
类型：发明
国别省市：