一种构建产鼠李糖脂的工程菌的方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种构建产鼠李糖脂的工程菌的方法及其应用。所述方法包括以下步骤：（1）选取野生型鼠李糖脂生产菌株进行培养，收集菌株；（2）使用常压室温等离子体诱变设备对步骤（1）收集的菌株进行诱变处理，获得诱变后的菌株库；（3）对诱变后的菌株库进行筛选，选择高产鼠李糖脂的菌株。本发明专利技术利用常压室温等离子体诱变系统对鼠李糖脂生产菌株进行诱变，构建高产鼠李糖脂的工程菌，并提供该工程菌在生物表面活性剂生产中的应用，提高了鼠李糖脂产量，为生物表面活性剂的生产提供了新途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，涉及一种构建产鼠李糖脂的工程菌的方法及其应用。

技术介绍

1、鼠李糖脂是一种由假单胞菌或伯克氏菌类产生的生物代谢性质的生物表面活性剂，具有多种生理活性，包括抗氧化、抗炎和抗肿瘤等作用，属于阴离子表面活性剂，具有油、水两亲性，能显著降低水的表面张力，具有乳化、破乳、消泡、洗涤、分散与絮凝、抗静电和润滑等多种功能，被广泛应用于环保、农业、食品、医药等领域。

2、目前鼠李糖脂的生产主要通过发酵工程实现，且有多种生产工艺和方法，一种常见的生产方法是使用假单胞菌或伯克氏菌类进行发酵，这些微生物能够自然产生鼠李糖脂。如cn102796781a公开一种用铜绿假单胞杆菌发酵、分离生产鼠李糖脂的方法，包括以下步骤：1）采用斜面接种法将铜绿假单胞杆菌菌种移入摇瓶进行扩大培养，获得铜绿假单胞杆菌种子液；2）先将发酵培养基加入发酵罐灭菌，然后按照8%~12%的接种量将铜绿假单胞杆菌种子液接入发酵罐内发酵，在接种种子液前，在培养基中加入1~5‰的泡敌；铜绿假单胞杆菌种子液发酵至120小时，获得糊状发酵液；3）使用分离设备对糊状发酵液进行两次萃取蒸本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种构建产鼠李糖脂的工程菌的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建产鼠李糖脂的工程菌的方法，其特征在于，所述野生型鼠李糖脂生产菌株包括假单胞菌和/或伯克氏菌；

3. 根据权利要求1所述的构建产鼠李糖脂的工程菌的方法，其特征在于，步骤（1）所述培养的培养基按质量百分比为100%计含有甘油1%~5%、酵母粉0.5%~1.2%、蛋白胨1.0%~3.2%、NaNO3 0.5%~2%、KH2PO4 0.2%~0.8%、Na2HPO4·12H2O 0.5%~1.0%、MgSO4·7H2O 0.2%~0.9%、CaCl2·2H2O 1.2%~...

【技术特征摘要】

1.一种构建产鼠李糖脂的工程菌的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建产鼠李糖脂的工程菌的方法，其特征在于，所述野生型鼠李糖脂生产菌株包括假单胞菌和/或伯克氏菌；

3. 根据权利要求1所述的构建产鼠李糖脂的工程菌的方法，其特征在于，步骤（1）所述培养的培养基按质量百分比为100%计含有甘油1%~5%、酵母粉0.5%~1.2%、蛋白胨1.0%~3.2%、nano3 0.5%~2%、kh2po4 0.2%~0.8%、na2hpo4·12h2o 0.5%~1.0%、mgso4·7h2o 0.2%~0.9%、cacl2·2h2o 1.2%~1.8%、feso4 0.2%~0.9%和cocl2 0.6%~1.8%，余量为水。

4.根据权利要求1所述的构建产鼠李糖脂的工程菌的方法，其特征在于，步骤（2）中将步骤（1）收集的菌株用生理盐水稀释至od660为0.6~0.9后进行诱...

【专利技术属性】
技术研发人员：王琛，王北，张雅萍，刘振兴，
申请(专利权)人：万华化学集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：