一种AKAP12突变基因敲入动物模型的构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种AKAP12突变基因敲入动物模型的构建方法和应用，具体公开了一种特异性靶向AKAP12突变基因的sgRNA，所述sgRNA的序列为GAGCTCTGCGTCGTCCCCCGAGG和GGTCTCCTCAGGCTCCTCGGGGG；所述AKAP12突变基因的突变位点为c.1655‑1659del。通过本发明专利技术提供的sgRNA，可基于CRISPR/Cas9基因编辑技术构建得到AKAP12突变基因(c.1655‑1659del)敲入动物模型，用于对自闭症的药物的筛选或成自闭症的致病机制的研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属生物医学，具体涉及一种akap12突变基因敲入动物模型的构建方法和应用。

技术介绍

1、crispr/cas9(clustered regularly interspaced short palindromicrepeats/crispr associated nuclease 9)基因编辑技术是一种由rna介导cas9蛋白对目的基因进行靶向修饰的技术。cas9是crispr相关核酸酶，含有两个核酸酶结构域，可在guide rna引导下，对靶基因位点的两条dna单链进行切割，使dna双链断裂，引发细胞自主dna损伤修复。如同时向细胞导入外源携带突变的dna片段，细胞自主dna损伤修复时可以此dna片段为模板进行修复，从而实现对目标位点的定点敲入，以及基因修正等多种修饰。

2、crispr/cas9技术在生物工程和生物医学方面有广泛的应用，可以快速建立基因突变的动物模型和细胞模型，用于探究遗传变异与疾病之间的关系。

3、自闭症谱系障碍(autism spectrum disorder,asd)，也称孤独症，是以社交交往障碍本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种特异性靶向AKAP12突变基因的sgRNA，所述sgRNA的序列包括：

2.一种试剂盒，包括权利要求1所述的sgRNA。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括Cas9 mRNA和/或含有突变位点的同源载体，所述突变位点为c.1655-1659del；优选地，所述含突变位点的同源载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。

4.根据权利要求2～3任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括扩增引物、测序引物；优选地，所述扩增引物包括SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的引物对；优选地，所述测序引物的序列...

【技术特征摘要】

1.一种特异性靶向akap12突变基因的sgrna，所述sgrna的序列包括：

2.一种试剂盒，包括权利要求1所述的sgrna。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括cas9 mrna和/或含有突变位点的同源载体，所述突变位点为c.1655-1659del；优选地，所述含突变位点的同源载体的核苷酸序列如seq id no:3所示。

4.根据权利要求2～3任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括扩增引物、测序引物；优选地，所述扩增引物包括seq id no:4和seq id no:5所示的引物对；优选地，所述测序引物的序列如seq id no:6所示。

5.权利要求1所述的sgrna或权利要求2～4任一项所述的试剂盒在构建akap12突变基因敲入动物模型中的应用。

6.根据权利要求5所述的应...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐亚平，谭婷，谷明瑶，朱明伟，李昕，王秀敏，李霞，赵艳，
申请(专利权)人：广州医科大学附属妇女儿童医疗中心，
类型：发明
国别省市：