亚胺还原酶突变体及其在光学纯2-芳基吡咯烷合成中的应用制造技术

技术编号:43291605 阅读:38 留言:0更新日期:2024-11-12 16:11
本发明专利技术属于生物工程技术领域,涉及亚胺还原酶突变体及其在光学纯2‑芳基吡咯烷合成中的应用。本发明专利技术提供的亚胺还原酶突变体的催化2‑(3,5‑二甲基苯基)吡咯啉的比活力高达136.8U/mg,能高效催化2‑(3,5‑二甲基苯基)吡咯啉不对称还原合成阿替卡仑(Aticaprant)手性中间体(S)‑2‑(3,5‑二甲基苯基)吡咯烷。与树脂原位吸附耦联的酶促反应中的底物浓度高达100g/L,产物时空得率高达438g/L/d,光学纯度大于99%。此外该亚胺还原酶突变体对于其他多种2‑芳基吡咯啉也具有较高的比活、转化率和光学活性。综上,本发明专利技术提供的亚胺还原酶突变体具有极高的催化活性和时空产率,有效解决了底物抑制的问题,在手性2‑芳基吡咯烷特别是阿替卡仑手性中间体(S)‑2‑(3,5‑二甲基苯基)吡咯烷的合成中具有较强的工业应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程,涉及一种亚胺还原酶突变体及其在光学纯2-芳基吡咯烷合成中的应用。具体涉及来源于细菌streptomyces viridochromogene的亚胺还原酶svired突变体及其编码核酸,包含所述亚胺还原酶突变体核酸的重组表达载体和重组表达转化体,包含所述重组亚胺还原酶突变体的催化剂,及其在催化2-芳基吡咯啉不对称还原制备手性2-芳基吡咯烷中的应用。


技术介绍

1、手性胺是一种重要的手性助剂,是医药和天然产物的关键合成中间体,目前约40%的手性药物分子中都含有手性胺结构单元。环状手性胺同时具备胺的特性和杂环化合物的特殊活性,作为重要的中间体广泛应用于天然产物和手性药物的合成(c&en,2018,96,26-30)。其中,手性2-取代吡咯烷是许多天然产物和生物活性分子的骨架结构,特别是2-芳基取代吡咯烷衍生物。例如,一种2018年被fda被批准用于治疗肿瘤的高选择性神经营养素受体激酶抑制剂药物拉罗替尼,以及几种用于治疗抑郁症的拮抗剂(j.med.chem.2011,54,8000–8012)。

2、

3、阿本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种亚胺还原酶突变体,其特征在于,所述突变体是将其如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列中第214位甲硫氨酸、第221位酪氨酸、第137位缬氨酸、第130位天冬氨酸、第131位异亮氨酸、第135位丙氨酸、第217位缬氨酸、第97位亮氨酸、第40位苏氨酸、第73位苏氨酸、第127位异亮氨酸及第126位丙氨酸中的一个或多个氨基酸残基替换为其它氨基酸残基,形成的新氨基酸序列所对应的具有亚胺还原酶活性的蛋白质。

2.根据权利要求1所述亚胺还原酶突变体,其特征在于,所述亚胺还原酶突变体具有如下序列中的任一种:

3.一种分离的核酸,其特征在于,所述核酸编码如权利要求1或...

【技术特征摘要】

1.一种亚胺还原酶突变体,其特征在于,所述突变体是将其如seq id no.2所示的氨基酸序列中第214位甲硫氨酸、第221位酪氨酸、第137位缬氨酸、第130位天冬氨酸、第131位异亮氨酸、第135位丙氨酸、第217位缬氨酸、第97位亮氨酸、第40位苏氨酸、第73位苏氨酸、第127位异亮氨酸及第126位丙氨酸中的一个或多个氨基酸残基替换为其它氨基酸残基,形成的新氨基酸序列所对应的具有亚胺还原酶活性的蛋白质。

2.根据权利要求1所述亚胺还原酶突变体,其特征在于,所述亚胺还原酶突变体具有如下序列中的任一种:

3.一种分离的核酸,其特征在于,所述核酸编码如权利要求1或2所述亚胺还原酶突变体。

4.一种重组表达载体,其特征在于,包含如权利要求3所述核酸。

5.一种重组表达转化体,其特征在于,包含如权利要求4所述重组表达载体。

【专利技术属性】
技术研发人员:郑高伟陈馨茹金添许建和潘江
申请(专利权)人:华东理工大学
类型:发明
国别省市:

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