基于生物层干涉的高通量群体靶向类固醇雌激素检测方法技术

本发明专利技术提供了一种基于生物层干涉的高通量群体靶向类固醇雌激素检测方法，能够实现对水中类固醇雌激素的高灵敏群体靶向识别检测。通过指数富集配体系统进化技术筛选获得类固醇雌激素的核酸适配体，并对其进行核苷酸特异性编辑，构建第一适配体和第二适配体。将第一适配体固定于链霉亲和素传感器表面，第二适配体特异性结合靶标类固醇雌激素形成第二适配体‑类固醇雌激素复合物。在检测过程中，链霉亲和素传感器上的第一适配体捕获第二适配体‑类固醇雌激素复合物，导致传感器尖端生物层厚度变化，由此引发的波长偏移可定量水中类固醇雌激素的浓度。该方法可同步识别雌酮、17β‑雌二醇和炔雌醇，检测浓度范围为0.001~1 nM，检测时间为10分钟。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于环境保护新污染物分析检测领域，开发了一种基于生物层干涉（bli）的高通量群体靶向类固醇雌激素（sees）检测方法，适合于真实水环境中低浓度类固醇雌激素的灵敏快速检测。

技术介绍

1、环境内分泌干扰物是一类典型的新污染物，在自然界中暴露剂量小、存留时间长，具有较强的生物蓄积毒性、扰乱内分泌甚至致癌等特点，严重威胁公众健康。其中，类固醇雌激素（steroid environmental estrogens，sees）包括雌酮（e1）、17β-雌二醇（e2）、雌三醇（e3）和炔雌醇（ee2）等多种同系物，相互间结构相近、毒理相似，容易产生毒性累积混合效应。该类污染物在实际水体中往往以痕量形式存在，同时又与其它污染物和环境背景基质共存，分析检测难度高。目前常用的色谱分离结合质谱检测方法虽然可以实现对sees的nm级至pm级检测，但仍然存在实际应用瓶颈。首先，实际样品成分非常复杂，与sees具有类似碳骨架结构的共存污染物易于干扰色谱分离效果，影响分析结果的准确性。其次，质谱设备价格昂贵，通常需要提取和浓缩等前处理步骤，分析周期长，对分析操作人员的要求高本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于生物层干涉的高通量群体靶向类固醇雌激素检测方法，其特征在于，对指数富集配体系统进化筛选获得的适配体进行核苷酸编辑，获得第一适配体和第二适配体；然后用生物素标记第一适配体，并将其固定在链霉亲和素传感器表面；第二适配体在检测孔板与类固醇雌激素特异性结合形成第二适配体-类固醇雌激素复合物；链霉亲和素传感器表面固定的第一适配体捕获第二适配体-类固醇雌激素复合物，通过链霉亲和素传感器尖端的光学厚度增加引发的波长偏移分析定量水中类固醇雌激素浓度，具体包括：

【技术特征摘要】

1.一种基于生物层干涉的高通量群体靶向类固醇雌激素检测方法，其特征在于，对指数富集配体系统进化筛选获得的适配体进行核苷酸编辑，获得第一适配体和第二适配体；然后用生物素标记第一适配体，并将其固定在链霉亲和素传感器表面；第二适配体在检...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐娟，王维康，地力努·地力夏提，张薇，
申请(专利权)人：华东师范大学，
类型：发明
国别省市：