一种副猪嗜血杆菌外膜囊泡及其疫苗、制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种副猪嗜血杆菌外膜囊泡，所述外膜囊泡为副猪嗜血杆菌血清型4型SH、5型GD株和12型JS株分泌；每种外膜囊泡粒径在200nm以内，蛋白条带大小集中在25KDa‑200KDa之间；每种外膜囊泡由细菌外膜和周质成分组成，包括酶、毒力因子、细菌特异性抗原和多种病原相关分子模式。本发明专利技术首次将副猪嗜血杆菌外膜囊泡加入副猪嗜血杆菌三价灭活疫苗(4型SH+5型GD株+12型JS株)中免疫动物，用副猪嗜血杆菌4型SH、5型GD株和12型JS株来进行攻毒试验，试验证明本发明专利技术制备的含有外膜囊泡的疫苗对副猪嗜血杆菌具有显著预防效果。且添加副猪嗜血杆菌分泌的外膜囊泡的副猪嗜血杆菌三价灭活疫苗，在降低副猪嗜血杆菌4型SH、5型GD株和12型JS株的灭活菌体含量的情况下，仍具有显著预防副猪嗜血杆菌的效果，可用于制备预防副猪嗜血杆菌病的产品。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及副猪嗜血杆菌外膜囊泡制备及疫苗制备，更具体的说是涉及一种副猪嗜血杆菌外膜囊泡、制备方法及应用。

技术介绍

1、近年来，副猪嗜血杆菌所引起的全身性炎性疾病给全球养猪业造成巨大的经济损失，如何预防和控制副猪嗜血杆菌病发生成为关注的焦点，疫苗的研究开发也受到了重视。

2、外膜囊泡(omvs)是革兰氏阴性菌表面分泌的产物，是细菌外膜在一定的机制下发生出芽并在细菌表面形成一种囊泡状的结构，这种结构包括了外膜以及周质成分。外膜囊泡大多数为球形，直径大约在20～250nm之间。1959年，de等首次发现霍乱弧菌滤除细菌后的培养液能够诱导家兔对霍乱弧菌的免疫反应。chatterje等在研究对数生长期霍乱弧菌的超微结构时，发现在液体培养基无菌滤液中有革兰氏阴性菌细胞壁出芽形成的囊泡，而且在外膜容易发生囊泡出芽的位点附近，颗粒物质含量较高，这些颗粒可以随着细胞质进入出芽的囊泡中。omvs的产生代表着细菌具有向外部环境释放大量复杂蛋白组分和磷脂的独特机制。后来的研究发现，几乎所有的革兰氏阴性菌都能产生omvs，其化学结构的组成成分除了外膜蛋白还有其他一本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种副猪嗜血杆菌外膜囊泡，其特征在于，所述外膜囊泡为副猪嗜血杆菌血清型4型SH1012株、5型GD1022株和12型JS1015株分泌。

2.根据权利要求1所述的一种副猪嗜血外膜囊泡，其特征在于，每种外膜囊泡粒径在200nm以内，蛋白条带大小集中在25KDa-200KDa之间。

3.权利要求1-2任一所述的外膜囊泡的制备方法，其特征在于，过程包括：

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述发酵培养为通过调节进气量和搅拌速度控制溶氧为33-36％；37℃发酵培养10～12h；发酵培养用培养基为TSB，其中加入终浓度为4μg/m...

【技术特征摘要】

1.一种副猪嗜血杆菌外膜囊泡，其特征在于，所述外膜囊泡为副猪嗜血杆菌血清型4型sh1012株、5型gd1022株和12型js1015株分泌。

2.根据权利要求1所述的一种副猪嗜血外膜囊泡，其特征在于，每种外膜囊泡粒径在200nm以内，蛋白条带大小集中在25kda-200kda之间。

3.权利要求1-2任一所述的外膜囊泡的制备方法，其特征在于，过程包括：

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述发酵培养为通过调节进气量和搅拌速度控制溶氧为33-36％；37℃发酵培养10～...

【专利技术属性】
技术研发人员：张立华，李劼，李超，张利平，杨富贵，史文瑞，
申请(专利权)人：金宇保灵生物药品有限公司，
类型：发明
国别省市：