突变的Cas蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术属于核酸编辑领域，特别是规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)技术领域。具体而言，本发明专利技术提供了一种活性改善、编辑效率提高的Cas突变蛋白，相对于野生型亲本Cas蛋白，本发明专利技术的Cas突变蛋白缩短了蛋白大小，提高了编辑效率，能够高效的用于靶核酸的单碱基编辑，具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因编辑领域，特别是规律成簇的间隔短回文重复(crispr)。具体而言，本专利技术涉及一种活性改善、编辑效率提高的突变的cas蛋白及其应用。

技术介绍

1、crispr/cas技术是一种被广泛使用的基因编辑技术，它通过rna引导对基因组上的靶序列进行特异性结合并切割dna产生双链断裂，利用生物非同源末端连接或同源重组进行定点基因编辑。

2、crispr/cas9系统是最常用的ii型crispr系统，它识别3’-ngg的pam基序，对靶标序列进行平末端切割。crispr/cas type v系统是一类新发现的crispr系统，它具有5’-ttn的基序，对靶标序列进行粘性末端切割，例如cpf1,c2c1,casx,casy。然而目前存在的不同的crispr/cas各有不同的优点和缺陷。例如cas9,c2c1和casx均需要两条rna进行指导rna，而cpf1只需要一条指导rna而且可以用来进行多重基因编辑。casx具有980个氨基酸的大小，而常见的cas9，c2c1，casy和cpf1通常大小在1300个氨基酸左右。此外，cas9，c本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种Cas突变蛋白，所述突变蛋白与亲本Cas蛋白的氨基酸序列相比，具有氨基酸的缺失，其特征在于，

2.一种融合蛋白，所述融合蛋白包括权利要求1所述的Cas突变蛋白以及其他的修饰部分；优选的，所述修饰部分选自另外的蛋白或多肽、可检测的标记或其任意组合。

3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸为编码权利要求1所述Cas突变蛋白的多核苷酸序列，或编码权利要求2所述融合蛋白的多核苷酸序列。

4.一种载体，其特征在于，所述载体包含权利要求3所述的多核苷酸以及与之可操作连接的调控元件。

5.一种CRISPR-Cas系统，其特征在于，所述系...

【技术特征摘要】

1.一种cas突变蛋白，所述突变蛋白与亲本cas蛋白的氨基酸序列相比，具有氨基酸的缺失，其特征在于，

2.一种融合蛋白，所述融合蛋白包括权利要求1所述的cas突变蛋白以及其他的修饰部分；优选的，所述修饰部分选自另外的蛋白或多肽、可检测的标记或其任意组合。

3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸为编码权利要求1所述cas突变蛋白的多核苷酸序列，或编码权利要求2所述融合蛋白的多核苷酸序列。

4.一种载体，其特征在于，所述载体包含权利要求3所述的多核苷酸以及与之可操作连接的调控元件。

5.一种crispr-cas系统，其特征在于，所述系统包括权利要求2所述的融合蛋白以及至少一种grna，所述grna包括能够结合权利要求2所述的融合蛋白中的cas突变蛋白。

6.一种组合物，其特征在于，所述组合物包含：

7.一种工程化的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求1所述的cas突变蛋白，或权利要求2所述的融合蛋白，或权利要求3所述的多核苷酸，或权利要求4所...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁亚峰，
申请(专利权)人：山东舜丰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：