一种高效提取猪毛DNA的方法技术

技术编号:43083083 阅读:36 留言:0更新日期:2024-10-26 09:33
本发明专利技术涉及一种高效提取猪毛DNA的方法,包括以下步骤:毛囊采集、毛囊消化、DNA的抽提、沉淀和洗涤,DNA的抽提为两次,第一次是以Tris饱和酚抽提,第二次是以饱和酚:氯仿:异戊醇=25:24:1混合液抽提;然后在二次抽提液中加入异丙醇和10M的乙酸铵对DNA进行第一次沉淀,在沉淀物中加入冰乙醇对DNA进行第二次沉淀,之后再进行后续的洗涤等处理。使用本发明专利技术的方法能快速有效地提取杜洛克、大白猪和长白猪的猪毛DNA,且提取质量满足基因芯片测序对DNA的要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物,具体涉及一种高效提取猪毛dna的方法。


技术介绍

1、随着snp芯片和测序技术的发展,基因组选择方法自2001年提出以来发展迅速,已成为动物育种领域的应用热点,给动物育种带来了革命性的变化。在猪育种领域上,基因组选择能提高选择的准确性、加快遗传进展获益,对候选个体进行早期评估,提早淘汰,对于常规育种难以改良的性状具有吸引力。进行基因组选择的前提是获得猪的基因组信息。猪育种行业从事者通常采集猪的耳朵和血液样品来提取总dna,其中耳组织的收集需要用镊子对耳部位进行夹取,并用剪刀剪去小块耳组织。血液的收集需要用栓猪绳牵引猪嘴,在猪的颈部进行血液收集,不熟练的采血者往往需要扎多次才能收集,费时费力,难度较大。无论是收集耳组织或者血液,都会对猪造成一定应激,更有甚者导致育种场的不合作,延缓育种工作的展开。毛发样品是一种容易获得的样品,其易于收集且不会对猪造成损伤和应激,同时保存条件简单,只需干燥的密封袋就可以长期保存。但由于猪毛发中dna含量低,角蛋白质含量高而不易消化,利用猪毛获得的基因组dna通常总量少且质量不高,无法满足基因芯片测序的要求。本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高效提取猪毛DNA的方法,包括以下步骤:毛囊采集、毛囊消化、DNA的抽提、沉淀和洗涤,其特征在于,DNA的抽提为两次,第一次是以Tris饱和酚抽提,第二次是以饱和酚:氯仿:异戊醇=25:24:1混合液抽提;然后在二次抽提液中加入异丙醇和10M的乙酸铵对DNA进行第一次沉淀,在沉淀物中加入冰乙醇对DNA进行第二次沉淀,之后再进行后续的洗涤等处理。

2.根据权利要求1所述高效提取猪毛DNA的方法,其特征在于,所述毛囊为20根时,所述异丙醇和10M乙酸铵的使用量为360μL异丙醇和40μL的10M乙酸铵。

3.根据权利要求1所述高效提取猪毛DNA的方法,其特征在...

【技术特征摘要】

1.一种高效提取猪毛dna的方法,包括以下步骤:毛囊采集、毛囊消化、dna的抽提、沉淀和洗涤,其特征在于,dna的抽提为两次,第一次是以tris饱和酚抽提,第二次是以饱和酚:氯仿:异戊醇=25:24:1混合液抽提;然后在二次抽提液中加入异丙醇和10m的乙酸铵对dna进行第一次沉淀,在沉淀物中加入冰乙醇对dna进行第二次沉淀,之后再进行后续的洗涤等处理。

2.根据权利要求1所述高效提取猪毛dna的方法,其特征在于,所述毛囊为20根时,所述异丙醇和10m乙酸铵的使用量为360μl异丙醇和40μl的10m乙酸铵。

3.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员:丁向东邹全李淑娟刘燕玲邵玉如李谦君
申请(专利权)人:中国农业大学
类型:发明
国别省市:

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