【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因检测，尤其涉及一种基于数字pcr的cho细胞dna残留量检测标准品的制备方法及其产品和应用。
技术介绍
1、cho细胞即中国仓鼠卵巢细胞(chinese hamster ovary cell)。由于cho具有良好的基因组背景特征，并且在悬浮培养中具有相对较快的生长速度和较高的蛋白质表达产量，因此它被用作生物制品行业的主要生产用细胞系，是最具代表性的动物细胞表达系统。cho细胞具有以下特点：赋予表达出的蛋白具有糖基化功能从而使体外表达的蛋白更接近真核生物蛋白特性；表达的多聚体蛋白具有活性；在商业化大生产方面，基于生物反应器能够做到培养基成分完全化学限定的无血清大规模悬浮培养，目的蛋白产量高且生产成本低。cho细胞的上述特点和优势，使cho细胞被广泛用于抗体、基因重组蛋白质药物和重组蛋白疫苗等大分子蛋白生物产品的研发和工业化生产，使其成为当前生物制药领域最重要的表达或生产系统。
2、宿主细胞残留dna是指可能出现于生物制品中的来自宿主细胞的dna片段。用传代细胞株生产的生物制品，其宿主细胞残留dna可能会传递肿...
【技术保护点】
1.一种基于数字PCR的CHO细胞DNA残留量检测标准品的制备方法，其特征在于，所述标准品的定值方式是合作定值；
2.根据权利要求1所述的标准品的制备方法，其特征在于，所述数字PCR的反应体系包括预混液、DNA模版、引物对和探针；
3.根据权利要求1或2所述的标准品的制备方法，其特征在于，所述数字PCR的扩增程序包括：
4.根据权利要求1-3中任一项所述的标准品的制备方法，其特征在于，所述合作定值的方式包括：将所述标准品进行至少8次的独立定量检测，优选为8-10次，每个标准品进行至少3次的重复测试，优选为3-5次；以独立定量检测的平...
【技术特征摘要】
1.一种基于数字pcr的cho细胞dna残留量检测标准品的制备方法，其特征在于，所述标准品的定值方式是合作定值；
2.根据权利要求1所述的标准品的制备方法，其特征在于，所述数字pcr的反应体系包括预混液、dna模版、引物对和探针；
3.根据权利要求1或2所述的标准品的制备方法，其特征在于，所述数字pcr的扩增程序包括：
4.根据权利要求1-3中任一项所述的标准品的制备方法，其特征在于，所述合作定值的方式包括：将所述标准品进行至少8次的独立定量检测，优选为8-10次，每个标准品进行至少3次的重复测试，优选为3-5次；以独立定量检测的平均值作为标准品的定值结果。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的标准品的制备方法，其特征在于，所述合作定值的数据统计的过程为：
6.根据权利要求1-5中任一项所述的标准品的制备方法，其特征在于，所述制备方法的步骤包括将cho细胞裂解，进行孵育后获得含有cho细胞...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁文，霍银波，刘刚，曹梅霞，杨雪，闻艳丽，许丽，李兰英，徐勤，杨镇州，罗超，
申请(专利权)人：上海市计量测试技术研究院中国上海测试中心，华东国家计量测试中心，上海市计量器具强制检定中心，
类型：发明
国别省市：
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