一种同时检测引起脑炎的6种病原体的多重RT-PCR方法及试剂盒和应用技术

本发明专利技术公开了一种同时检测能够引起脑炎炎的6种病原体的多重RT‑PCR方法及试剂盒和应用，该实时荧光定量PCR检测试剂盒包括PCR引物探针，所述PCR引物探针包括分别针对单纯疱疹病毒、EB病毒、柯萨奇病毒、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、结核分枝杆菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针；其序列分别如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.18所示，本发明专利技术能够检测单纯疱疹病毒、EB病毒、柯萨奇病毒、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、结核分枝杆菌，具有非常高的灵敏度与特异性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测，具体涉及一种同时检测引起脑炎的6种病原体的多重rt-pcr方法及试剂盒和应用。

技术介绍

1、脑炎(encephalitis)是指脑实质受病原体侵袭导致的炎症性病变。根据病因涉及范围的不同有广义与狭义之分。狭义指脑实质受病原微生物直接侵犯所引起的炎性改变。通常采用狭义概念。绝大数的病因是病毒，也可由细菌、霉菌、螺旋体、立克次氏体、寄生虫等感染引起，有的可能是变态反应性疾病，如急性播散性脑脊髓炎。通常所谓的脑炎多指病毒性脑炎和属于急性播散脑脊髓炎的感染后脑脊髓炎。按照病程分为急性、亚急性、慢性；按照病原微生物分为细菌性、真菌性、病毒性等；根据流行情况分为流行性与散发性。脑炎可以发病于不同性别和年龄，多为急性或亚急性。临床上以高热、头痛、呕吐、昏迷、惊厥等症状为其特征，大多伴有脑脊液成分的改变。应根据不同病因进行防治。

2、目前诊断脑炎的常用方式为头颅ct或者核磁共振可显示脑部病变部位，脑脊液培养可确定病原体、还有血常规等手段，但除了培养法之外均无法确定何种病原体感染，且培养时间长，成功率低，无法满足临床快速诊疗的需求。荧光本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种同时检测引起脑炎的6种病原体的多重RT-PCR试剂盒，其特征在于，包括PCR引物探针缓冲液、病原体引物探针、人DNA内参引物探针；所述病原体为单纯疱疹病毒、EB病毒、柯萨奇病毒、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、结核分枝杆菌；

2.根据权利要求1所述的一种同时检测引起脑炎的6种病原体的多重RT-PCR试剂盒，其特征在于，所述单纯疱疹病毒的检测探针序列5’端标记有FAM发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ1；所述EB病毒的检测探针序列5’端标记有ROX发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ2；所述柯萨奇病毒的检测探针序列5’端标记有VIC发光基团，3’端标记有荧光淬灭基...

【技术特征摘要】

1.一种同时检测引起脑炎的6种病原体的多重rt-pcr试剂盒，其特征在于，包括pcr引物探针缓冲液、病原体引物探针、人dna内参引物探针；所述病原体为单纯疱疹病毒、eb病毒、柯萨奇病毒、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、结核分枝杆菌；

2.根据权利要求1所述的一种同时检测引起脑炎的6种病原体的多重rt-pcr试剂盒，其特征在于，所述单纯疱疹病毒的检测探针序列5’端标记有fam发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团bhq1；所述eb病毒的检测探针序列5’端标记有rox发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团bhq2；所述柯萨奇病毒的检测探针序列5’端标记有vic发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团bhq1；所述脑膜炎奈瑟菌的检测探针序列5’端标记有fam发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团bhq1；所述流感嗜血杆菌的检测探针序列5’端标记有rox发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团bhq2；所述结核分枝杆菌的检测探针序列5’端标记有vic发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团bhq1。

3.根据权利要求1所述的一种同时检测引起脑炎的6种病原体的多重rt-pcr...

【专利技术属性】
技术研发人员：董晓艳，史芊，闫泉，甄博文，王莹，梁宁孝，王洪，戴海峰，高凡，郭晓璐，
申请(专利权)人：爱科睿特生物医疗科技南京有限公司，
类型：发明
国别省市：