本发明专利技术公开了一种同时检测能够引起中耳炎的3种细菌的多重RT‑PCR方法及试剂盒和应用，该实时荧光定量PCR检测试剂盒包括PCR引物探针，所述PCR引物探针包括分别针对肺炎链球菌、卡他莫拉菌、金黄色葡萄球菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针；其序列分别如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.9所示，本发明专利技术能够检测肺炎链球菌、卡他莫拉菌、金黄色葡萄球菌，具有非常高的灵敏度与特异性。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物检测，具体涉及一种同时检测引起中耳炎的3种细菌的多重rt-pcr方法及试剂盒和应用。
技术介绍
1、中耳炎，是一种位于人耳中部，即鼓膜后区域的病毒或细菌感染引发的炎症。其主要来源于细菌和病毒，常由诸如感冒、流感或鼻窦炎等疾病引起。此疾病较为常见，特别是在10岁以下的儿童中，80％的孩子至少得过一次中耳炎。其中，2岁和5岁的儿童发病率最高。中耳炎主要有急性中耳炎、急性化脓性中耳炎、慢性化脓性中耳炎和分泌性中耳炎等类型。
2、中耳炎的主要临床症状包括耳痛、听力下降、耳道内流水、流脓甚至流血等。浆液性中耳炎主要表现为耳痛、耳闷、耳堵、听力下降或耳鸣等。除经典症状外，还可能伴发全身症状，如发热、头痛等。对于儿童患者而言，需要家长密切关注其是否有频繁“揉耳”的动作。
3、中耳炎的治疗主要采用局部、全身药物或手术治疗，对于未能及时治疗的严重中耳炎，可能会导致永久性听力下降，或引发头颅邻近部位的感染，出现严重的颅内及颅外并发症。一旦出现耳痛、耳鸣、耳闷、听力下降或者耳道流脓等症状，应及时就医诊治。
>4、学术研究方面，本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种同时检测引起中耳炎的3种细菌的多重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于检测肺炎链球菌、卡他莫拉菌、金黄色葡萄球菌的管1试剂和Tap酶，所述管1试剂包括PCR引物探针缓冲液、病原体引物探针、人DNA内参引物探针；其中，管1试剂内靶标为肺炎链球菌、卡他莫拉菌、金黄色葡萄球菌；
2.根据权利要求1所述的一种同时检测引起中耳炎的3种细菌的多重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述肺炎链球菌的检测探针序列5’端标记有FAM发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ1；所述卡他莫拉菌的检测探针序列5’端标记有ROX发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ2；所述...
【技术特征摘要】
1.一种同时检测引起中耳炎的3种细菌的多重rt-pcr检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于检测肺炎链球菌、卡他莫拉菌、金黄色葡萄球菌的管1试剂和tap酶，所述管1试剂包括pcr引物探针缓冲液、病原体引物探针、人dna内参引物探针；其中，管1试剂内靶标为肺炎链球菌、卡他莫拉菌、金黄色葡萄球菌；
2.根据权利要求1所述的一种同时检测引起中耳炎的3种细菌的多重rt-pcr检测试剂盒，其特征在于，所述肺炎链球菌的检测探针序列5’端标记有fam发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团bhq1；所述卡他莫拉菌的检测探针序列5’端标记有rox发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团bhq2；所述金黄色葡萄球菌的检测探针序列5’端标记有vic发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团bhq1。
3.根据权利要求1所述的一种同时检测引起中耳炎的3种细菌的多重rt-pcr检测试剂盒，其特征在于，所述人dna内参的检测探针序列5’端...
【专利技术属性】
技术研发人员：董晓艳，史芊，闫泉，甄博文，王莹，梁宁孝，王洪，戴海峰，高凡，郭晓璐，
申请(专利权)人：爱科睿特生物医疗科技南京有限公司，
类型：发明
国别省市：
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