【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物，具体涉及一种包含poly(a)尾的rna。所述poly(a)尾使得编码所述rna的dna在原核系统中的复制具有较高的稳定性，且可用于调节所述rna在真核细胞中的表达水平。
技术介绍
1、可翻译mrna药物分子的一级结构由5’帽子结构、5’非编码区(5’utr)，编码区，3’非编码区以及多聚腺苷酸尾(poly(a)尾)组成，其中poly(a)尾已知的作用包括维持mrna分子的体内稳定性，参与蛋白翻译的起始过程，后者通过poly(a)结合蛋白(poly a tailbinding protein，pabp)与翻译起始复合物的相互作用实现。真核生物细胞内，poly(a)尾以转录后修饰的方式，在典型poly(a)聚合酶作用下合成。
2、体外制备mrna药物的第一步，是以含有设计好的产品序列的线性化质粒为模板通过体外转录(ivt)合成，poly(a)尾则通常以共转录的方式添加在3’utr下游。为实现共转录添加poly(a)，需要在模板质粒中包含相对应的poly(da:dt)序列。然而，质粒中poly(da:dt)重复序...
【技术保护点】
1.一种可在细胞中复制的工程化DNA分子，其包含多聚腺苷尾(Poly A尾)编码序列，所述Poly(A)尾编码序列包含唯一的元件a和至少一个元件b，以及至少一个元件c和/或至少一个元件d：
2.根据权利要求1所述的DNA分子，所述Poly(A)尾编码序列的长度为101至200nt或101-150nt或120至150nt或130-140nt或120-135nt或123-125nt。
3.根据权利要求1或2所述的DNA分子，所述Poly(A)尾编码序列3’末端的为A核苷酸或非A核苷酸。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的DNA分子，其...
【技术特征摘要】
1.一种可在细胞中复制的工程化dna分子，其包含多聚腺苷尾(poly a尾)编码序列，所述poly(a)尾编码序列包含唯一的元件a和至少一个元件b，以及至少一个元件c和/或至少一个元件d：
2.根据权利要求1所述的dna分子，所述poly(a)尾编码序列的长度为101至200nt或101-150nt或120至150nt或130-140nt或120-135nt或123-125nt。
3.根据权利要求1或2所述的dna分子，所述poly(a)尾编码序列3’末端的为a核苷酸或非a核苷酸。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的dna分子，其中所述元件a≤80nt。
5.根据权利要求1-3中任一项所述的dna分子，其中所述元件a为30至70nt、35至65nt、40至60nt、或45至55nt，优选60nt。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的dna分子，其中所述元件a的50％或以上的多核苷酸位于所述poly(a)尾编码序列的5’部分或3’部分。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的dna分子，其中所述元件b为3nt至10nt、10至19nt、12至15nt、14nt至17nt或16至19nt，优选19nt。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的dna分子，其中所述元件b的个数为2-10个，优选2-5个，进一步优选3个。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的dna分子，其中所述元件c为g。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的dna分子，其中所述元件c的个数为2至10个、3个至8个、或4至6个或2-5个，优选2个。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的dna分子，其中所述元件d包含回文序列。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的dna分子，其中所述元件d为3至18nt、5至16nt、4至10nt、或6至12nt,优选6nt。
13.根据权利要求1-12中任一项所述的dna分子，其中所述元件d选自以下序列中的任一种或多种：gatatc(seq id no：15)、gtatac(seq id no：16)、gaatct(seq id no：17)、gcatatgact(seq id no：18)及gatatcgtatac(seq id no：19)。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的dna分子，其中所述元件d选自如下核苷酸序列中的任一种或多种:seq id no:15、seq id no:16、及seq id no：17。
15.根据权利要求1-14中任一项所述的dna分子，其中所述元件d的核苷酸序列如seqid no：15所示。
16.根据权利要求1-15中任一项所述的dna分子，其中所述元件d的个数为0-5，优选1-3个，进一步优选1个。
17.根据权利要求1-16中任一项所述的dna分子，其中当元件c和元件d同时存在时，所述元件c和元件d的个数总和为2-15个，优选3-5个，进一步优选3个。
18.根据权利要求1-17中任一项所述的dna分子，其中在poly(a)尾编码序列的3’部分，优选所述poly(a)尾编码序列靠近3’末端的1/2部分，包含一个或多个非a核苷酸。
19.根据权利要求1-18中任一项所述的dna分子，所述poly(a)尾编码序列的结构为：
20.根据权利要求1-19中任一项所述的dna分子，所述poly(a)尾编码序列的结构为：
21.根据权利要求1-20中任一项所述的dna分子，所述poly(a)尾编码序列的结构为：
22.根据权利要求1-21中任一项所述的dna分子，所述poly(a)尾编码序列如seq idno：1至10中任一项所示。
23.根据权利要求1-22中任一项所述的dna分子，所述poly(a)尾编码序列如seq idno：3或seq id no：4所示。
24.根据权利要求1-23中任一项所述的d...
【专利技术属性】
技术研发人员：张卫国，董翊洁，陈华，秦尉，
申请(专利权)人：仁景苏州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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