酵母双杂交系统及其构建方法与用途技术方案

技术编号:42650226 阅读:90 留言:0更新日期:2024-09-06 01:43
本发明专利技术涉及基因工程和药物筛选技术领域,公开了一种酵母双杂交系统的构建方法,该酵母双杂交系统的构建方法为先提取SARS‑CoV‑2的Spike蛋白基因及人类的ACE2基因,再将Spike蛋白基因、ACE2基因分别克隆至酵母双杂交载体一、酵母双杂交载体二,随后将克隆有Spike蛋白基因的酵母双杂交载体一、克隆有ACE2基因的酵母双杂交载体二分别转化至同一感受态细胞或同种类的不同感受态细胞,最后将载有克隆有Spike蛋白基因的酵母双杂交载体一、克隆有ACE2基因的酵母双杂交载体二的同一感受态细胞或同种类的不同感受态细胞转移至培养基内,得到酵母双杂交系统,此外,本申请还公开了一种酵母双杂交系统及其用途、植物提取物的用途。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程和药物筛选,尤其涉及酵母双杂交系统及其构建方法、用途、植物提取物的用途。


技术介绍

1、sars-cov-2(严重急性呼吸综合症冠状病毒2)是一种冠状病毒。sars-cov-2通过其表面的spike蛋白与宿主细胞表面的ace2受体结合,从而侵入细胞。这一结合过程是病毒感染和传播的关键步骤。因此,阻断spike蛋白与ace2受体的相互作用成为开发抗sars-cov-2治疗策略的重要目标。

2、目前,已有多种技术用于阻断spike蛋白与ace2受体的相互作用。其中,表面等离子共振(spr)和分子对接技术是常用的方法。spr技术通过实时监测分子间的相互作用,评估候选化合物对spike-ace2结合的阻断效果;分子对接技术通过计算模拟化合物与蛋白质之间的结合亲和力,预测其潜在的阻断效果。然而,这些方法主要在体外检测中取得了一定进展,但在细胞内环境中验证候选药物的有效性方面仍存在局限性,尤其是在细胞内检测和细胞膜上的检测中。

3、酵母双杂交系统(yeast two-hybrid,y2h)是一种广泛应用于研究蛋白质间相互作本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种酵母双杂交系统的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的酵母双杂交系统的构建方法,其特征在于,步骤1中提取SARS-CoV-2的Spike蛋白基因的方法为:

3.根据权利要求1所述的酵母双杂交系统的构建方法,其特征在于,步骤2中所述酵母双杂交载体一选自pBT3-SUC、pPR3-C、pX-Cub-TF、pTF-Cub-X、pY-HA-NubG、pNubG-HA-Y中的任一种;

4.根据权利要求1所述的酵母双杂交系统的构建方法,其特征在于,步骤3中,所述感受态细胞为NMY51感受态细胞;

5.一种酵母双杂交系统,...

【技术特征摘要】

1.一种酵母双杂交系统的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的酵母双杂交系统的构建方法,其特征在于,步骤1中提取sars-cov-2的spike蛋白基因的方法为:

3.根据权利要求1所述的酵母双杂交系统的构建方法,其特征在于,步骤2中所述酵母双杂交载体一选自pbt3-suc、ppr3-c、px-cub-tf、ptf-cub-x、py-ha-nubg、pnubg-ha-y中的任一种;...

【专利技术属性】
技术研发人员:郑俊霞黄钰景祖敦涛田陈婧杨健妮陈文霖段思妍严顺欣袁钰嘉谢俊涛于新范红霞周海波孙平华
申请(专利权)人:广东工业大学
类型:发明
国别省市:

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