【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于润肠通便，具体为一种通便促进消化的混合菌种及其制备方法。
技术介绍
1、随着社会的发展和人们生活节奏的加快，便秘已经成为影响人们生活质量的一个普遍问题。据相关统计数据显示，全球约有20％的人受到便秘的困扰，而在老年人中这一比例更高。长期便秘不仅会导致肠道功能紊乱，还可能引发痔疮、肛裂等疾病，甚至增加肠道肿瘤的风险。因此，寻找安全有效的润肠通便方法成为当前研究的重要课题。
2、传统的润肠通便方法主要包括药物治疗和非药物治疗两大类。药物治疗主要是通过促进肠道蠕动、增加粪便水分等机制来缓解便秘，但长期使用往往会产生依赖性，并可能带来一系列副作用。非药物治疗包括饮食调节、运动疗法等，虽然安全但效果有限且需要长期坚持。
3、因此，寻找一种安全、有效且无副作用的润肠通便方法对于改善便秘患者的生活质量具有重要意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于：为了解决上述提出的问题，提供一种通便促进消化的混合菌种及其制备方法。
2、本专利技术采用的技术方案如下：一种通便促进消化的混合菌种及其制备方法，所述混合菌种包括：凝结魏茨曼氏菌hy267+副干酪乳酪杆菌hy126。
3、在一优选的实施方式中，所述制备方法包括以下步骤：
4、s1:进行菌种的活化，从低温保藏的凝结魏茨曼氏菌hy267和副干酪乳酪杆菌hy126中分别取少量菌种，接种到适合各自菌株的液体培养基中，于37℃下活化24小时；
5、s2:进行种子液的制备，
6、s3:进行菌液的混合，等到两种菌株都进入对数生长期后，将凝结魏茨曼氏菌hy267和副干酪乳酪杆菌hy126的种子液按一定比例(例如1:1)混合；
7、s4:进行适应期的培养，将混合后的菌液转移到新的培养基中，让两种菌株在共同的环境中继续培养一段时间，以适应彼此的存在，此步骤可以增强混合菌株的稳定性和协同效果；
8、s5:进行扩大培养，将适应期后的混合菌液按一定比例接种到更大的培养容器中，提供充足的养分和适宜的环境条件，进行扩大培养；
9、s6:进行离心与收集菌体，培养至适当阶段后，使用离心机将菌液离心，收集菌体；
10、s7:进行洗涤：用生理盐水或适宜的缓冲液清洗菌体，去除培养过程中产生的代谢废物和残留的培养基；
11、s8:进行冻干或低温保存，将洗涤后的菌体进行冻干处理，或直接保藏在低温(如-80℃)冰箱中，以备后续使用；
12、s9:进行质量控制，对制备的混合菌种进行质量控制，包括菌落数量的测定、活力的评估和纯度检查等，确保产品的质量和安全性；
13、s10:进行包装，在无菌条件下，将制备好的混合菌种分装到适当的容器中，密封保存，之后即可结束整个通便促进消化的混合菌种的制备方法。
14、在一优选的实施方式中，所述步骤s2中，液体培养基包括：葡萄糖2％，蛋白胨1％，酵母提取物0.5％，牛肉膏1％，柠檬酸铵0.2％，吐温80 0.1％，k2hpo40.2％，mgso4·7h2o0.05％，mnso4·h2o 0.002％，cacl2·2h2o 0.11％，水余量，ph值调整至6.2-6.6。
15、在一优选的实施方式中，所述步骤s2中，在制备种子液时，要准确计算接种量，确保菌液的最终浓度符合实验要求。同时，要注意液体的振荡和混匀，以保证菌种均匀分布在培养基中。在培养过程中，要定期观察菌液的生长情况，包括od值和镜检，以确定菌种是否进入对数生长期。
16、在一优选的实施方式中，所述步骤s3中，在混合菌液时，要确保两种菌种的数量比例，可以根据实验需求进行调整。混合后的菌液需要进行适当的混匀，以保证两种菌种能够充分接触和相互作用。在混合过程中，要注意无菌操作，避免杂菌的污染。为了提高混合菌液的稳定性和协同效果，可以在混合前对菌种进行预培养，使其适应彼此的存在。此外，还可以通过添加适量的抗生素或抑制物质，抑制杂菌的生长，保证混合菌液的纯度。
17、在一优选的实施方式中，所述步骤s4中，在适应期培养中，要选择合适的培养基和培养条件，以促进两种菌种的适应和共存。同时，要定期观察菌液的生长情况，包括od值和镜检，以评估两种菌种的适应程度和生长状态。在适应期培养过程中，可以逐渐调整培养基的成分和浓度，以优化菌种的生长环境。此外，还可以通过添加适量的益生元或酵素，促进菌种的生长和代谢活性。
18、在一优选的实施方式中，所述步骤s5中，在扩大培养中，要选择合适的培养容器和培养条件，以提供充足的养分和适宜的环境条件。同时，要根据实验需求，计算接种量和培养时间，以确保菌种的数量和活性符合实验要求。在扩大培养过程中，可以通过监测菌液的od值、ph值和代谢产物的变化，评估菌种的生长状态和代谢活性。为了保持菌种的稳定性和活性，可以在培养基中添加适量的生长因子和维生素，以提供菌种所需的营养物质。
19、在一优选的实施方式中，所述步骤s6中，在离心过程中，要选择适当的离心速度和时间，以收集到纯净的菌体。同时，要注意离心过程中的温度控制，避免对菌体的影响。在收集菌体时，要尽量减少菌体的损伤和氧化的影响。为了提高菌体的收集效率，可以在离心前对菌液进行适当的稀释，以降低菌液的黏度。此外，还可以使用适当的离心管和离心技术，如差速离心或密度梯度离心，以提高菌体的纯度和活性。
20、在一优选的实施方式中，所述步骤s7中，在洗涤过程中，要选择合适的缓冲液和洗涤方法，以去除菌体表面的代谢废物和残留的培养基。同时，要注意洗涤次数和洗涤时间，以确保菌体的纯净度和活性。为了提高洗涤效果，可以使用适量的洗涤剂或表面活性剂，以帮助去除菌体表面的杂质。此外，还可以通过离心和重悬的循环操作，提高菌体的纯净度和均匀度。
21、在一优选的实施方式中，所述步骤s8中，在冻干或低温保存前，要确保菌体的纯净度和活性。在冻干过程中，要控制冻干机的温度和时间，以保持菌体的活性。在低温保存时，要确保冰箱的温度稳定，避免温度波动对菌体的影响。为了提高菌体的冻干效果和保存稳定性，可以在冻干前对菌体进行适当的预处理，如冷冻保护剂的添加。此外，还可以定期检测冻干或低温保存的菌体的活性和稳定性，以确保产品的质量和安全性。
22、综上所述，由于采用了上述技术方案，本专利技术的有益效果是：
23、1、本专利技术中，凝结魏茨曼氏菌hy267和副干酪乳酪杆菌hy126在肠道中定植后，能够通过产生乳酸、短链脂肪酸等有益物质，降低肠道ph值，刺激肠道平滑肌的收缩，从而促进肠道蠕动，帮助改善便秘状况。益生菌在代谢过程中会产生大量的水分，这有助于软化粪便，增加粪便的体积，使其更容易通过肠道，减少排便困难。凝结魏茨曼氏菌hy267和副干酪乳酪杆菌hy126能够竞争性地抑制有害菌的生长，减少肠道内毒素的生成，改善肠道微生态环境，有利于维持正常的肠道功能，促进排本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种通便促进消化的混合菌种及其制备方法，其特征在于：所述混合菌种包括：凝结魏茨曼氏菌HY267+副干酪乳酪杆菌HY126。
2.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤：
3.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中，液体培养基包括：葡萄糖2％，蛋白胨1％，酵母提取物0.5％，牛肉膏1％，柠檬酸铵0.2％，吐温80 0.1％，K2HPO40.2％，MgSO4·7H2O 0.05％，MnSO4·H2O 0.002％，CaCl2·2H2O 0.11％，水余量，pH值调整至6.2-6.6。
4.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中，在制备种子液时，要准确计算接种量，确保菌液的最终浓度符合实验要求；同时，要注意液体的振荡和混匀，以保证菌种均匀分布在培养基中；在培养过程中，要定期观察菌液的生长情况，包括OD值和镜检，以确定菌种是否进入对数生长期。
5.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备
6.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述步骤S4中，在适应期培养中，要选择合适的培养基和培养条件，以促进两种菌种的适应和共存；同时，要定期观察菌液的生长情况，包括OD值和镜检，以评估两种菌种的适应程度和生长状态；在适应期培养过程中，逐渐调整培养基的成分和浓度，以优化菌种的生长环境。
7.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述步骤S5中，在扩大培养中，要选择合适的培养容器和培养条件，以提供充足的养分和适宜的环境条件；同时，要根据实验需求，计算接种量和培养时间，以确保菌种的数量和活性符合实验要求；在扩大培养过程中，通过监测菌液的OD值、pH值和代谢产物的变化，评估菌种的生长状态和代谢活性；为了保持菌种的稳定性和活性，在培养基中添加适量的生长因子和维生素，以提供菌种所需的营养物质。
8.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述步骤S6中，在离心过程中，要选择适当的离心速度和时间，以收集到纯净的菌体；同时，要注意离心过程中的温度控制，避免对菌体的影响；在收集菌体时，要尽量减少菌体的损伤和氧化的影响；为了提高菌体的收集效率，在离心前对菌液进行稀释，以降低菌液的粘度。
9.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述步骤S7中，在洗涤过程中，要选择合适的缓冲液和洗涤方法，以去除菌体表面的代谢废物和残留的培养基；同时，要注意洗涤次数和洗涤时间，以确保菌体的纯净度和活性；为了提高洗涤效果，使用适量的洗涤剂或表面活性剂，以帮助去除菌体表面的杂质。
10.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述步骤S8中，在冻干或低温保存前，要确保菌体的纯净度和活性；在冻干过程中，要控制冻干机的温度和时间，以保持菌体的活性；在低温保存时，要确保冰箱的温度稳定，避免温度波动对菌体的影响；为了提高菌体的冻干效果和保存稳定性，在冻干前对菌体进行适当的预处理，进行冷冻保护剂的添加，以确保产品的质量和安全性。
...【技术特征摘要】
1.一种通便促进消化的混合菌种及其制备方法，其特征在于：所述混合菌种包括：凝结魏茨曼氏菌hy267+副干酪乳酪杆菌hy126。
2.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤：
3.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述步骤s2中，液体培养基包括：葡萄糖2％，蛋白胨1％，酵母提取物0.5％，牛肉膏1％，柠檬酸铵0.2％，吐温80 0.1％，k2hpo40.2％，mgso4·7h2o 0.05％，mnso4·h2o 0.002％，cacl2·2h2o 0.11％，水余量，ph值调整至6.2-6.6。
4.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述步骤s2中，在制备种子液时，要准确计算接种量，确保菌液的最终浓度符合实验要求；同时，要注意液体的振荡和混匀，以保证菌种均匀分布在培养基中；在培养过程中，要定期观察菌液的生长情况，包括od值和镜检，以确定菌种是否进入对数生长期。
5.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述步骤s3中，在混合菌液时，要确保两种菌种的数量比例，根据实验需求进行调整；混合后的菌液需要进行适当的混匀，以保证两种菌种能够充分接触和相互作用；在混合过程中，要注意无菌操作，避免杂菌的污染；为了提高混合菌液的稳定性和协同效果，在混合前对菌种进行预培养，使其适应彼此的存在；此外，还可以通过添加适量的抗生素或抑制物质，抑制杂菌的生长，保证混合菌液的纯度。
6.如权利要求1所述的一种通便促进消化的混合菌种的制备方法，其特征在于：所述步骤s4中，在适应期培养中，要选择合适的培养基和培养条件，以促进两种菌种的适应和共存；同时，要定期观察菌液的生长情况，包括od值和镜检...
【专利技术属性】
技术研发人员：李翠萍，杨利辉，
申请(专利权)人：青岛沐阳生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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