一种用于测定维生素B12的试剂组合和其测定方法及测定方法的应用技术

本发明专利技术公开了一种用于测定维生素B12的试剂组合和其测定方法及测定方法的应用。本发明专利技术提出的测定方法，包括以下步骤：S1、配制测定维生素B12的试剂组合，其包括以下组分：盐酸吡哆醛、DL‑苏氨酸、盐酸硫胺、L‑精氨酸、L‑赖氨酸、人血清白蛋白、丙酮酸钠、黄芪多糖、无水磷酸氢二钠、十二水和磷酸二氢钠、L‑天冬氨酸、L‑谷氨酸；S2、配制维生素B12测定用培养基；S3、配制维生素B12标准工作液和制备待测样液；S4、在包埋有乳杆菌的微孔板中加入S2～S3所制备的测定用培养基、维生素B12标准工作液及待测样液；S5、将微孔板培养后读数。本发明专利技术提出的试剂组合，既缩短了维生素B12的测定时间又起到标识作用，具有推广价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及食品中维生素b12测定，更具体地，涉及一种用于测定维生素b12的试剂组合和其测定方法。

技术介绍

1、维生素b12又叫钴胺素，是一种含有3价钴的多环系化合物，4个还原的吡咯环连在一起变成为1个咕啉大环(与卟啉相似)，是唯一含金属元素的维生素。维生素b12对人体有重要作用，其具有预防和缓解贫血、降低心血管疾病概率、营养神经、促进睡眠、缓解眼睛疲劳等功效，在保健品或乳制品中常常添加维生素b12保证人体的正常需求，但是维生素b12的过量摄取，可能会出现食欲缺乏、尿酸高、过敏等症状，因此对食品或乳制品中维生素b12的定量测试很有必要。

2、常用的维生素b12的定量测试方法是微生物法，利用乳酸杆菌(lactobacillus对维生素b12的特异性和灵敏性，定量测定出试样中维生素b12的含量，但是该方法步骤繁琐，人工操作加液过程中，容易漏加错加造成测试结果不准确，且耗时很长，待测液加入微生物微孔后通常需要避光培养44-48小时。

3、如中国文献201110108290.8提出一种牛奶和奶粉中维生素b12的检测方法，包括：a、将牛奶本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于测定维生素B12的试剂组合，其特征在于，所述试剂组由以下重量份的原料制备而成：盐酸吡哆醛10～22份、DL-苏氨酸30～40份、盐酸硫胺15～60份、L-精氨酸5～15份、L-赖氨酸5～15份、人血清白蛋白0.1～0.2份、丙酮酸钠2～4份、黄芪多糖0.2～0.4份、无水磷酸氢二钠0.1～0.2份、十二水和磷酸二氢钠0.5～1.0份、L-天冬氨酸20～30份、L-谷氨酸20～30份。

2.一种用于测定维生素B12的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的用于测定维生素B12的测定方法，其特征在于，步骤S2中的测定用培养基由商业化维...

【技术特征摘要】

1.一种用于测定维生素b12的试剂组合，其特征在于，所述试剂组由以下重量份的原料制备而成：盐酸吡哆醛10～22份、dl-苏氨酸30～40份、盐酸硫胺15～60份、l-精氨酸5～15份、l-赖氨酸5～15份、人血清白蛋白0.1～0.2份、丙酮酸钠2～4份、黄芪多糖0.2～0.4份、无水磷酸氢二钠0.1～0.2份、十二水和磷酸二氢钠0.5～1.0份、l-天冬氨酸20～30份、l-谷氨酸20～30份。

2.一种用于测定维生素b12的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的用于测定维生素b12的测定方法，其特征在于，步骤s2中的测定用培养基由商业化维生素b12测定培养基和步骤s1配制的试剂组合制备。

4.根据权利要求3所述的用于测定维生素b12的测定方法，其特征在于，步骤s2中的测定用培养基由1.7g商业化维生素b12培养基溶于20ml超纯水后添加200μl s1配制的试剂组制得。

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【专利技术属性】
技术研发人员：詹嘉玲，张恒，
申请(专利权)人：深圳市瑞赛生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：