一种快速同时测定发酵液中棘白菌素B和棘白菌素B母核含量的HPLC方法技术

本发明专利技术提出了一种快速同时测定发酵液中棘白菌素B和棘白菌素B母核含量的HPLC方法，解决了现有技术中缺少用于同时测定发酵液中棘白菌素B和棘白菌素B母核含量方法的缺陷。本发明专利技术的紫外检测器，排除了发酵液当中培养基等复杂组分的干扰，能同时快速﹑准确地将发酵液中的底物棘白菌素B和主成分棘白菌素B母核分离并进行定量测定，测定时间短，测定的准确率高，胜任高通量样品分析要求；本发明专利技术方法的棘白菌素B与棘白菌素B母核的分离度符合要求，拖尾因子小于1.5，峰形尖锐，峰纯度良好，理论塔板数大于10000，回收率高，精密度好，准确可靠，能为日常生产检验工作提供可靠快速的技术支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物分析，特别涉及一种快速同时测定发酵液中棘白菌素b和棘白菌素b母核含量的hplc方法。

技术介绍

1、阿尼芬净(anidulafungin)是第三代棘白菌素类半合成抗真菌药，属于两性霉素b的衍生物，它对多种形式的念珠菌感染都有抗菌作用，对真菌具有较高的特异性，其独特的作用靶点和显著疗效，能够替代三唑类抗真菌药物，且无交叉耐药性，不良反应较少，fda已于2006年批准其上市。

2、棘白菌素b(echinocandin b，简称ecb)是含有天然的带有亚油酰基侧链的六元环肽，能够非选择性抑制β－1.3－葡萄糖苷合成酶，由于ecb分子中存有酰基侧链，具有一定的溶血毒性，不能直接用于临床，需要进行一定修饰。

3、目前，阿尼芬净制备过程是利用犹他游动放线菌(actinoplanes utahensis)发酵产生的脱酰酶对棘白菌素b进行催化，使侧链断裂，转化成棘白菌素b母核(echinocandinbnuclcus，简称ecbn)和不饱和脂肪酸侧链，然后用化学合成方法在母核上加入新的侧链——戊氧–三苯羧基，制备得到阿尼芬净。...

【技术保护点】

1.一种快速同时测定发酵液中棘白菌素B和棘白菌素B母核含量的HPLC方法，其特征在于：通过反相液相色谱进行测定，色谱柱选用酰胺基键合相填料的色谱柱，流动相包括流动相A和流动相B，其中：流动相A包括水﹑磷酸盐和有机溶剂，流动相B包括有机相溶液，按体积分数设置梯度洗脱，以及采用外标法进行定量分析。

2.如权利要求1所述的快速同时测定发酵液中棘白菌素B和棘白菌素B母核含量的HPLC方法，其特征在于：其还包括液相色谱检测前溶液的制备，所述溶液包括：

3.如权利要求2所述的快速同时测定发酵液中棘白菌素B和棘白菌素B母核含量的HPLC方法，其特征在于：包括以下步骤：

<...

【技术特征摘要】

1.一种快速同时测定发酵液中棘白菌素b和棘白菌素b母核含量的hplc方法，其特征在于：通过反相液相色谱进行测定，色谱柱选用酰胺基键合相填料的色谱柱，流动相包括流动相a和流动相b，其中：流动相a包括水﹑磷酸盐和有机溶剂，流动相b包括有机相溶液，按体积分数设置梯度洗脱，以及采用外标法进行定量分析。

2.如权利要求1所述的快速同时测定发酵液中棘白菌素b和棘白菌素b母核含量的hplc方法，其特征在于：其还包括液相色谱检测前溶液的制备，所述溶液包括：

3.如权利要求2所述的快速同时测定发酵液中棘白菌素b和棘白菌素b母核含量的hplc方法，其特征在于：包括以下步骤：

4.如权利要求3所述的快速同时测定发酵液中棘白菌素b和棘白菌素b母核含量的hplc方法，其特征在于：将棘白菌素b标准储备液配制成10﹑50﹑100﹑200﹑400mg/l的棘白菌素b标准曲线工作溶液，将棘白菌素b母核标准储备液配制成10﹑50﹑100﹑200﹑4...

【专利技术属性】
技术研发人员：张茂华，吴燕强，蒋永飞，
申请(专利权)人：广东新达瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：