酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法技术

本申请提供酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法，包括：获取PVBS洗脱液，PVBS洗脱液采用PBS缓冲液和聚乙烯基吡咯烷酮PVP溶液混合而成；酒醅微生物洗脱，取预设质量酒醅，加入预设量PVBS洗脱液，并震荡第一预设时长，得到待过滤液；过滤处理，将待过滤液依次进行两次过滤后收集第二次过滤结束后的滤液，第一次过滤所用装置的过滤目数与第二次过滤所用装置的过滤目数之比为3～5，得到含微生物的PVBS洗脱过滤液体；离心去上清，得沉淀产物，沉淀产物作为酒醅微生物核酸自动化提取过程中的待提取样品。本申请预处理方法提高了提取核酸的浓度和总量，利于对酒醅进行宏基因组测序，保护核酸完整性。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及微生物核酸自动化提取的预处理方法，特别是涉及一种酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法。

技术介绍

1、目前大多数研究酒醅微生物群落的工作，都是基于扩增子的结果。随着测序通量的提高，宏基因组测序开始逐渐应用于研究微生物群落。宏基因组测序，或称为鸟枪法测序，是指将核酸样品不经pcr扩增，直接进行随机破碎，之后对随机化破碎的片段进行测序的技术。相比于扩增子测序，由于没有了对特定基因组区域进行扩增的步骤，宏基因组测序理论上可以覆盖所有的微生物基因组，因此，能够提供比扩增子测序更多的基因组信息。

2、但是目前市面上对酒醅进行宏基因组测序所用到的核酸基本都用传统的ctab法，难以适配现有的自动化提取设备，自动化难度高，只能用人工手提，提取效率低。

3、目前一些从白酒大曲或酒醅中提取微生物总dna的方法，在预处理阶段采用反复冻融的方法，对核酸完整性有较大的损害，无法满足宏基因组建库。且预处理采用梯度离心策略所获得核酸在微生物多样性上有一定的损失，不能更好的维持核酸的多样性。所采用预处理液为单纯的pbs，对反复蒸煮型酒醅的多糖、多酚处理能本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法，其特征在于，包括：

2.根据权利1所述的酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法，其特征在于，所述酒醅微生物洗脱步骤中，所述预设质量酒醅为5g～20g。

3.根据权利1所述的酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法，其特征在于，所述酒醅微生物洗脱步骤中，加入10ml～20ml所述PVBS洗脱液。

4.根据权利1所述的酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法，其特征在于，所述震荡第一预设时长的步骤为3000～5000rpm震荡10～15min。

5.根据权利要求1所述的酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法，其...

【技术特征摘要】

1.一种酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法，其特征在于，包括：

2.根据权利1所述的酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法，其特征在于，所述酒醅微生物洗脱步骤中，所述预设质量酒醅为5g～20g。

3.根据权利1所述的酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法，其特征在于，所述酒醅微生物洗脱步骤中，加入10ml～20ml所述pvbs洗脱液。

4.根据权利1所述的酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法，其特征在于，所述震荡第一预设时长的步骤为3000～5000rpm震荡10～15min。

5.根据权利要求1所述的酒醅微生物核酸自动化提取的预处理方法，其特征在于，所述第一次过...

【专利技术属性】
技术研发人员：艾梅，陈良强，孙艺华，刘群，宋泽伟，宗亮，卢建军，吕锡斌，杨帆，涂华彬，
申请(专利权)人：贵州茅台酒股份有限公司，
类型：发明
国别省市：