一种联合检测肺癌循环肿瘤细胞中EGFR基因多突变位点的荧光PCR试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及基因工程及分子生物学领域，公开了一种联合检测肺癌循环肿瘤细胞中EGFR基因多突变位点的荧光PCR试剂盒及其检测方法，包括用于检测EGFR基因突变所需的EGFR特异性引物和EGFR探针；内参基因引物和内参基因探针；所述EGFR特异性引物，用于扩增待测单个循环肿瘤细胞样本中的目标区域以得到扩增产物；所述EGFR探针，用于在所述扩增产物生成过程中进行水解反应，释放荧光信号；所述内参基因引物，用于扩增所述待测CTC中的管家基因以得到扩增产物，包括内参上游引物和内参下游引物；所述内参基因探针，用于在所述扩增产物生成过程中进行水解反应，释放荧光信号。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程及分子生物学领域，具体涉及egfr基因突变检测试剂盒及其检测方法。

技术介绍

1、随着人口老龄化和生活方式的改变，恶性肿瘤的发病率和死亡率呈现上升趋势，成为当前医学研究和临床实践的重要热点。近十几年来，恶性肿瘤的发病和死亡均呈持续上升态势，且不同恶性肿瘤的趋势变化差异较大。2024年2月，国家癌症中心发布了最新的癌症报告，无论是发病率还是死亡率，肺癌均位居首位，堪称“癌症头号杀手”。

2、肺癌已知的驱动基因主要有egfr、alk、braf等，其中，egfr研究最为深入，在非小细胞肺癌(nsclc)，尤其是腺癌，egfr基因的突变频率较高，特别是亚裔非吸烟患者，突变率高达40％—60％。

3、egfr基因位于人类7号染色体的短臂上，由188307个碱基组成，包括28个外显子。其酪氨酸激酶功能区由外显子18～24编码。egfr基因是原癌基因c-erbb-1(her-1)的表达产物，定位于细胞膜上。egfr主要通过两条途径将信号传递至细胞核，一条是ras→raf→mapk途径；另一条是pi3k→pkc→ikk途径。当本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种联合检测肺癌循环肿瘤细胞中EGFR基因多突变位点的荧光PCR试剂盒，包括用于检测EGFR基因突变所需的EGFR特异性引物和EGFR探针；内参基因引物和内参基因探针；其特征在于：

2.如权利要求1所述的联合检测肺癌循环肿瘤细胞中EGFR基因多突变位点的荧光PCR试剂盒，其特征在于：第一上游引物对应的核苷酸序列为SEQ ID NO:1，第一下游引物对应的核苷酸序列为SEQ ID NO:2。

3.如权利要求1所述的联合检测肺癌循环肿瘤细胞中EGFR基因多突变位点的荧光PCR试剂盒，其特征在于：第二上游引物对应的核苷酸序列为SEQ ID NO:5，第二下游引物对应...

【技术特征摘要】

1.一种联合检测肺癌循环肿瘤细胞中egfr基因多突变位点的荧光pcr试剂盒，包括用于检测egfr基因突变所需的egfr特异性引物和egfr探针；内参基因引物和内参基因探针；其特征在于：

2.如权利要求1所述的联合检测肺癌循环肿瘤细胞中egfr基因多突变位点的荧光pcr试剂盒，其特征在于：第一上游引物对应的核苷酸序列为seq id no:1，第一下游引物对应的核苷酸序列为seq id no:2。

3.如权利要求1所述的联合检测肺癌循环肿瘤细胞中egfr基因多突变位点的荧光pcr试剂盒，其特征在于：第二上游引物对应的核苷酸序列为seq id no:5，第二下游引物对应的核苷酸序列为seq id no:6。

4.如权利要求1所述的联合检测肺癌循环肿瘤细胞中egfr基因多突变位点的荧光pcr试剂盒，其特征在于：第三上游引物对应的核苷酸序列为seq id no:8，第三下游引物对应的核苷酸序列为seq id no:9。

5.如权利要求1所述的联合检测肺癌循环肿瘤细胞中egfr基因多突变位点的荧光pcr试剂盒，其特征在于：所述egfr探针包括：检测egfr基因19号外显子缺失突变的探针对应的核苷酸序列包括seq id no:3和seq id no:4，其中，所述seq id no:3对应的核苷酸序列的5’端标记有fam，所述seq id no:4对应的核苷酸序列的5’端标记有vic；检测egfr基因t790m突变的探针对应的核苷酸序列为seq id no:7；其中，所述seq id no:7对应的核苷酸序列的5’端标记有fam；检测egfr基因l858r突变的探针对应的核苷酸序列包...

【专利技术属性】
技术研发人员：高阳，韩改净，
申请(专利权)人：北京航空航天大学杭州创新研究院，
类型：发明
国别省市：