RNAmotif序列及其在提高先导编辑效率中的应用制造技术

技术编号:42473033 阅读:15 留言:0更新日期:2024-08-21 12:56
本发明专利技术公开了RNAmotif序列及其在提高先导编辑效率中的应用,属于基因编辑工具优化技术领域。本发明专利技术公开的RNAmotif序列,序列如下:CTTAGCCACTGCACCAGGGAATTCCCTGCCAGCGATTT。本发明专利技术的RNAmotif序列在不同细胞,不同位点以及不同的编辑类型,均有效地提高了先导编辑的效率,最高提高3.58倍;且序列较短,便于合成及连接。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因编辑工具优化,更具体的说是涉及rnamotif序列及其在提高先导编辑效率中的应用。


技术介绍

1、先导编辑是2019年由david liu开发的新型编辑工具,包括一个pe2蛋白(cas9切口酶+逆转录酶)和一个pegrna(用于定位和提供逆转录模板);能够实现精准灵活的基因编辑,但其效率较低,需要不断改进。目前其他解决效率低下问题的技术包括共表达显性负性错配修复蛋白mlh1dn、优化pe2蛋白密码子、添加核定位信号、添加dsgrna和cmp、添加85aa多肽等。

2、先导编辑工具还分为几种编辑体系,组成元件有所变化,比如pe3是在pe的基础上添加了一个sgrna,可以提高编辑的效率。

3、目前通过rnamotif提高先导编辑效率的文献,evopreq1 rnamoti所能提高的效率较低,为1.5~2.5倍。而xrrnamotif序列较长,为70~90nt,在构建载体时不便连接。

4、因此,提供rnamotif序列及其在提高先导编辑效率中的应用是本领域技术人员亟需解决的问题。

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本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.RNAmotif序列,其特征在于,具体序列如下:

2.权利要求1所述的RNAmotif序列在提高先导编辑效率中的应用。

3.pGL3-U6-RNAmotif-pegRNA表达载体,其特征在于,含有权利要求1所述的RNAmotif序列。

4.权利要求3所述的pGL3-U6-RNAmotif-pegRNA表达载体在提高先导编辑效率中的应用。

【技术特征摘要】

1.rnamotif序列,其特征在于,具体序列如下:

2.权利要求1所述的rnamotif序列在提高先导编辑效率中的应用。

3.pgl3-u6-rnamotif-pe...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘军李艾聪高元鹏张涌
申请(专利权)人:西北农林科技大学
类型:发明
国别省市:

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