通过与环糊精形成可溶性复合物防止含水微滴中的荧光产物在微滴间转移的方法技术

技术编号:42411329 阅读:24 留言:0更新日期:2024-08-16 16:29
一种用于将荧光分子保留在悬浮于乳液中的含水微滴内的方法,其包括将多个活细胞、多个荧光分子和多个环糊精分子以含水溶液合并。所述方法还包括利用疏水性流体乳化所述含水溶液以形成含水微滴。所述含水微滴中的至少一个含水微滴包括:(i)所述多个活细胞中的单个活细胞或呈同质聚集体的单个细胞种类,(ii)所述多个荧光分子中的至少一个荧光分子,以及(iii)所述多个环糊精分子中的至少一个环糊精分子。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

专利
与本公开一致的方法和产品总体上涉及细胞生物学、微生物学和微流控(microfluidics)。更具体地,与本公开一致的方法和产品涉及改善微滴中荧光的强度并减少荧光分子在阵列的微滴之间渗漏。领域讨论在各种情况下,发现致病细胞(dcc)的量低于常规分析技术的检测限。因此,用于识别dcc和表征其对治疗的响应的方法通常需要靶细胞的增殖和/或对靶细胞分子内容物和/或产物的靶标依赖性扩增,这取决于应用。由于与其它技术相比具有高灵敏度,核酸扩增(例如,基于pcr)测试(nat)已成为用于快速识别病原体的优选方法。使用nat(诸如pcr)可以在数小时内将dna从单个拷贝扩增到数十亿个拷贝。nat需要复杂的样品工作流程步骤,该工作流程步骤通常包括细胞裂解,随后是核酸浓缩步骤,该核酸浓缩步骤还从样品中去除pcr抑制剂。细胞裂解造成在核酸提取效率要求的不对称。例如,与革兰氏阴性细菌相比,分枝杆菌和真菌具有非常厚的细胞壁,并且因此更难裂解,通常需要机械裂解步骤来有效破坏它们的细胞壁。所以,利用简单化学裂解方法的nat通常对这些更棘手的病原体缺乏灵敏性。此外,细胞裂解试剂可抑制pcr反应,因为本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于将荧光分子保留在悬浮于乳液中的含水微滴内的方法,所述方法包括:

2.如权利要求1所述的方法,其中所述多个活细胞包括以下中的至少一种:细菌细胞、真菌细胞、植物细胞、以及动物细胞。

3.如权利要求1或2中任一项所述的方法,其中所述多个活细胞包括以下中的至少一种的活细胞:肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、和黏质沙雷氏菌。

4.如权利要求1或2中任一项所述的方法,其中所述多个活细胞包括人类细胞。

5.如权利要求4所述的方法,其中所述人类细胞来源于痰、唾液、尿液、血液、脑脊液、精液、粪便或组织。

6.如权利要求1至5中任一项所述的方法,...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种用于将荧光分子保留在悬浮于乳液中的含水微滴内的方法,所述方法包括:

2.如权利要求1所述的方法,其中所述多个活细胞包括以下中的至少一种:细菌细胞、真菌细胞、植物细胞、以及动物细胞。

3.如权利要求1或2中任一项所述的方法,其中所述多个活细胞包括以下中的至少一种的活细胞:肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、和黏质沙雷氏菌。

4.如权利要求1或2中任一项所述的方法,其中所述多个活细胞包括人类细胞。

5.如权利要求4所述的方法,其中所述人类细胞来源于痰、唾液、尿液、血液、脑脊液、精液、粪便或组织。

6.如权利要求1至5中任一项所述的方法,其中所述疏水性流体包含油。

7.如权利要求6所述的方法,其中所述油是氟碳油。

8.如权利要求1至7中任一项所述的方法,其中所述荧光分子是疏水性荧光分子。

9.如权利要求8所述的方法,其中所述疏水性荧光分子是刃天青染料分子、吖啶分子、四唑染料分子、香豆素染料分子、蒽醌染料分子、菁类染料分子、偶氮染料分子、呫吨染料分子、芳基次甲基染料分子、芘衍生物染料分子、或联吡啶钌络合物染料分子。

10.如权利要求1至9中任一项所述的方法,其中所述环糊精分子是α-环糊精分子、β-环糊精分子、或γ-环糊精分子。

11.如权利要求1至10中任一项所述的方法,其中所述荧光分子和所述环糊精分子不妨碍所述活细胞的活力或代谢活性。

12.如权利要求1至11中任一项所述的方法,其中所述合并和所述乳化在不大于40℃的温度下进行。

13.如权利要求1至12中任一项所述的方法,其进一步包括将表面活性剂合并在所述含水溶液中。

14.如权利要求13所述的方法,其中所述表面活性剂是氟表面活性剂。

15.一种乳液,其包含悬浮于疏水性流体中的多个含水微滴,其中所述含水微滴中的至少一个含...

【专利技术属性】
技术研发人员:罗丝·约翰逊
申请(专利权)人:派特恩生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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