一种用于检测牛羊布鲁氏菌感染ELIspot试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种用于检测牛羊布鲁氏菌感染的ELISpot试剂盒及其在牛羊布鲁氏菌感染领域的应用。所述检测试剂盒中包括：支持介质、捕获抗体、检测抗体、阴性对照和阳性对照、特异性刺激剂，特异性刺激剂为布鲁氏菌纯蛋白变应原Br‑PPA。本发明专利技术试剂盒中所采用的由杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有效价高、特异性好、与天然抗原亲和力强的优势；与布鲁氏菌试管凝集试验(SAT)、虎红平板凝集试验(RBT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法相比，能够更早地检测出牛羊布鲁氏菌感染，检测结果更为客观、准确，能更真实的反应机体细胞免疫状态，以改进现行布鲁氏菌感染的抗体检测方法中存在的准确率低、周期长、假阳性等缺点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种用于检测布鲁氏菌感染的elispot试剂盒，属于生物。

技术介绍

1、布鲁氏菌病(brucellosis，简称布病)是由布鲁氏菌(brucella)引起的一种动物源性传染病，可感染人和多种动物，牛种(b.abortus)和羊种(b.melitensis)布鲁氏菌是人体布病的主要病原。感染布病一般无明显症状，病变多局限于生殖器官，主要表现为流产、不孕、不育等症状。布病在我国被列为二类动物疫病，其流行与传播在影响畜牧业发展的同时，还严重威胁着人类的生命健康。因此，简便、快速、精确的诊断方法对于该病的防控极其重要。

2、布鲁氏菌是一种兼性胞内寄生菌，感染机体后主要引起细胞免疫应答。细胞免疫应答的主要方式之一是大量分泌细胞效应因子，这些细胞因子在机体对抗感染的过程中发挥重要的作用，其中γ干扰素主要是由特异性抗原刺激而活化的cd4+th1细胞、cd8+t细胞及nk细胞等产生的细胞因子，具有广泛的抗病毒、抗肿瘤活性以及免疫调节功能，是机体防御系统的重要组成部分，也是反映宿主t细胞免疫状态的重要指标，其在对抗布鲁氏菌感染中发挥重要作用，因此本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测布鲁氏菌感染的ELISpot试剂盒，其特征在于，其包含捕获抗体、检测抗体、特异性刺激剂、支持介质、阴性对照和阳性对照；所述捕获抗体为γ干扰素单克隆抗体3E3；所述检测抗体为经标记的牛羊γ干扰素单克隆抗体Bio-8D3；所述特异性刺激剂为布鲁氏菌纯蛋白变应原Br-PPA；所述支持介质包括微孔滤膜板。

2.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述γ干扰素单克隆抗体3E3是由保藏编号为CCTCC NO:C2023351的杂交瘤细胞株3E3或其传代细胞株分泌产生；所述γ干扰素单克隆抗体8D3是由保藏编号为CCTCC NO:C2023352的杂交瘤细胞株8D3或其传代...

【技术特征摘要】

1.一种用于检测布鲁氏菌感染的elispot试剂盒，其特征在于，其包含捕获抗体、检测抗体、特异性刺激剂、支持介质、阴性对照和阳性对照；所述捕获抗体为γ干扰素单克隆抗体3e3；所述检测抗体为经标记的牛羊γ干扰素单克隆抗体bio-8d3；所述特异性刺激剂为布鲁氏菌纯蛋白变应原br-ppa；所述支持介质包括微孔滤膜板。

2.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述γ干扰素单克隆抗体3e3是由保藏编号为cctcc no:c2023351的杂交瘤细胞株3e3或其传代细胞株分泌产生；所述γ干扰素单克隆抗体8d3是由保藏编号为cctcc no:c2023352的杂交瘤细胞株8d3或其传代细胞株分泌产生。

3.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述标记包括生物素标记或碱性磷酸酶标记。

4.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：焦新安，陈祥，王玉金，徐正中，郑成坤，孟闯，殷月兰，顾丹，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：