乙醇脱氢酶和转氨酶的融合酶、编码基因、工程菌及应用制造技术

本发明专利技术提供乙醇脱氢酶和转氨酶的融合酶、编码基因、工程菌及应用，在不影响转氨酶的高催化活性和高光学选择性的基础上，优化Linker的种类以及长度，实现了转氨酶和乙醇脱氢酶的融合表达。相比单酶ATA117作为催化剂，产率提高，相比于ATA117和ADH游离酶混合物，产率提高。该发明专利技术在不影响产率的前提下，节省了分离纯化ATA117和ADH单酶的操作步骤，节约了时间和试剂成本。该转氨酶有广泛的底物谱和良好的立体选择性，用本发明专利技术方法制备所得的融合酶基因工程菌具有对环境友好、操作简单、反应条件温和等优点，具有良好的工业应用前景。

【技术实现步骤摘要】

(一)本专利技术涉及一种乙醇脱氢酶和转氨酶的融合酶、编码基因和工程菌，特别涉及到乙醇脱氢酶与r-ω-转氨酶(ata117)的融合表达基因工程菌，并将其用于3,5-双三氟甲基苯乙酮(bpo)的不对称胺化反应制备(r)-1-[3,5-双(三氟甲基)苯基]乙胺(r-bpa)。

技术介绍

0、(二)
技术介绍

1、(r)-1-[3,5-双(三氟甲基)苯基]乙胺((r)-1-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]ethanamine，r-bpa)，cas号为127733-47-5，分子式c10h9f6n，分子量为257.18，沸点为168.9±35.0℃。r-bpa是良好的备选药物-选择性河豚毒素敏感型(ttx-s)阻滞剂的手性中间体，ttx-s在疼痛治疗中具有多种用途。

2、手性胺是众多药物成分、农用化学品和天然产品中关键的结构单元。目前，手性胺在国家的经济和人民的生活中发挥着重要作用。从反应过程来看，手性胺化合物的制备主要包括3种途径：外消旋胺的动力学拆分、动态动力学拆分和不对称合成。外消旋胺的动力学拆分过程中主要本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种乙醇脱氢酶和转氨酶的融合酶，其特征在于：所述乙醇脱氢酶和转氨酶的融合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.如权利要求1所述的乙醇脱氢酶和转氨酶的融合酶的编码基因。

3.如权利要求2所述的编码基因，其特征在于：所述编码基因的核苷酸序列如SEQ IDNO:6所示。

4.含如权利要求2所述编码基因的生物材料，其特征在于：所述生物材料为重组DNA、表达盒、转座子、质粒、病毒载体或细胞。

5.如权利要求4所述的生物材料，其特征在于：所述质粒为含所述转氨酶和乙醇脱氢酶的融合酶的编码基因的重组载体，所述重组载体以pET28a为基础载体...

【技术特征摘要】

1.一种乙醇脱氢酶和转氨酶的融合酶，其特征在于：所述乙醇脱氢酶和转氨酶的融合酶的氨基酸序列如seq id no:1所示。

2.如权利要求1所述的乙醇脱氢酶和转氨酶的融合酶的编码基因。

3.如权利要求2所述的编码基因，其特征在于：所述编码基因的核苷酸序列如seq idno:6所示。

4.含如权利要求2所述编码基因的生物材料，其特征在于：所述生物材料为重组dna、表达盒、转座子、质粒、病毒载体或细胞。

5.如权利要求4所述的生物材料，其特征在于：所述质粒为含所述转氨酶和乙醇脱氢酶的融合酶的编码基因的重组载体，所述重组载体以pet28a为基础载体。

6.如权利要求4所述的生物材料，其特征在于：所述细胞为由含所述转氨酶和乙醇脱氢酶的融合酶的编码基因的重组载体构建获得的重组菌，所述重组菌以e.coli bl21(de3)为宿主菌。

7.如权利要求1所述的乙醇脱氢酶和转氨酶的融合酶在不对称胺化制备手性胺中的应用。

8.如权利要求7所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢媛，刘潜，黄路，文可，杨超，谢明峰，顾楠，聂鹤云，
申请(专利权)人：江西中医药大学，
类型：发明
国别省市：