一种磁珠法提取干血斑基因组DNA的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种磁珠法提取干血斑基因组DNA的试剂盒及其应用，该试剂盒由核酸释放剂、裂解液、磁珠、洗涤液Ⅰ、洗涤液Ⅱ和洗脱液组成。本发明专利技术在核酸释放剂中加入NaOH和盐酸胍，能够快速裂解细胞，释放出核酸，同时在核酸释放剂中加入DTT对核酸纯度有明显的提升。此外，在裂解液中加入月桂基二甲基氧化胺也可以提高核酸的浓度和纯度。本发明专利技术的试剂盒可以高效提取干血斑样本中的核酸，具有纯度高、收率高、操作简单、用时短、全自动、高通量和成本低等优点，可满足大批量样本的提取要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及核酸提取的，具体地，涉及一种磁珠法提取干血斑基因组dna的试剂盒及其应用。

技术介绍

1、干血斑（dried blood spot，dbs），是一种将全血样品收集在滤纸上的血液采集方式，比传统的血液采集方法具有血量需求较少、血样采集和存储运输方便等优势，是基因检测尤其是大规模遗传病筛查过程中的一项有效工具，在上世纪五六十年代就已被用于苯丙酮尿症的新生儿筛查。随着串联质谱技术等的发展，干血斑被广泛应用于各种新生儿遗传代谢病的“新筛”。近些年，干血斑在基因检测领域也得到多方面的发展，如耳聋、地中海贫血等。此外，新生儿重症联合免疫缺陷（scid）中的t细胞受体重排删除环（trecs）和kappa删除重组切除环（krecs）的筛查也均使用干血斑。

2、目前提取干血斑基因组dna的方法主要有3种：（1）核酸释放方法：干血片经过清洗或不清洗，加入核酸释放剂浸润，高温裂解，离心得到核酸；（2）离心柱法：核酸裂解液裂解干血片中的细胞，释放核酸后利用硅胶膜特异性吸附核酸，再洗脱得到较纯的核酸；（3）磁珠法：核酸裂解液裂解干血片中的细胞，释放核酸后用本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种用于磁珠法提取干血斑基因组DNA的核酸释放剂，其特征在于，所述核酸释放剂含有以下组分：4～10 M盐酸胍、10～50 mM Tris-HCl、50～150 mM NaOH、10～40 mMEDTA、体积分数为0.8～1.2%的Triton X-100和0.8～1.2 M DTT。

2. 根据权利要求1所述的核酸释放剂，其特征在于，所述核酸释放剂含有以下组分：6～8 M盐酸胍、40～50 mM Tris-HCl、110～125 mM NaOH、10～15 mM EDTA、体积分数为0.8～1.2%的Triton X-100和0.8～1.2 M DTT。

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【技术特征摘要】

1. 一种用于磁珠法提取干血斑基因组dna的核酸释放剂，其特征在于，所述核酸释放剂含有以下组分：4～10 m盐酸胍、10～50 mm tris-hcl、50～150 mm naoh、10～40 mmedta、体积分数为0.8～1.2%的triton x-100和0.8～1.2 m dtt。

2. 根据权利要求1所述的核酸释放剂，其特征在于，所述核酸释放剂含有以下组分：6～8 m盐酸胍、40～50 mm tris-hcl、110～125 mm naoh、10～15 mm edta、体积分数为0.8～1.2%的triton x-100和0.8～1.2 m dtt。

3. 根据权利要求2所述的核酸释放剂，其特征在于，所述核酸释放剂含有以下组分：7m盐酸胍、50 mm tris-hcl、120 mm naoh、10 mm edta、体积分数为1%的triton x-100和1 mdtt。

4. 一种用于磁珠法提取干血斑基因组dna的裂解液，其特征在于，所述裂解...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶树秀，许泽仰，刘付家敏，李菲，葛毅媛，谢龙旭，
申请(专利权)人：广州凯普医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：