杂交瘤细胞株的制备方法、杂交瘤细胞株、小鼠单克隆抗体及其应用技术

本发明专利技术公开了一种杂交瘤细胞株的制备方法、杂交瘤细胞株、小鼠单克隆抗体及其应用，利用病毒转染技术得到过表达的突触素蛋白的293T‑SYP细胞株作为免疫原腹腔注射免疫小鼠，通过细胞免疫的方式使得小鼠对SYP产生免疫反应，选择已对SYP产生免疫反应的小鼠取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞FO进行融合，融合后的细胞经过阳性筛选和亚克隆后得到能够特异性结合SYP多肽分子及其表达细胞的特定杂交瘤细胞株，灵敏度和亲和力好；基于本申请提供特定杂交瘤细胞株制备得到的小鼠单克隆抗体可用于神经系统疾病的诊断和研究，尤其适合优选应用于酶联免疫ELISA检测或蛋白印迹Western Blot检测或免疫细胞化学ICC检测或DAB染色检测或流式细胞术Flowcyte检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种杂交瘤细胞株的制备方法以及杂交瘤细胞株，本专利技术还涉及了应用该杂交瘤细胞株制备得到的小鼠单克隆抗体以及该小鼠单克隆抗体的应用。

技术介绍

1、突触素蛋白(synaptophysin，syp)是一种关键的膜蛋白，存在于神经细胞的突触部位，它在神经信号传递中发挥着至关重要的作用。作为神经递质释放的关键调控因子，突触素蛋白直接参与调节神经传递物质的释放过程，影响着神经系统的正常功能和多种神经系统疾病的发展。例如，在阿尔茨海默病和帕金森病等神经退行性疾病中，突触素蛋白的异常表达或功能失调与病理过程密切相关。此外，精神分裂症等精神疾病也显示出与突触素蛋白相关的病理改变。因此，对突触素蛋白的研究不仅有助于揭示这些疾病的分子机制，还可能为新的治疗方法的开发提供重要线索。

2、制备针对突触素蛋白的单克隆抗体在医学研究和临床应用中具有重要的意义。单克隆抗体由于其高度的特异性和可重复性，在生物标记物检测、疾病诊断以及治疗药物的开发中扮演了重要角色。通过使用针对突触素蛋白的单克隆抗体，研究人员能够更精确地检测和定量神经组织中本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，包括如下操作步骤：

2.根据权利要求1所述杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，在所述步骤S10)中，通过慢病毒传染技术转染293T细胞构建高表达SYP的293T-SYP细胞株。

3.根据权利要求1所述杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，在所述步骤S20)中，每10-20天使用上述步骤S10)构建好的高表达SYP的293T-SYP细胞株对小鼠进行腹腔注射免疫一次，共进行3-5次腹腔注射免疫。

4.根据权利要求1所述杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，在所述步骤S40)中，基于人体SYP的氨基酸序列，利用DNAS...

【技术特征摘要】

1.一种杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，包括如下操作步骤：

2.根据权利要求1所述杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，在所述步骤s10)中，通过慢病毒传染技术转染293t细胞构建高表达syp的293t-syp细胞株。

3.根据权利要求1所述杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，在所述步骤s20)中，每10-20天使用上述步骤s10)构建好的高表达syp的293t-syp细胞株对小鼠进行腹腔注射免疫一次，共进行3-5次腹腔注射免疫。

4.根据权利要求1所述杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，在所述步骤s40)中，基于人体syp的氨基酸序列，利用dnastar软件设计3条多肽并进行合成得到多种多肽，采用酶联免疫elisa的方法进行验证筛选得到具有更高灵敏度的多肽作为所述的特定多肽。

5.根据权利要求1所述杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，在所述步骤s40)中，所述天然表达syp的神经细胞采用具有syp天然表达效果的细胞系，优选采用pc-12细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈胜胜，居金明，姚扬明，刘向晖，汪春芳，
申请(专利权)人：苏州康和顺生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：